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Marqueurs protéiques

Le graphique présente les différences de poids moléculaire (kDa) du mPAGE® Color Protein Standard lors d'une séparation sur différents types de gels. Le mPAGE® Color Protein Standard se compose de 10 bandes colorées. Les profils de migration et les masses moléculaires apparentes pour quatre compositions de gel sont présentés : les gels moulés mPAGE® Bis-Tris, mPAGE® LUX Bis-Tris, mPAGE® TurboMix Bis-Tris et Tris-Glycine. La masse moléculaire apparente pour toutes les compositions de gel Bis-Tris est indiquée pour les tampons de migration MOPS et MES. Les plages de séparation et les masses moléculaires apparentes de l’étalon protéique coloré dépendent de la composition chimique du gel et du choix du tampon de migration : gel préfabriqué mPAGE® avec tampon de migration MOPS [242 kDa-10 kDa], gel préfabriqué mPAGE® avec tampon de migration MES [257 kDa-10 kDa], gel coulé à la main mPAGE® LUX avec tampon de migration MOPS [288 kDa-10 kDa], gel coulé à la main mPAGE® LUX avec tampon de migration MES [291 kDa-10 kDa], gel coulé à la main mPAGE® TurboMix avec tampon de migration MOPS [259 kDa-10 kDa], gel coulé à la main mPAGE® TurboMix avec tampon de migration MES [275 kDa-10 kDa], et gels coulés à la main Tris-Glycine avec tampon Tris-Glycine [259-10 kDa]. Les étalons de protéines colorés séparés sur des gels Bis-Tris à l’aide d’un tampon de migration MOPS migrent généralement plus loin dans le gel qu’avec un tampon de migration MES pour une composition chimique de gel donnée. Pour un calcul du poids moléculaire aussi précis que possible, utilisez toujours un marqueur de poids moléculaire non coloré.

Différences de migration de l'étalon protéique mPAGE® Color sur des gels à 12 % selon la composition chimique (kDa)

Les marqueurs de poids moléculaire des protéines, parfois appelés « étalons protéiques » ou « échelles protéiques », servent à estimer le poids moléculaire des protéines d’intérêt et à suivre la progression de la séparation électrophorétique ou du transfert dans le cadre d’un Western blot. Les marqueurs de poids moléculaire non colorés sont généralement constitués d’un mélange de protéines purifiées, natives ou recombinantes, dont les poids moléculaires sont définis. La visualisation de leur emplacement sur un gel ou une membrane nécessite une étape de coloration. Les marqueurs protéiques pré-colorés permettent de suivre facilement la séparation électrophorétique et l'efficacité du transfert. Des étalons protéiques individuels sont également disponibles pour l'électrophorèse des protéines, la focalisation isoélectrique et les applications 2D-PAGE.

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Tableau de sélection des marqueurs protéiques

Marqueurs protéiques colorés mPAGE® pour l'électrophorèse sur gel

Étalons de protéines colorés mPAGE®

Étalons protéiques mPAGE®

  • Les étalons protéiques mPAGE® pour Western blot se composent de sept protéines recombinantes de 20 kDa, 30 kDa, 40 kDa, 50 kDa, 60 kDa, 80 kDa et 120 kDa, dotées d’un site de liaison aux IgG qui se lie à la plupart des anticorps. Cela permet de visualiser à la fois le marqueur protéique et les protéines de l’échantillon sur le même Western blot, sans réactifs supplémentaires.
  • Les étalons protéiques colorés mPAGE® comprennent un mélange de dix protéines hautement purifiées et pré-colorées, dont la taille varie de 10 kDa à 203 kDa, couplées de manière covalente à différents chromophores. Les étalons protéiques colorés mPAGE® sont conçus pour observer la séparation des protéines lors d’une SDS-PAGE, vérifier l’efficacité du transfert par Western blot sur les membranes et estimer la taille des protéines.
  • Les étalons protéiques non colorés mPAGE® comprennent un mélange de douze protéines recombinantes non colorées dont la taille varie de 10 kDa à 200 kDa. Les bandes de 85 kDa, 25 kDa et 10 kDa présentent une intensité plus élevée afin de servir de points de référence. Les étalons protéiques non colorés mPAGE® conviennent à la détermination du poids moléculaire après une SDS-PAGE ou un Western blot et servent d’étalons pour calibrer la mobilité des marqueurs pré-colorés.
L'échelle de protéines pré-colorée BLUeye comporte 12 bandes à 11, 17, 20, 25, 35, 48, 63, 75, 100, 135, 180 et 245 kDa. Elle est fournie dans un tampon de chargement pour gel et comprend une bande de référence verte et une bande de référence rouge afin de faciliter l'identification.

