抗ラミニン-5（γ2鎖）抗体、クローンD4B5

コントロール
ヒト膵臓腫瘍組織、ヒト乳がん組織、またはA-431全細胞ライセート

リコンビナントラミニン-5でウェスタンブロッティングにより評価。

ウェスタンブロッティング：希釈倍率1：500～1：2000で使用、10 µgのヒトリコンビナントラミニン-5でラミニン-5γ2鎖を検出できます。

ウェスタンブロッティング：5 ug/mLが推奨されます。ブロッキング溶液は用いず、PBSまたはTBSのみで抗体を希釈してください。 精製済み化合物によるブロッキングが推奨されます。

パラフィン切片の免疫組織染色： 5～10 ug/mLが推奨されます。 過剰に固定しないでください。 軽い4%または2%PFAが最適です。 4 mm厚のパラフィン切片を脱ろうし、再水和してから0.3%過酸化水素を含むメタノールに浸漬して内在性ペルオキシダーゼを不活性化し、さらにプロテアーゼXXIV（Sigma）により室温で15分間処理します（0.01～0.05%）。トリプシンを使用しないでください。抗体を37°Cで1時間培養してから、二次抗体をDABで検出および可視化します（Mizushima et al. 1998）。 血清には抗体と結合して干渉するラミニン5が含まれているため、モノクローナル抗体を血清ブロックに入れないでください。 その代わりに、BSAなどの培地を使用してください。

強いポジティブ染色が、次の組織の基底膜に見られます：皮膚、食道、肺、および腎臓。ポジティブ染色は、胃、小腸、膵臓、胸腺、前立腺、および卵巣でも観察されます。甲状腺、睾丸、骨格筋および心筋は、LN5染色に対してネガティブでした。

ラミニン5（40 ug/mL）と結合するα2β1インテグリンの抑制（Decline & Rousselle 2000）。

ELISAの最適な希釈濃度は、ご自身で決定してください。

抗ラミニン-5（γ2鎖）抗体、クローンD4B5は、ELISA, IH(P)およびWBに適したラミニン-5（γ2鎖）に対する抗体です。

研究カテゴリー
細胞構造

研究サブカテゴリー
ECMタンパク質

モノクローナル抗体MAB19562は、GST融合タンパク質として発現するヒトラミニン-5γ2鎖（IIIドメイン）のアミノ酸残基382～608に対して開発されました。 この抗体は、ラミニン-5の150 kDa鎖（前駆体型）および105 kDa鎖（成熟型）タンパク質を認識します。 ラミニンのγ2鎖はラミニン-5に固有なため、その他のラミニンタイプとは反応しないと予測されます。

メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。

150 kDa（前駆体型）および105 kDa（成熟型）

ラミニンは基底膜であり、α、βおよびγヘテロ三量体鎖で構成される細胞外マトリックス糖タンパク質です。 5種のα鎖、3種のβ鎖、および2種のγ鎖の異なる組合せによって、少なくとも12種のラミニンアイソフォームが形成されます。 ラミニンα3鎖、β3鎖およびγ2鎖で構成されるラミニン-5（LN5）は、表皮角化細胞のヘミデスモソーム構造の基礎となる接着フィラメントの高度に保存されたコンポーネントです。 LN5遺伝子（LAMA3、LAMB3、およびLAMC2）の変異または欠失は、表皮水疱症という致死性の水疱形成性皮膚疾患に関与します。 LN5は、インテグリンα3/β1、α6/β4およびVII型コラーゲンと結合することによって皮膚の表皮真皮境界部を安定化させることができ、また上皮細胞、線維芽細胞、ニューロンおよび白血球などの幅広い細胞タイプの固定と移動運動に重要な役割を果たします。上皮性起源の細胞は、フィブロネクチン、コラーゲン、またはビトロネクチンよりもラミニン-5に素早く固着して、より広範囲に拡散します。近年では、複数のタイプのヒトがんにおける浸潤性がん細胞の前縁でラミニン-5が検出されていることから、ラミニン-5は移動を刺激するがん細胞の基質としても注目を集めています（Niki, et al., 2002, Lohi, et al., 2001）。

GST融合タンパク質として発現するヒトラミニン-5γ2鎖（IIIドメイン）のアミノ酸残基382～608

濃度：ロットに固有の濃度につきましては試験成績書をご参照ください。

0.1%アジ化ナトリウムを保存剤として含有する20 mMリン酸ナトリウム、250 mM塩化ナトリウム、pH 7.6に含まれるプロテインA精製マウス免疫グロブリン。

フォーマット：精製

プロテインA精製品

2～8°Cで出荷日から1年間保存できます。凍結融解を繰り返さないために、分注してください。製品の回復を最大化させるため、キャップを外す前の元のバイアルを融解後に遠心分離してください。

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