抗NeuN抗体、クローンA60、ビオチンコンジュゲート

コントロール
脳組織、成体神経系全体のほとんどの神経細胞タイプ

脳組織の免疫組織染色で常に評価されています。

免疫組織染色（パラフィン）：
ラット小脳におけるNeuN（カタログ番号：MAB377B）染色パターン／形態。 クエン酸、pH 6.0で前処理した組織。このロットの抗体を1:100に希釈し、HRP-DABによるIHC-Select検出を用いました。 顆粒層のニューロンの核染色として免疫反応性が認められます。 プルキンエ細胞の核にはシグナルは検出されないことにご注意ください。
クエン酸バッファー、pH6.0を用いた最適染色、エピトープ修復：ラット小脳

この抗NeuN抗体、クローンA60、ビオチンコンジュゲートは、NeuNの検出において、IC、IH、IH(P)、WBでの使用が検証されています。

免疫細胞染色：
前回のロットの1:10～1:500希釈を使用しました。培養したニューロンは、0.1% triton X-100で透過処理してください。一次抗体の希釈はすべて、バッファーおよび一次抗体のみを含み、過剰なタンパク質阻害剤や洗浄剤を含まない単純な溶液を用いて行ってください。

マウスモノクローナルを用いた二重標識研究の場合は、MAB377Bを最後に用いて一連の抗体培養を行ってください。MAB377Bによる培養の前に、抗マウス二次抗体によってマウスモノクローナル抗体をまず検出しておく必要があります。MAB377B培養の前に1%マウス血清で培養すれば、過剰な抗マウスIgGを防止できます。ビオチン化NeuNモノクローナルは、ストレプトアビジンによって検出されます。場合によっては、過剰なビオチンを防止するために、免疫組織染色の前にアビジンによる組織の前処理が必要になることがあります（Wood and Warnke, 1981）。

免疫組織染色：
1:200～1:2,000。この抗体は、ポリエステルワックス包埋組織で最もよく機能しますが、低いワーキング希釈倍率では、パラフィン包埋組織でも機能します。この抗体は、ホルムアルデヒドをベースとした固定剤でよく機能します。クエン酸およびマイクロ波前処理は問題なく使用されています（Sarnat, 1998）。

ウェスタンブロッティング：
この抗体の前回のロットをウェスタンブロッティングで使用しました。46～48 kDaの範囲で2～3のバンドを認識し、おそらく約66 kDaの別のバンドを認識する可能性があります。

最適な希釈濃度は、ご自身で決定してください。

研究のカテゴリ
神経科学

研究のサブカテゴリ
ニューロンおよびグリアマーカー

NeuN（神経核）と呼ばれる脊椎動物ニューロン特異性核タンパク質です。MAB377Bは、小脳、大脳皮質、海馬、視床、脊髄に加えて、後根神経節、交感神経鎖神経節、腸神経節などの末梢神経系のニューロンを含む、マウスの神経系全体のほとんどの神経細胞タイプと反応します。 免疫組織化学的染色はニューロンの核が中心で、細胞質の染色は弱くなります。 プルキンエ細胞、僧帽細胞および光受容細胞などの少数の細胞タイプはMAB377Bと反応しません。 発生学的には、ニューロンが有糸分裂後を迎えた直後に免疫活性が初めて観察され、増殖帯での染色は観察されません。 この抗体は、初代培養とレチノイン酸刺激P19細胞のニューロンに適した優れたマーカーです。 また、移植組織のニューロンの特定にも有用です。

メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。

46-48 kDa

NeuN抗体（神経核、クローンA60）は、すべての試験対象脊椎動物のほとんどのCNSおよびPNS神経細胞タイプに存在する、DNA結合ニューロン特異的タンパク質NeuNを特異的に認識します。NeuNタンパク質の分布は一見して、胎児と成体のいずれの脳においても神経核、周核体および一部の近位神経突起に限られますが、次に示す一部のニューロンはすべての年齢においてNeuNによって認識されません：INL網膜細胞、カハール・レチウス細胞、プルキンエ細胞、下オリーブ核および歯状核ニューロン、および交感神経節細胞など（Mullen et al., 1992; Wolf et al., 1996）。免疫組織化学的に検出可能なNeuNタンパク質は、ニューロンの細胞周期からの離脱および／またはニューロンの末端分化の開始に相当する発達時点で初めて出現します（Mullen et al., 1992）。免疫活性は、E9.5のあたりでマウス神経管に見られ、E12.5までは神経系の発達全体を通して広範囲です。強い核染色は核調節タンパク質機能を示唆しますが、NeuNタンパク質抗原が遠位細胞質で機能しているのか、または核に戻る前にそこで合成されただけなのかに関するエビデンスは今のところありません。精製核から単離されたタンパク質と、イムノブロッティングでの全脳抽出物との間に違いは見られません（Mullen et al., 1992）。

マウス脳から精製された細胞核

濃度：ロットに固有の濃度につきましては試験成績書をご参照ください。

精製プロテインA

精製マウスモノクローナルIgG1抗体、安定剤として15 mg/mL BSAを含み、0.01 M PBS pH 7.1、0.1%アジ化ナトリウムを含有する緩衝液に溶解。

2～8ºCで受領日から1年間安定です。

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