Anticorps anti-Cas9, clone 7A9

Cas9 est une endonucléase essentielle du sérotype M1 de Streptococcus pyogenes qui fait partie du système immunitaire inné de cet organisme, ou de son système immunitaire adaptatif CRISPR (courte répétition palindromique groupée et régulièrement espacée) qui fournit une protection contre les éléments génétiques mobiles (virus, éléments transposables et plasmides conjugatifs). Les clusters CRISPR contiennent des espaceurs, des séquences complémentaires d'éléments mobiles antérieurs, et des acides nucléiques envahissants ciblés. Les clusters CRISPR sont transcrits et transformés en ARN CRISPR (ARNcr). Dans les systèmes CRISPR de type II, le traitement correct des pré-ARNcr nécessite un petit ARN trans-codé (ARNtracr), une ribonucléase 3 (rnc) endogène et Cas9. L'ensemble Cas9/ARNcr/ARNtracr clive ensuite de manière endonucléolytique la cible d'ADNdb linéaire ou circulaire complémentaire de l'espaceur. Le brin ciblé non complémentaire de l'ARNcr est d'abord coupé de manière endonucléolytique, puis découpé de façon 3′-5′ de manière exonucléolytique. La liaison à l'ADN requiert une protéine et les deux espèces d'ARN. Cas9 reconnaît probablement un court motif au sein des séquences répétitives CRISPR (motif PAM) pour faciliter la distinction entre le soi et le non soi. Les chercheurs espèrent pouvoir exploiter la programmabilité et la nature précise du clivage par Cas9 pour créer des technologies de production d'ADN recombinant plus efficaces.

Poids réel (observé) : ~160 kDa

Domaine N-terminal de Cas9.

Analyse par western blotting : Une concentration de 0,5 µg/ml d'un lot représentatif a permis de détecter Cas9 dans 1 µg de lysat de cellules HEK293T exprimant Myc-Cas9.
Analyse par immunoprécipitation : Un lot représentatif a permis d'immunoprécipiter Cas9 dans du lysat de cellules exprimant Flag-Cas9 et Myc-Cas9 (travail réalisé par un laboratoire indépendant).

Domaine de recherche
Anticorps secondaires et anticorps de contrôle

L'anticorps anti-Cas9, clone 7A9 (réf. MAC133), est un anticorps dirigé contre Cas9 destiné à être utilisé en western blotting, en immunoprécipitation et en immunocytochimie.

Sous-domaine de recherche
Anticorps secondaires adsorbés pour double marquage

MAC133 reconnaît Cas9 et dCas9 (protéine Cas9 déficiente en nucléase)

Format : purifié

IgG1κ monoclonale de souris purifiée, dans un tampon contenant de la Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4), du NaCl 150 mM et 0,05 % d'azoture de sodium.

Produit purifié sur protéine G

Stable entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.

Produit évalué par western blotting sur du lysat de cellules HEK293 exprimant Flag-Cas9.

Analyse par western blotting : Une concentration de 0,5 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter Cas9 dans 1 µg de lysat de cellules HEK293 exprimant Flag-Cas9.

Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.

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