MES hydrate

Le MES hydraté a été utilisé :

• pour mettre en suspension des cellules avant des études d'induction autophagique.
• dans la préparation d'un milieu de Murashige et Skoog pour la croissance de semis d'Arabidopsis thaliana.
• pour la conjugaison de sondes d'hybridation avec des billes avant amplification par PCR.
• pour traiter une matrice dérivée de fibroblaste avant conjugaison avec de l'héparine en vue de son utilisation comme plateforme d'administration de facteur de croissance de l'endothélium vasculaire.
• comme tampon de lavage dans une étude de biologie moléculaire.
• comme constituant de milieux de culture.

Le tampon MES hydraté (acide 2-(N-morpholino)éthanesulfonique monohydraté) est un tampon biologique zwittérionique polyvalent couramment utilisé en biologie moléculaire et en culture cellulaire. Son pKa de 6,1 en fait l'option idéale pour tamponner les solutions à pH physiologique et garantir des résultats précis et fiables. La grande solubilité dans l'eau et la liaison extrêmement réduite aux ions métalliques de ce tampon en font une solution de choix pour diverses applications, notamment les travaux de biologie moléculaire tels que l'extraction d'ADN et d'ARN, la PCR ou l'électrophorèse sur gel. C'est aussi un composé clé en culture cellulaire qui constitue une alternative moins toxique au tampon Tris et au tampon phosphate.

Outre ces applications, le tampon MES hydraté est largement utilisé pour réguler le pH des milieux de culture végétale, des solutions de réactifs et des expériences physiologiques. C'est l'option privilégiée pour étudier les effets du pH sur les réactions enzymatiques et approfondir les interactions des protéines et autres biomolécules avec les ions métalliques. En tant que tampon de Good, le MES hydraté répond à des critères stricts : pKa intermédiaire, solubilité maximale dans l'eau et minimale dans les autres solvants, effet de sel réduit, stabilité à différentes températures, stabilité chimique et enzymatique, faible absorption dans le spectre UV ou visible et synthèse aisée. De plus, il ne forme pas de complexe avec la plupart des ions métalliques, garantissant ainsi des résultats fiables dans les applications impliquant ce type d'ions.

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Les solutions sont stables plusieurs mois entre 2 et 8 °C. Stériliser par filtration sur des filtres de 0,2 uM. Il n′est pas recommandé d′autoclaver les tampons à base d′acide sulfonique. Si les tampons doivent être exempts de nucléases, commencer par traiter l′eau, puis ajouter le tampon après l′autoclavage. Les solutions de MES autoclavées deviennent jaunes, mais cette coloration n′a aucune incidence sur le pH (pas de variation mesurable). L′identité du produit de dégradation jaune est inconnue.

Un tampon à base de MES peut être ajusté au pH souhaité par titrage au NaOH. Il est également possible d′obtenir le pH recherché par mélange d′une solution mère de MES et d′une solution de sel sodique de MES. La littérature propose des tables de mélange normalisées permettant de préparer des tampons de pH donné à partir de solutions mères. Il n′est pas recommandé d′utiliser du MES pour tamponner une solution à pH 7,4 ; dans ce cas, préférez d′autres tampons.