製品名
DNアーゼIリコンビナント、RNアーゼフリー, from bovine pancreas, expressed in Pichia pastoris
biological source
bovine pancreas
recombinant
expressed in Pichia pastoris
form
solution
mol wt
~39 kDa
packaging
pkg of 10,000 U
manufacturer/tradename
Roche
optimum pH
7.0-8.0
solubility
water: soluble
Quality Level
Analysis Note
夾雑物なし：各ロットは、RNアーゼおよびプロテアーゼが含まれていないことを保証するため、最新の品質管理手順に従って試験されています。
Application
DNアーゼIリコンビナントRNアーゼフリーは、RNアーゼ非存在下で行う必要のあるアプリケーションで、DNAを分解するために使用されます。例えば、DNアーゼIは以下のことに頻繁に使用されます：
- RT-PCR前のRNAサンプルからのゲノムDNAの除去
- in vitro転写反応後のDNAフリーRNAの単離
- ニックトランスレーションの実施
- 真核生物DNAにおけるDNアーゼ感受性領域のマッピング
Biochem/physiol Actions
熱失活：1ユニットのDNアーゼIリコンビナントRNアーゼフリーは、75°C、10分間のインキュベーションによって熱失活されます。
注意事項：また別の方法では、DNアーゼIリコンビナントRNアーゼフリーは、例えばCurrent Protocols in Molecular Biologyなどに記載された標準プロトコルに従ったフェノール抽出によって、失活および除去できます。
注意事項：また別の方法では、DNアーゼIリコンビナントRNアーゼフリーは、例えばCurrent Protocols in Molecular Biologyなどに記載された標準プロトコルに従ったフェノール抽出によって、失活および除去できます。
Features and Benefits
グリコシル化
リコンビナントDNアーゼIは、不均一にN-グリコシル化されているため、ゲル電気泳動では2本のバンドとして観察されます。
二価イオン要求性の
DNアーゼIは、活性を最大化するために二価のカチオンを必要とします。DNA特異的エンドヌクレアーゼは、マグネシウムイオンなどによって活性化され、カルシウムイオンによって刺激されます。そのため、本酵素は、EDTAのような金属キレート剤によって阻害されます。
リコンビナントDNアーゼIは、不均一にN-グリコシル化されているため、ゲル電気泳動では2本のバンドとして観察されます。
二価イオン要求性の
DNアーゼIは、活性を最大化するために二価のカチオンを必要とします。DNA特異的エンドヌクレアーゼは、マグネシウムイオンなどによって活性化され、カルシウムイオンによって刺激されます。そのため、本酵素は、EDTAのような金属キレート剤によって阻害されます。
- すべてのRNAサンプルからDNAコンタミネーションを除去します
- RNアーゼやプロテアーゼ活性を含みません
- 熱失活が可能であり、有機溶媒による抽出が不要です
- DNアーゼ活性の最大化をサポートする最適なインキュベーションバッファーと共に提供します
- 完全なアニマルフリーの工程によって生産され、動物由来材料に関連したリスクを排除します
General description
リコンビナントDNアーゼIは、DNA特異的なエンドヌクレアーゼです。本酵素は、DNA内のホスホジエステル結合を加水分解することで、二本鎖および一本鎖DNAの両方をランダムに分解し、オリゴヌクレオチドおよびモノヌクレオチドの混合物を生成します。リコンビナントDNアーゼIの生産プロセスにおいて使用される材料は、すべて非動物由来であり、アニマルフリーの製品となります。
内容
内容
- リコンビナントDNアーゼIRNアーゼフリー、10 U/μL
- インキュベーションバッファー、10倍濃縮液
Other Notes
1ユニットは、1 mL、260 nmのアッセイ条件下で、0.001/分の吸光度上昇を与える酵素活性です。
アッセイ条件：
容量活性は、以下のアッセイ混合物に従って決定されます。100 μgの子ウシ胸腺DNAを、2.5 mLの1倍インキュベーションバッファー中、40～70ユニットのDNアーゼI リコンビナントRNアーゼフリーと共に25°Cでインキュベーションします。吸光度上昇は260 nmで測定します。
アッセイ条件：
容量活性は、以下のアッセイ混合物に従って決定されます。100 μgの子ウシ胸腺DNAを、2.5 mLの1倍インキュベーションバッファー中、40～70ユニットのDNアーゼI リコンビナントRNアーゼフリーと共に25°Cでインキュベーションします。吸光度上昇は260 nmで測定します。
ライフサイエンス研究のみに使用できます。診断には使用できません。
Packaging
1つのキットには2つのコンポーネントが含まれています。
Preparation Note
活性剤：二価の金属イオン
使用液：保存バッファー：20 mM Tris-HCl、50 mM NaCl、2 mM CaCl2、2 mM MgCl2、1 mMジチオエリスリトール、0.1 mg/mL Pefabloc SC、50％グリセロール（v/v）、pH 7.6（4°C）。
インキュベーションバッファー（10倍）：400 mM Tris-HCl、100 mM NaCl、60 mM MgCl2、10 mM CaCl2、pH 7.9。
酵素希釈バッファー：25 mM Tris-HCl、50％グリセロール（v/v）、pH 7.6（4°C）。
使用液：保存バッファー：20 mM Tris-HCl、50 mM NaCl、2 mM CaCl2、2 mM MgCl2、1 mMジチオエリスリトール、0.1 mg/mL Pefabloc SC、50％グリセロール（v/v）、pH 7.6（4°C）。
インキュベーションバッファー（10倍）：400 mM Tris-HCl、100 mM NaCl、60 mM MgCl2、10 mM CaCl2、pH 7.9。
酵素希釈バッファー：25 mM Tris-HCl、50％グリセロール（v/v）、pH 7.6（4°C）。
未希釈の酵素溶液は－15〜－25℃で保存します。ストレージバッファーは4℃で保存します。
保管分類
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
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資料
オルガノイド培養用製品により、組織または幹細胞に由来する3Dの脳、腸、肺および腫瘍のオルガノイドモデルを作成できます。
Organoid culture products to generate tissue and stem cell derived 3D brain, intestinal, gut, lung and cancer tumor organoid models.
プロトコル
DNase I from bovine pancreas is a glycoprotein of Mr 37000. A special procedure is used to remove RNases from the DNase preparation.
ウシ膵臓由来DNase Iは、分子量37,000の糖タンパク質です。DNaseからRNaseを除去するには特殊な手順が用いられます。
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