EmbryoMax^®初代マウス胎児線維芽細胞

EmbryoMaxシリーズのPMEF細胞は、時間のかかる支持細胞の単離と調製の必要性をなくすことによって、ES細胞培養のための便利なソリューションを研究者に提供します。多くの胚性幹細胞培養プロトコルは、初代マウス胚線維芽細胞（PMEF）の使用を必要とします。これらのプロトコルでは、ES細胞は一般にPMEF支持細胞の単分子層で培養されます。 支持細胞は、幹細胞培養において2つの重要な役割を果たします。それは、複数の重要な成長因子を培地に分泌して多能性の維持を補助することと、ES細胞が増殖するための細胞マトリックスを供給することです。

初代マウス胚線維芽細胞、CF1株は、マイトマイシンC処理済みです。マウスおよびヒトES/IPS細胞の両方の支持細胞層として機能します。

MEF支持細胞のプレーティング

手順：

1.PMEF支持細胞を融解する前に、プレート／フラスコをゼラチン溶液でコーティングします。
2.PMEFバイアルを37°Cの水槽に入れて素早く融解し、15 mLチューブ（10 mLの温かいPMEF支持細胞培地がすでに含まれている）に移します。チューブを穏やかに転倒させて混ぜ、300 x gで4–5分間遠心します。
3.上清を除去してから、温かいPMEF支持細胞培地中で細胞ペレットを再懸濁します。
4.プレート／フラスコからゼラチン溶液を除去し、マウスESプロトコルガイドの表4.1で推奨されている濃度でPMEF支持細胞懸濁液を分注します。
5.PMEF支持細胞を37°Cで5% CO2により培養します。マウスESプロトコルガイドの図4A、BおよびCを、正しいPMEFの濃度と外観を推定するためのガイドとして
使用してください。ゼラチン化したプレートは12–14日間使用できます。

初代マウス胚線維芽細胞

5～6x10⁶ ea

受領後のバイアルは、-80°Cで保存してください。保存期間が6カ月を経過したら、液体窒素の気相中で（キャップをしっかり締めてください）最大2年間保存できます。

EmbryoMax is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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