ApopTagポジティブコントロールスライド、離乳後4日目のラットの乳腺

ラットの乳腺では、授乳後の組織退縮時にプログラム細胞死のプロセスが起こります。 アポトーシス小体は、通常の組織学的染色で確認でき、in situでDNA鎖切断部位を特定する技術によって特異的に染色できます。 そのため、DNA鎖切断の染色の特異性を、アポトーシスのプロセスを定義する形態学的変化と関連付けることができます。

本製品は、すべてのApopTag In Situアポトーシス検出キットでポジティブコントロールとして使用することを意図しています。 これらの参考用スライドは、教育の補助として、および手順のトラブルシューティングにも有用です。 それぞれのApopTagコントロールスライドのパックには、未染色のポジティブコントロールスライドが5枚含まれています。 ラットの乳腺を離乳後4日目に採取し、10%中性緩衝ホルマリンで18時間固定しました。 パラフィンに包埋した後、組織の中央から5 μm厚の切片を切り出し、シラン処理スライドにマウントしました。

染色の解釈

これらの離乳4日後の雌ラットの乳腺組織のポジティブコントロールスライドでは、アポトーシスを起こしているのは細胞のわずか1～2%です。 キットの適切な活性を確認するには、通常、顕微鏡観察が必要です。

染色は一般にクロマチンに局在し、濃い色です。 ApopTagペルオキシダーゼ（S7100、S7101）またはApopTagフルオレセイン（S7110、S7111、S7160、S7165）キットで予想される局在と感度は同様です。 陽性の物体は、完全な核からはるかに小さなアポトーシス小体まで大きさがさまざまであり、丸いものから不規則なものまで形もさまざまです。 このような物体は、孤立しているか、密集しているか、または貪食細胞の細胞質に取り込まれている可能性があります。 染色されていないアポトーシス核や小体もあると予想されます。 軽い細胞質染色が、強いクロマチン染色と共存する場合があります（これは、核から浸出した断片化DNAまたは食作用小器官内の断片化DNAによる可能性があります）。 ApopTagペルオキシダーゼキット（S7100、S7101）で非アポトーシス細胞核の染色が観察された場合は、基質の発色時間の短縮や発色温度の低下、または抗ジゴキシゲニン抗体試薬を0.5% (w:v) BSAでさらに希釈することを試みてください。 対比染色をお勧めします（Complete ApopTag Manual）を参照。



限定事項

このコントロール組織は、すべてのApopTagキットで陽性染色を行うために選択されています。 コントロール組織の結果は、サンプル調製の差異と組織に固有の差異により、他の組織の結果と異なる場合があります。

18℃～25℃で保存することをお勧めします。

ApopTagコントロールスライドは、すべてのApopTagキットでの使用に適格です。

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