抗ドーパミントランスポーター抗体、NT、クローンDAT-Nt

コントロール
ポジティブコントロール：脳（尾状核、被殻、および側坐核）組織

この抗ドーパミントランスポーター抗体、N末端、クローンDAT-Ntは、ドーパミントランスポーターの検出において、IC、IH、WBでの使用が検証されています。

ウエスタンブロッティング： ヒト尾状核、被殻、および側坐核由来の抽出物（20 ug総タンパク量）のウエスタンブロッティングで、約70～85 kDaの拡散バンドを認識します。

免疫組織染色：4%パラホルムアルデヒド固定組織（組織を過剰に固定しないよう注意を要します）。灌流の後に90分未満で後固定し、さらに抗凍結処理します。推奨される希釈濃度は1:1,000～1:10,000です。ラット組織で使用する場合は、吸収された抗ラット二次抗体が推奨され、またラットPAPシステムの使用やABC検出により感度が向上します。

免疫細胞染色：希釈倍率1:5,000～1:10,000。

イムノブロッティング（ラットでの使用は推奨されません）

最適なワーキング希釈倍率とプロトコルは、お客様が決めてください。



MAB369向け免疫組織染色プロトコル

この抗体は、30 μm、浮遊、4%パラホルムアルデヒド固定マウス脳組織で有効に使用されています。 すべてのステップは常に撹拌しながら実施されます。 推奨プロトコルを以下に示します。

1) TBS（0.25% Tritonを含むまたは含まない）での10分間洗浄を3回。

2) 3%血清（二次抗体由来の宿主と同じ）を含有するTBSで30分間培養。

3) 1%血清（二次抗体由来の宿主と同じ）（0.25% Tritonを含むまたは含まない）を含有するTBSで適切に希釈した一次抗体を、室温で2時間培養してから4°Cで16時間培養。

4) TBSでの10分間洗浄を3回。

5) 1%血清（二次抗体由来の宿主と同じ）を含有するTBSで適切に希釈した二次抗体で培養。

6) TBSでの10分間洗浄を3回。

7) TBS中のABC Elite(1：200 Vector Labs）。

8) TBSでの10分間洗浄を2回。

9) リン酸緩衝液（生理食塩水は無効）での10分間洗浄を1回。

10) 増強のために0.06% NiClを添加してDAB反応。

11) PBSでの10分間洗浄を2回。

12) リン酸緩衝液（生理食塩水は無効）での10分間洗浄を1回。

研究のカテゴリ
神経科学

研究のサブカテゴリ
イオンチャンネルおよびトランスポーター

ドーパミントランスポーター、N末端を認識します。 密接に関連しているセロトニン、ノルエピネフリンに対する交差反応は示しません（Miller, 1997）。ヒト脳のパラホルムアルデヒド固定凍結切片におけるMAB369を用いたDATの免疫学的局在決定法により、濃い点状の染色が尾状核、被殻、および側坐核全体で示されています（Miller, 1997）。

メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。

約70～85 kDa

膜貫通型ドーパミントランスポーター（DAT）は、シナプス前神経末端にあり、シナプス間隙からドーパミン作動性ニューロンにドーパミンを輸送（再取り込み）することでドーパミン作動性伝達を停止させる働きをしています。 ドーパミン作動性経路は、報酬と耽溺、動機付け、アルコール中毒、ADHD、神経変性運動疾患（パーキンソン病、ハンチントン病、舞踏病など）に強く関係しています。

エピトープ：N末端

グルタチオンS-トランスフェラーゼと融合したヒトドーパミントランスポーターのN末端。

未精製

未精製の組織培養上清。バイアルに入れる前に0.2 μmメンブレンでろ過しています。製品には20%FBSと最終濃度10μg/mLのシプロフロキサシンが含まれています。

-20°Cで出荷日から1年間保存できます。凍結融解を繰り返さないために、分注してください。製品の回復を最大化させるため、キャップを外す前の元のバイアルを融解後に遠心分離してください。

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany