抗ニトロチロシン抗体

ペルオキシ亜硝酸、二酸化窒素、塩化ニトリルなどの一酸化窒素に由来する反応性の高い窒素種が細胞で生成されると、組織タンパク質のチロシンがニトロ化されます。 タンパク質のニトロチロシン形成の程度は、一定期間にわたる反応性窒素種の生成と潜在的な細胞損傷の指標となります。 ニトロチロシンは、タンパク質加水分解物のアミノ酸分析によって測定でき、ニトロチロシンハプテンに対する抗体を使用した免疫細胞染色手法によって、細胞および組織内で検出し、半定量的に評価し、位置を特定できます。

ニトロ化KLH。

この抗ニトロチロシン抗体を用いたニトロチロシンの検出は、 IH(P)およびWBで検証されています。

ウェスタンブロッティング：
ニトロ化BSAおよびニトロ化オボアルブミンに対して試験したとき、前回のロットの1:100-1:1,000希釈を、ウェスタンブロッティングで問題なく使用できました。

免疫組織染色：
パラフィン包埋、10%中性バッファーホルマリン固定マウス肝臓（Zymosanを投与した動物）および正常ヒト小脳組織に対して1:50-1:100。組織は、熱誘導エピトープ回復（HIER）により前処理する必要があります。AB5411とのインキュベーションは10分間行い、反応はChemicon IHCSelect, HRP-DABキット（カタログ番号DAB150）で発色させました。

最適な希釈濃度は、ご自身で決定してください。

研究カテゴリー
神経科学

研究サブカテゴリー
酸化ストレス

ニトロ化チロシン残基を認識します。

他の動物種との反応性は確認されていません。

フォーマット：精製

精製ウサギポリクローナル抗体、0.1%アジ化ナトリウムを含有するバッファーに溶解。

精製プロテインA

2～8ºCで受領日から1年間安定です。

コントロール
ポジティブコントロール：ポジティブコントロールを作成するために、ペルオキシ亜硝酸塩（カタログ番号20-107）を使用して、組織切片上でチロシン残基をin situで直接ニトロ化することができます。組織切片を脱パラフィンした後、スライドに、10マイクロリットルのペルオキシ亜硝酸塩溶液を混合したpH 7.4のPBSを一滴落とします。溶液のpHを7.4に維持するように注意する必要があります。

免疫組織染色（パラフィン）分析：
マウス脳（Zymosan）、クエン酸バッファー、pH 6.0で前処理した組織のニトロチロシン（AB5411）染色。 ポリクローナル抗体を、IHC-Select Detection with HRP-DABを用いて1:500に希釈しました。海馬ではここに免疫反応性が見られます。
ニトロチロシンモノクローナルの最適染色： Zymosanで処理したマウス脳

先発品：AB5386

濃度：ロットに固有の濃度につきましては試験成績書をご参照ください。

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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