EmbryoMax^®初代マウス胚線維芽細胞

EmbryoMaxのPMEF細胞は、時間のかかるフィーダー細胞の単離および調製の必要性をなくすことで、ES細胞培養の便利なソリューションを研究者に提供します。多くの胚性幹細胞培養プロトコルでは、初代マウス胚線維芽細胞（PMEF）を使用する必要があります。これらのプロトコルでは、通常、PMEFフィーダー細胞の単層上でES細胞を培養します。 フィーダー細胞は幹細胞培養において2つの重要な役割を果たします。いくつかの重要な増殖因子を培地に分泌して多能性の維持を助けることとと、ES細胞が増殖するための細胞マトリックスを提供することです。

初代マウス胚線維芽細胞、ハイグロマイシン耐性、C57/BL6株は、マイトマイシンCで処理しておらず、マウスおよびヒトES/IPS細胞のフィーダー層となります。MEF細胞はハイグロマイシン耐性です。細胞は3継代目で提供され、さらに増殖させてから後で使用するために凍結させることができます。

MEFフィーダー細胞のプレーティング

手順：

1.PMEFフィーダー細胞を解凍する前に、プレート／フラスコをゼラチン溶液でコートします。
2.PMEFバイアルを37°Cのウォーターバスですみやかに解凍し、15 mLチューブ（温めた10 mLのPMEFフィーダー細胞培地が入っているもの）に移しますチューブを穏やかに転倒させて混ぜ、300 x gで4–5分間遠心します。
3.上清を取り除き、細胞ペレットを温めたPMEF フィーダー細胞培地で再懸濁します。
4.プレート／フラスコからラチン溶液を取り除き、マウスESプロトコルガイドの表4.1で推奨されている密度でPMEFフィーダー細胞懸濁液を分注します。
5.PMEFフィーダー細胞を37°C、5% CO2でインキュベートします。正しいPMEF密度と
外観の推定には、マウスESプロトコルガイドの図4A、B、Cを指針として使用してください。ゼラチン化したプレートは12–14日間使用できます。

初代マウス胚線維芽細胞

5-6x10⁶ ea

細胞は、個々のバイアルに入れて凍結状態で提供されます。1バイアルあたり約5～6×10⁶個の線維芽細胞が含まれ、5バイアル1パックで販売され、3継代目で供給されます。

受領後のバイアルは、-80°Cで保存してください。6か月を超えて保存する場合は、液体窒素の気相で（キャップを確実に固く閉めて下さい）最長2年間保存できます。

EmbryoMax is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany