3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine

Le substrat TMB est un substrat chromogène de la peroxydase de raifort (HRP).

Le substrat TMB est employé dans les protocoles ELISA qui utilisent des conjugués à la peroxydase de raifort. Il développe un produit de réaction soluble de couleur bleue qui peut être mesuré à 370 nm ou 655 nm. La réaction est arrêtée par l'ajout d'acide, formant un produit de réaction jaune dont l'intensité peut être mesurée avec précision à 450 nm.

Comment utiliser notre substrat TMB ?

• Notre substrat TMB est un substrat de peroxydase prêt à l'emploi qui contient de la 3,3',5,5'-tétraméthylbenzidine (TMB) dans un tampon légèrement acide. Avant de réagir avec la peroxydase, le substrat se présente sous la forme d'une solution incolore à bleu-vert clair. Ce système de substrat forme un produit de réaction bleu lorsqu'il réagit avec la peroxydase.
• Lorsque le point final du test est atteint (ajout d'acide), mesurer l'intensité du substrat TMB à 450 nm.
• Notre substrat TMB est recommandé pour les protocoles ELISA (sur micropuits). Il a été utilisé dans différents tests comme substrat de conjugué anticorps/peroxydase de raifort pour la détection de la glycoprotéine du virus Hendra, du tétracosactide, de la sIgA et des pièges extracellulaires des neutrophiles (PEN ou NET en anglais).
• Ce système de substrat liquide à base de 3,3',5,5'-tétraméthylbenzidine (TMB) n'est pas recommandé pour les techniques à membrane. Étant donné que le substrat TMB produit un produit de réaction soluble, son utilisation n'est pas recommandée pour les analyses par histochimie ou par transfert (blotting).

Remarque : Le substrat TMB est sensible à la lumière ; il doit donc être conservé à l'abri du soleil ou de toute autre source de rayonnement UV.