Échelles de protéines pré-colorées BLUeye

Échelles de protéines pré-colorées BLUeye

L'échelle de protéines pré-colorée BLUeye comporte 12 bandes à 11, 17, 20, 25, 35, 48, 63, 75, 100, 135, 180 et 245 kDa. Elle est fournie dans un tampon de chargement de gel et comprend une bande de référence verte et une bande de référence rouge pour faciliter l'identification.

Marqueurs protéiques ColorBurst pour l'électrophorèse sur gel

Marqueurs protéiques ColorBurst™

Marqueurs
protéiques ColorBurst™

Les marqueurs ColorBurst™ sont composés de huit polypeptides qui ont été réduits chimiquement et conjugués à des colorants aux teintes éclatantes. Les marqueurs ColorBurst™ peuvent être utilisés pour estimer le poids moléculaire d'un échantillon, suivre le déroulement d'un électrophorèse ou confirmer la fin d'un électrotransfert.

Marqueurs protéiques SigmaMarker™

Les marqueurs protéiques SigmaMarker™ sont conçus pour être utilisés avec la SDS-PAGE et couvrent la gamme de masses moléculaires courantes de la plupart des protéines ou de leurs sous-unités. Ces marqueurs à large plage (haut et bas) sont lyophilisés avec un tampon d'échantillonnage, ce qui les rend prêts à l'emploi après reconstitution avec de l'eau déionisée. Les marqueurs sont formulés pour produire une distribution de bandes bien définies d'intensité approximativement égale après électrophorèse et coloration au bleu de Coomassie.

Marqueurs à très faible poids moléculaire pour l'électrophorèse sur gel de protéines

Marqueurs protéiques de très faible masse moléculaire

Marqueurs
protéiques parfaits

Les marqueurs Perfect Protein ont été conçus pour une utilisation courante en SDS-PAGE afin de permettre une détermination très précise de la taille d'échantillons inconnus. Contrairement à de nombreux marqueurs classiques (par exemple, l'ovalbumine ou l'albumine sérique), les marqueurs protéiques Perfect ne contiennent pas d'oligosaccharides susceptibles de provoquer une migration anormale, des bandes hétérogènes « floues » ou une estimation imprécise de la taille. Ces marqueurs sont optimisés pour une utilisation avec la coloration au bleu de Coomassie, mais des quantités adaptées peuvent également être utilisées avec d'autres méthodes de coloration des gels, notamment la coloration à l'argent et la coloration avec des colorants fluorescents.

Marqueurs protéiques de la gamme ultra-basse

Les marqueurs de poids moléculaire ultra-bas (1 060 à 26 600 Da) sont utilisés comme marqueurs protéiques en SDS-PAGE et en Western blot. Une fixation est recommandée.

Marqueurs protéiques non dénaturants

Les marqueurs non dénaturants ont été utilisés comme étalons pour la PAGE native, ainsi que pour l'étalonnage des colonnes en chromatographie d'exclusion sur gel.

Marqueurs biotinylés

Le mélange étalon de poids moléculaire biotinylé contient des protéines conjuguées à la biotine, destinées à servir à la fois d'étalons pour la SDS-PAGE et d'étalons pour le Western blot. La visualisation s'effectue à l'aide de streptavidine-peroxydase associée à un substrat colorimétrique ou luminescent approprié. Ces marqueurs peuvent être détectés simultanément lors des procédures d'immunomarquage.

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