Colorants pour gel d'électrophorèse des protéines

Solutions de fixation

Après l'électrophorèse sur gel, les protéines sont généralement fixées dans le gel pour éviter leur dispersion avant la coloration. Certains colorants pour gels contiennent des produits chimiques qui rendent inutile la fixation des gels avant la coloration.

Colorimetric Protein Gel Stains

• Coomassie Brilliant Blue est utilisé pour colorer les protéines sur les gels de polyacrylamide par le biais d'interactions électrostatiques avec les groupes amino et carboxyle des protéines.
• ReadyBlue™ Protein Gel Stain est une coloration de Coomassie colloïdale rapide et sensible pour les gels de polyacrylamide fournie sous forme de solution prête à l'emploi, permettant un protocole plus rapide et simplifié. ReadyBlue™ peut être imagé par des méthodes colorimétriques ou de fluorescence IR.  ; Cette formulation sûre ne contient pas de solvants organiques ni d'acide phosphorique et peut être réutilisée jusqu'à 3 fois. Une sensibilité allant jusqu'à 2 ng par bande a été démontrée avec ReadyBlue™.
• EZBlue™ Gel Staining Reagent est une coloration colloïdale des protéines Coomassie Brilliant Blue G-250 pratique, sensible et sûre qui améliore les résultats de l'électrophorèse des protéines tout en réduisant considérablement le temps de coloration. En tant que colorant colloïdal, il ne réagit qu'avec les protéines, et non avec le gel lui-même. La coloration de fond est réduite, de sorte que les bandes de protéines peuvent être visualisées presque immédiatement sur les gels de polyacrylamide et les membranes PVDF. Aucune étape de dé-coloration n'est nécessaire, bien qu'un lavage à l'eau puisse intensifier les bandes et clarifier le fond. Le réactif EZBlue™ est extrêmement sensible, détectant aussi peu que 5 ng de protéines.
• Le kit de détection réversible des protéines est un système de détection unique conçu pour la coloration des protéines sur des membranes de nylon, de nitrocellulose et de PVDF ou des gels de PAGE avec une sensibilité de détection similaire à celle des colorants de Coomassie. La plupart des autres colorants produisent des fonds élevés sur les membranes de nylon en raison des fortes interactions de charge avec la membrane. La coloration est facilement réversible à l'aide d'une solution d'EDTA, de sorte que la bande peut être réutilisée pour le transfert de Western ou pour l'analyse des séquences d'acides aminés.
• Le colorant bleu noir de naphtol peut être utilisé pour colorer les protéines sur les gels de polyacrylamide, les gels d'agarose et les membranes de nitrocellulose. Après l'électrophorèse, il est recommandé de fixer les protéines dans le gel. Le gel est ensuite coloré avec 0,1 % de bleu naphtol noir dans 7 % (v/v) d'acide acétique pendant au moins 2 heures et décoloré avec une solution de 7 % (v/v) d'acide acétique. La sensibilité de détection est d'environ 20 % par rapport au bleu de Coomassie
• Fournissant la sensibilité la plus élevée, le kit de coloration à l'argent ProteoSilver™ a une sensibilité de ≥0,1 ng de protéine par bande avec un temps d'incubation de 3 à 12 minutes. Cette coloration est recommandée pour les protéines de très faible abondance et est compatible avec les applications MALDI-TOF.

Taches fluorescentes pour gel de protéines

• EZFluor™ 1-step Fluorescent Protein Gel Stain est une coloration de gel de protéines fluorescentes prête à l'emploi qui ne nécessite qu'une seule étape de coloration de 5 à 30 minutes sans fixation et qui peut détecter aussi peu qu'environ 1 à 10 ng de protéines par bande. La coloration est entièrement compatible avec la spectrométrie de masse et le séquençage basé sur Edman.
• EZFluor™ UV 1-step Fluorescent Protein Gel Stain est une coloration de gel de protéines prête à l'emploi conçue pour l'imagerie à l'aide d'un transilluminateur UV et d'un filtre au bromure d'éthidium compatible avec la spectrométrie de masse.
• SYPRO^® Ruby protein gel stain est une coloration fluorescente ultrasensible prête à l'emploi pour la détection des protéines séparées par électrophorèse sur gel de polyacrylamide (PAGE). Cette coloration, conçue spécialement pour l'utilisation en PAGE 2-D, s'est avérée être un excellent choix pour les gels de PAGE 1-D et de focalisation isoélectrique (IEF). Le colorant SYPRO^® Ruby pour gels de protéines atteint une sensibilité comparable à celle de nombreuses techniques de coloration à l'argent. 
• SYPRO^® Orange est similaire à SYPRO^® Rouge, bien qu'il soit un peu plus brillant et donne une fluorescence de fond légèrement plus élevée. Le colorant est efficacement excité par les UV ou une illumination à large bande. Il ne convient pas à la coloration des protéines sur les blots ou dans les gels IEF et présente une sensibilité réduite lors de la coloration des protéines sur les gels 2D.

De-staining Reagents

• CoZap est utilisé pour l'élimination rapide de la coloration au bleu de Coomasie. Le tampon unique CoZap est placé directement dans le bac de décoloration et absorbe tout le colorant libre dans la solution, éliminant ainsi la nécessité de changer la solution de décoloration.