抗α-チューブリン抗体、チロシン化、クローンYL1/2

チューブリンα-1鎖（UniProt：P09733、別名：α-チューブリン）は、酵母においてTUB1遺伝子（Gene ID：854889）によってコードされています。微小管は、有糸分裂事象や輸送事象から細胞運動および細胞形状の維持に至る、さまざまな細胞活動に関与する動的なタンパク質繊維です。微小管はα-およびβ-チューブリンサブユニットから組み立てられますが、両サブユニットは翻訳後修飾を受け、カルボキシペプチダーゼ活性によって、αチューブリンからC末端の芳香族アミノ酸（哺乳類ではチロシン、酵母ではフェニルアラニン）が除去されます。C末端チロシン／フェニルアラニンはグルタミン酸（E）残基が基になっているため、脱チロシン化／脱フェニルアラニン化型α-チューブリンはGlu-チューブリンとも呼ばれます。チロシンは、哺乳類のチューブリン-チロシンリガーゼによってGlu-チューブリンのC末端に再度付着できるのに対し、フェニルアラニンは、他の生物のチューブリン-チロシンリガーゼとの強い相同性を示す酵母YBR094w遺伝子が存在しても酵母のGlu-チューブリンに翻訳後追加されません。

実測値：約55 kDa

エピトープ：C末端

精製酵母チューブリン

この抗αチューブリン抗体、チロシン化、クローンYL1/2はαチューブリンの検出において、ウェスタンブロッティング、免疫細胞染色、免疫組織染色、電子顕微鏡、ELISA、放射免疫測定法での使用が検証されています。

ウェスタンブロッティング：1.0 µg/mLで使用、10 µgのC2C12細胞ライセート中のチロシン化αチューブリンを検出できます。
免疫細胞染色：4.0 µg/mLで使用、A431、HeLaおよびHUVEC細胞中のチロシン化αチューブリンを検出できます。
免疫細胞染色：酵母ではフェニルアラニン化αチューブリン免疫反応を、HEK293細胞ではチロシン化αチューブリン免疫反応を検出しました（Kilmartin J.V., et al. (1982). J Cell Biol. 93(3):576-582; Bandyopadhyay, B., et al. (2007). J Biol Chem. 282(22):16454-16464）。
免疫組織染色：ハンバーガー・ハミルトン第4期（HH4）のニワトリ胚の中線レベルの切片で微小管のチロシン化αチューブリン免疫反応を検出しました（Nakaya, Y., et al. (2008).Nat. Cell Biol. 10(7):765-775）。
電子顕微鏡検査：粗酵母の核膜調製物を用いた微小管フェニルアラニン化αチューブリン免疫反応と、NIH/3T3細胞を用いた微小管チロシン化αチューブリン免疫反応を検出しました（Wehland, J., and Willingham, M.C.(1983).J Cell Biol. 97(5 Pt 1):1476-1490; Kilmartin J.V., et al. (1982).J Cell Biol. 93(3):576-582）。
ELISA：クローンYL1/2の抗原性は、C末端にTyr/Pheがあるまたはないαチューブリンペプチドに対するブタ脳由来チューブリンを用いた競合的ELISAによって決定されましたた（Wehland, J., et al. (1984).EMBO J. 3(6):1295-1300）。
放射免疫測定法：ニワトリ脳チューブリンおよび酵母チューブリンに対するクローンYL1/2の免疫反応を放射免疫測定法で測定しました（Kilmartin J.V., et al. (1982).J Cell Biol. 93(3):576-582）。

研究カテゴリー
細胞構造

研究サブカテゴリー
分子接着（CAM）

100%配列相同性から、広範囲の動物種と反応すると予測されます。

C末端にフェニルアラニン（酵母）またはチロシン（哺乳類およびニワトリ）があるαチューブリンと反応します（PMID 6204858）。C末端にPheまたはTyrがない翻訳後修飾α-チューブリンには反応しません。

フォーマット：精製

精製プロテインG

精製ラットモノクローナルIgG2aκ抗体、0.1 M Tris-グリシンバッファー（pH 7.4）＋150 mM NaCl溶液、0.05%アジ化ナトリウム含有

2～8°Cで受領日から1年間安定です。

A431細胞ライセートでウェスタンブロッティングにより評価されています。

ウェスタンブロッティング：1.0 µg/mLで使用、10 µgのA431細胞ライセート中のチロシン化αチューブリンを検出できます。

濃度：ロットに固有のデータシートを参照してください。

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