P5147
Protéase from Streptomyces griseus
Type XIV, ≥3.5 units/mg solid, powder
Synonyme(s) :
Actinase E, Pronase E
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A propos de cet article
Numéro CAS:
UNSPSC Code:
12352204
eCl@ss:
32160410
EC Number:
232-909-5
NACRES:
NA.54
MDL number:
Specific activity:
≥3.5 units/mg solid
Biological source:
Streptomyces griseus
Service technique
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Laissez-nous vous aiderbiological source
Streptomyces griseus
Quality Level
type
Type XIV
form
powder
specific activity
≥3.5 units/mg solid
solubility
10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc: soluble 0.2 mg/mL at 37 °C, clear, colorless to tan
shipped in
wet ice
storage temp.
−20°C
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General description
Complètement inactivée par chauffage à une température supérieure à 80 °C pendant 15 à 20 minutes.
Application
Cette enzyme est plus active dans une plage de pH plus élevée que les protéases alcalines connues, présentant une activité protéolytique même dans une solution de NaOH à 0,2 N. Elle s′avère utile pour la protéolyse des protéines insolubles et pour les études structurelles sur les protéines.
La protéase est généralement utilisée pour les procédures d′isolement des acides nucléiques, en réalisant des incubations de 0,5 à 3,0 heures en présence de dodécylsulfate de sodium à 0,2 % et d′EDTA à 10 mM.
La protéase est une enzyme utilisée pour décomposer les protéines par hydrolyse des liaisons peptidiques. Elle est utilisée pour dégrader les protéines, pour étudier les inhibiteurs de protéases et pour évaluer la cinétique d′inactivation thermique. La protéase est utilisée lors des incubations dans les procédures d′isolement des acides nucléiques. La protéase de Streptomyces griseus a été utilisée dans des études de cristallographie et de cinétique du complexe covalent formé par les aldéhydes tétrapeptides et les protéases à sérine.
La protéase de Streptomyces griseus a été utilisée :
- pour la digestion du tissu de noyau gélatineux
- dans la catalyse de la réaction de Mannich à un récipient
- pour la déprotéinisation de l′amidon
- dans la digestion de tranches de cerveau pour la dissociation des cellules
L′enzyme proposée par Sigma a été utilisée pour la digestion et l′analyse des complexes antithrombine-héparine. Elle a également été utilisée pour l′isolement de l′amidon résistant aux enzymes.
Biochem/physiol Actions
Ce produit est un mélange d′au moins trois activités caséinolytiques et d′une activité d′aminopeptidase. Les enzymes caséinolytiques correspondent à la protéase A de Streptomyces griseus, la protéase B de Streptomyces griseus et la trypsine de Streptomyces griseus. Ce produit peut être utilisé lorsqu′une dégradation extensive ou complète des protéines est nécessaire. Ce mélange est très peu spécifique et peut digérer la caséine jusqu′à l′obtention de >70 % d′acides aminés individuels.
La protéase dégrade les protéines par hydrolyse des liaisons peptidiques. Les protéases sont inactivées par les inhibiteurs à site actif de sérine, comme le fluorure de phényl méthyl sulfonyle (PMSF) et le di-isopropyl-fluorophosphate. La protéase de Streptomyces griseus est un mélange d′au moins trois activités protéolytiques incluant une sérine protéase extracellulaire. Les sérines protéases sont actives sur une large gamme de substrats, et cette activité est attribuée à un site actif composé d′un résidu Asp, un résidu His et un résidu Ser présents dans la molécule. Cette enzyme hydrolyse préférentiellement les liaisons peptidiques du côté carboxylique de l′acide glutamique ou aspartique.
Mélange d′au moins trois activités protéolytiques incluant une sérine protéase extracellulaire. En général, les sérines protéases sont actives sur une large gamme de substrats, et cette activité est attribuée à un site actif composé d′un résidu Asp, un résidu His et un résidu Ser dans la molécule. Cette enzyme hydrolyse préférentiellement les liaisons peptidiques du côté carboxylique de l′acide glutamique ou aspartique.
Features and Benefits
- très stable dans la gamme de pH comprise entre 5,0 et 9,0 avec une activité optimale à pH 8,8
- compatible avec de nombreux tampons d′isolement de l′ADN et de l′ARN
- accepte un large éventail de substrats
Preparation Note
Isolée à partir de milieu de culture de S. griseus.
Analysis Note
Contient de l′acétate de calcium.
Other Notes
Une unité hydrolyse la caséine et produit une couleur équivalente à 1,0 μmole (181 μg) de tyrosine par min à pH 7,5 et à 37 °C (couleur obtenue avec le réactif de Folin-Ciocalteu).
signalword
Danger
hcodes
Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
target_organs
Respiratory system
Classe de stockage
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 2
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
ppe
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
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An improved fractionation system for pronase on CM-sephadex.
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Canadian journal of biochemistry, 49(11), 1195-1201 (1971-11-01)
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Although heparin has been used clinically for prophylaxis and treatment of thrombosis, it has suffered from problems such as short duration within compartments in vivo that require long term anticoagulation. A covalent antithrombin-heparin complex has been produced with high anticoagulant
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