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A propos de cet article
UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.54
Conjugate:
alkaline phosphatase conjugate
Clone:
polyclonal
Application:
—
Citations:
955
Service technique
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Laissez-nous vous aiderbiological source
sheep
conjugate
alkaline phosphatase conjugate
antibody product type
primary antibodies
clone
polyclonal
form
solution
packaging
pkg of 200 μL (150 U)
manufacturer/tradename
Roche
isotype
IgG
storage temp.
2-8°C
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General description
La digoxigénine est un haptène utilisé pour le marquage et la détection d′acides nucléiques. Ce produit contient des fragments Fab d′anticorps polyclonaux anti-digoxigénine, conjugués à la phosphatase alcaline. L′anti-digoxigénine-AP, fragments Fab, est utilisé pour la détection des composés marqués à la digoxigénine.
Application
Utiliser l′anti-digoxigénine-AP, fragments Fab, pour la détection des composés marqués à la digoxigénine dans les applications suivantes :
- Puces à ADNc
- Hybridation sur colonies/plaques
- Dot blots
- ELISA
- Essai de décalage de gel
- Immunohistochimie
- Hybridation in situ
- Blot de séquençage de l′ADN non radioactif
- Northern blots
- Essais de protection à la RNase
- Southern blots
- Western blots
- Hybridation in situ en fluorescence
- Hybridation in situ sur coupes et Hybridation in situ sur préparations complètes
- Essai de décalage de mobilité électrophorétique
Biochem/physiol Actions
L′anticorps polyclonal de mouton est spécifique à la digoxigénine et à la digoxine et ne présente aucune réactivité croisée avec les autres stéroïdes, notamment les œstrogènes et androgènes.
Inactivation à la chaleur : oui
Inactivation à la chaleur : oui
Preparation Note
Après immunisation avec la digoxigénine, l′IgG de mouton a été purifiée par chromatographie d′échange d′ions, et l′IgG spécifique a été isolée par immunosorption. Les fragments Fab obtenus par digestion à la papaïne ont été purifiés par exclusion stérique, conjugués au marqueur spécifique et stabilisés dans du tampon.
Concentration de travail : La concentration de travail du conjugué dépend de l′application et du substrat. Les concentrations suivantes peuvent servir de guide :
Solution de travail : Northern blots, Southern blots
100 mM acide maléique, 150 mM NaCl, pH 7,5.
Western blots
50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, pH 7,5
Autres applications
100 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, pH 7,5
Pour réduire la liaison non spécifique : 1 % de réactif de blocage (p/v) ou 1 à 5 % de sérum de veau fœtal inactivé à la chaleur (v/v) ou de sérum de mouton normal.
Conditions de stockage (solution de travail) : Le conjugué dilué est stable entre 2 et 8 °C pendant 12 heures.
Il est impératif de le préparer fraîchement juste avant l′emploi.
Concentration de travail : La concentration de travail du conjugué dépend de l′application et du substrat. Les concentrations suivantes peuvent servir de guide :
- Dot blots : 150 mU/ml
- ELISA : 150 à 300 mU/ml
- Immunohistochimie/immunocytochimie : 250 à 500 mU/ml
- Hybridation in situ : 1,5 à 7,5 U/ml
- Southern blots : 150 mU/ml
- Western blots : 250 à 500 mU/ml
Solution de travail : Northern blots, Southern blots
100 mM acide maléique, 150 mM NaCl, pH 7,5.
Western blots
50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, pH 7,5
Autres applications
100 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, pH 7,5
Pour réduire la liaison non spécifique : 1 % de réactif de blocage (p/v) ou 1 à 5 % de sérum de veau fœtal inactivé à la chaleur (v/v) ou de sérum de mouton normal.
Conditions de stockage (solution de travail) : Le conjugué dilué est stable entre 2 et 8 °C pendant 12 heures.
Il est impératif de le préparer fraîchement juste avant l′emploi.
Analysis Note
- Réactivité croisée avec la digitoxine et la digitoxigénine : <1 %
- Aucune réactivité croisée avec les stéroïdes humains œstrogéniques et androgéniques, p. ex. œstradiol ou testostérone
- Réactivité croisée avec la digoxine : inconnu
- Le conjugué ne se lie pas du tout à lui-même
- Normalement, une molécule de conjugué se lie à une molécule de digoxigénine, bien qu′il existe deux sites de liaison possibles pour la digoxigénine
- Une liaison non spécifique à l′ARN n′est pas anticipée
Other Notes
Pour la recherche en sciences de la vie uniquement. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.
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