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Merck

P6611

Gel d′affinité au nickel HIS-Select®

(1:1 suspension in a 20% ethanol solution)

Synonyme(s) :

Ni-NTA resin, nickel charged agarose

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A propos de cet article

NACRES:
NA.56
UNSPSC Code:
12352200
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conjugate

magnetic beads

form

(1:1 suspension in a 20% ethanol solution)

feature

hydrophilic

packaging

pkg of 1 mL, pkg of 100 mL, pkg of 25 mL, pkg of 5 mL, pkg of 500 mL

concentration

1.5-2.4 mL/mL (suspension in packed gel)

technique(s)

protein purification: suitable

color

faint blue to very dark blue

matrix

6% Beaded Agarose

capacity

>15 mg/mL, gel binding capacity (protein)(with an approx. 30 kDa protein)

transition temp

flash point 32 °C (closed cup)

storage temp.

2-8°C

Quality Level

General description

Le gel d'affinité au nickel HIS-Select® est un produit pour chromatographie d'affinité sur ions métalliques immobilisés (IMAC) qui est utilisé pour la purification de protéines à étiquette His. S'il est vrai que la liaison hydrophile non chargée unique du groupement chélate de l'acide nitrilotriacétique (NTA) quadridenté breveté sur l'agarose perlé chargé en nickel garantit une forte sélectivité pour la purification des protéines à étiquette His à petite ou moyenne échelle, elle réduit également l'adhésion non spécifique des autres protéines. Le gel d'affinité au nickel HIS-Select est sélectif pour les protéines recombinantes à étiquette His tout en présentant une faible fixation non spécifique des autres protéines. La sélectivité peut être modulée par l'inclusion d'imidazole pendant la chromatographie.

Application

Le gel d'affinité au nickel HIS-Select® a été utilisé dans la purification de protéines recombinantes comme la protéine de liaison au calcium à motifs "main EF" (ou "EF-hand" en anglais) (S100A14), la protéine alpha du facteur de transcription à homéodomaine LIM 1, le récepteur sigma-1 ainsi qu'une boucle en épingle à cheveux, la protéine stable 1 (SP1) et la protéine de fusion BCR/ABL.

Features and Benefits

  • Grande sélectivité, pour une plus grande pureté
  • Liaison hydrophile non chargée inédite qui réduit l'adhésion non spécifique
  • Capacité de fixation supérieure à 15 mg/ml pour les protéines marquées à l'histidine
  • Fixation en conditions dénaturantes ou non dénaturantes
  • Purification en une seule étape
  • Interactions ioniques indésirables réduites au minimum
  • Très faible élution du nickel
  • Taille des billes : 45 à 165 μm

Physical form

Suspension 1:1 dans une solution d′éthanol à 20 %

Preparation Note

Le gel d'affinité au nickel HIS-Select reste stable pendant au moins un an lorsqu'il est conservé dans de bonnes conditions. Il est recommandé de nettoyer le gel d'affinité au nickel HIS-Select après chaque utilisation et d'ajouter un agent antimicrobien tel que de l'éthanol à 20 % dans le tampon de conservation.

Other Notes

Ce produit est également disponible avec la technologie EZview™ (référence E3528).

Legal Information

HIS-Select is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

pictograms

Flame

signalword

Warning

hcodes

Hazard Classifications

Flam. Liq. 3

Classe de stockage

3 - Flammable liquids

wgk

WGK 3

flash_point_f

89.6 °F - closed cup

flash_point_c

32 °C - closed cup


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  1. Can imidazole be used with HIS-Select® Nickel Affinity Gel, Product P6611?

    For column chromatography, no more than 20 mM is suggested in the extract, equilibration, and wash buffers to prevent non-specific binding of proteins. No more than 250 mM is suggested for the elution buffers.  Many proteins will elute with imidazole levels as low as 100 to 200 mM.  For batch methods the imidazole concentration may have to be reduced or eliminated.When a protein is expressed at low levels, the presence of the imidazole limits the binding of the protein in the batch method but not when  used in a column.

  2. Can Tris buffers be used instead of phosphate buffer for HIS-Select® Nickel Affinity Gel, Product P6611?

    Yes, Tris buffers should work.

  3. Why won't my recombinant protein with a histidine-containing tag bind to HIS-Select® Nickel Affinity Gel, Product P6611?

    Verify the pH and composition of sample and equilibration buffers.  Make sure there are no chelating or reducing agents present in the extraction buffer. If using the batch mode, remove imidazole.  Run the affinity purification under denaturing conditions.  Run a Western blot of the extract to verify that the recombinant protein is present.

  4. Can I use SDS with HIS-Select® Nickel Affinity Gel, Product P6611?

    0.1% SDS has been used with some samples, with no adverse effects on the observed protein binding.  However, SDS will effectively coat proteins and may block the binding to the column.  It is probably very  protein-specific and an SDS concentration that works for one protein may not work for another.

  5. What needs to be done if the HIS-Select® Nickel Affinity Gel, Product P6611, resin turns brown on reuse?

    During purification many protein extracts tend to discolor an affinity gel during the loading step. The original color will return after the wash or elution step. If the color is still not changing strip and recharge the affinity gel with nickel.  Wash with EDTA and recharge with Nickel solution.

  6. Which document(s) contains shelf-life or expiration date information for a given product?

    If available for a given product, the recommended re-test date or the expiration date can be found on the Certificate of Analysis.

  7. How do I get lot-specific information or a Certificate of Analysis?

    The lot specific COA document can be found by entering the lot number above under the "Documents" section.

  8. How do I find price and availability?

    There are several ways to find pricing and availability for our products. Once you log onto our website, you will find the price and availability displayed on the product detail page. You can contact any of our Customer Sales and Service offices to receive a quote.  USA customers:  1-800-325-3010 or view local office numbers.

  9. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product. 

  10. My question is not addressed here, how can I contact Technical Service for assistance?

    Ask a Scientist here.

Enhanced cellulose degradation by nano-complexed enzymes: synergism between a scaffold-linked exoglucanase and a free endoglucanase
Morais S, et al.
Journal of Biotechnology, 147(3-4), 205-211 (2010)
Leucine zipper-like motifs of HrpZPss are not essential to induce hypersensitive response in tobacco
Anil K, et al.
Journal of Plant Physiology, 96(1), 57-62 (2014)
Flow cytometric immunobead assay for the detection of BCR-ABL fusion proteins in leukemia patients
Weerkamp F. et al.
Leukemia, 23(6), 1106-1117 (2009)
Lindsay S Garrenton et al.
Molecular and cellular biology, 29(2), 582-601 (2008-11-13)
Saccharomyces cerevisiae cells are capable of responding to mating pheromone only prior to their exit from the G(1) phase of the cell cycle. Ste5 scaffold protein is essential for pheromone response because it couples pheromone receptor stimulation to activation of
Zhijin Zhang et al.
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Fine-tuning of ethylene production plays an important role in developmental processes and in plant responses to stress, but very little is known about the regulation of ethylene response factor (ERF) proteins in ethylene biosynthesis genes and ethylene production. Identifying cis-acting

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