Anti-trimethyl-Histone H3 (Lys4) Antibody

ヒストンH3.1t （UniProt：Q16695、別名：H3/t、H3t、H3/g）は、ヒトHIST3H3（別名：H3FT）遺伝子（Gene ID：8290）によりコードされています。ヒストンは、真核生物のクロマチンのヌクレオソーム構造の主体となる、高度に保存された塩基性核タンパク質です。ヒストンは、転写調節、DNA修復、DNA複製、および染色体安定性において中心的な役割を果たしています。4種類のコアヒストン（H2A、H2B、H3、H4）各2分子が八量体を形成し、その周りをDNAがヌクレオソームと称する反復単位となって巻きついているため、DNAを鋳型として必要とする細胞機構にDNAは近寄れません。ヒストンH3は、コアの球状ドメインと長いN末端尾部を特徴とします。N末端尾部は球状ヌクレオソームから突き出ており、細胞プロセスに影響を及ぼす数種のエピジェネティックな修飾を受ける可能性があります。ヒストンタンパク質のN末端は、リン酸化、アセチル化、メチル化などの翻訳後修飾を受け、下流の調節因子を動員して、クロマチン構造に影響を与え、転写の重要な決定因子となります。ヒストンH3は、ヒストンアセチルトランスフェラーゼにより、ヒストン尾部のいくつかのリジン残基がアセチル化されることがあります。アセチル化は一般に転写活性と関連しており、リジン残基とアルギニン残基のメチル化は、修飾された残基によって、活性化または抑制のどちらかになります。ヒストンH3のトリメチル化は、最もよく研究されているエピジェネティックなマーカーの1つです。H3K4me3の修飾は一貫して転写開始部位で起こると報告されており、H3K4me3ドメインは着床前発生と、内部細胞塊から胚性幹細胞を誘導したり栄養外胚葉から栄養膜幹細胞を誘導したりする過程での、転写活性増加と細胞識別増強に関連します。 （参考文献：Sharifi-Zarchi, A., et al. (2017). BMS Genomics. 18; Article 964; Liu, X., et al. (2016). Nature. 537(7621); 558-562）。

抗トリメチル化ヒストンH3（Lys4）抗体（カタログ番号：07-473）は、リジン4がトリメチル化されたヒストンH3を検出するウサギポリクローナル抗体であり、ChIP、ドットブロッティング、免疫細胞染色およびウェスタンブロッティングでの使用がテストされています。

精製ウサギポリクローナル抗体、150 mM 塩化ナトリウムと 0.05% アジ化ナトリウムを含有する 0.1 M トリス-グリシンバッファー（pH 7.4）に溶解。

エピトープ：トリメチル化Lys4

リジン4がトリメチル化されたヒトヒストンH3のN末端領域における10のアミノ酸に相当するKLH結合直鎖ペプチド

ChIP：
独立した研究所において、クロマチン免疫沈降（ChIP）に使用されました。
ドットブロッティング：希釈倍率1:10,000で使用、Absurance ヒストンH3抗体特異性アレイ（カタログ番号：16-667）およびAbsurance ヒストンH2A、H2B、H4抗体特異性アレイ（カタログ番号：16-665）で、トリメチル化ヒストンH3（Lys 4）の検出に使用されました。
ChIP-seq：
Magna ChIP HiSensキット（カタログ番号：17-10460）、1 µLの抗トリメチル化ヒストンH3（Lys4）抗体（カタログ番号：07-473）、20 µLのプロテインA/Gビーズ、1×10E6の共有結合させたHeLa細胞クロマチンを使用して、クロマチン免疫沈降させ、その後マグネチックビーズを用いてDNAを精製しました。Illuminaバーコード付きアダプターを用いた標準プロトコルによってInputおよびChIP DNAサンプルからライブラリを準備し、Illumina HiSeq装置で分析を行いました。FastQファイルから得られた1800万に及ぶ膨大な数の読取り値を、Bowtie（http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml）およびTagDust（http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource/）タグ除去の順に使用してマッピングしました。MACS（http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/）を用いてピークを特定し、UCSCゲノムブラウザ（http://genome.ucsc.edu）のカスタムトラックとしてBigWigおよびBEDファイルからピークと読取り値を可視化しました。07-473データセットで特定されたピークの上位25%が、HeLa S3のENCODE H3K4me3 BROADヒストントラックで特定されたピークと99%の重複を示しました。

抗トリメチル化ヒストンH3（Lys4）抗体（カタログ番号：07-473）は、リジン4がトリメチル化されたヒストンH3を検出するウサギポリクローナル抗体であり、ChIP、ドットブロッティング、免疫細胞染色およびウェスタンブロッティングでの使用がテストされています。

研究カテゴリー
エピジェネティクス・核内機能分子&

研究サブカテゴリー
ヒストン

このウサギポリクローナル抗体は、リジン4がトリメチル化されたヒストンH3（H3Kme3）を特異的に検出します。

アフィニティー精製

アフィニティー精製ウサギポリクローナル抗体、0.1 M Tris-グリシンバッファー（pH 7.4）＋150 mM NaCl溶液、0.05%アジ化ナトリウム含有

2～8ºCで受領日から1年間安定です。

HeLa酸抽出核調製物（陽性）および組換えヒストンH3（陰性）を用いたウェスタンブロッティングにより評価されています。

ウェスタンブロッティング：
希釈倍率1:5,000～1:10,000で使用、HeLa酸抽出核調製物でトリメチル化ヒストンH3（Lys4）を検出できます。

コントロール
HeLa核抽出物

先発品：04-791

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