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この商品について
UNSPSC Code:
41106300
NACRES:
NA.54
Recombinant:
expressed in E. coli
Concentration:
1000 U/mL
recombinant
expressed in E. coli
form
solution
packaging
pkg of 100 U
manufacturer/tradename
Roche
concentration
1000 U/mL
technique(s)
PCR: suitable, mutagenesis: suitable
color
colorless
pH
7.9-8.1 (68 °F)
solubility
water: miscible
suitability
suitable for molecular biology
application(s)
life science and biopharma
foreign activity
RNases 10 units, none detected, endonuclease 20 units, none detected
storage temp.
−20°C
General description
ウラシルDNAグリコシラーゼ（UNG）には、原核生物と真核生物にみられる同じ名前の酵素の非常に活性の高い組換え体が含まれています。これは、1本鎖または2本鎖DNAのウラシル-グリコシド結合を加水分解し、ウラシルを切除する結果、DNAにアルカリ感受性の無塩基部位が生じます。これら無塩基部位は、エンドヌクレアーゼ、加熱またはアルカリ処理により加水分解されます。DNAの調製方法に応じて、ウラシルDNAグリコシラーゼを用いて、一般的、部位特異的または鎖特異的なU-DNA切断を達成できます。
Application
ウラシルDNAグリコシラーゼを用いて、デオキシウリジル酸残基が組み込まれている任意の部位でDNAを切断できます。U-DNAは、PCRのようなin vitroの方法で調製できます。U-DNAの調製方法に応じて、ウラシルDNAグリコシラーゼを用いて、一般的、部位特異的または鎖特異的切断を達成できます。したがって、ウラシルDNAグリコシラーゼは以下のことに役立ちます：
- PCRでのキャリーオーバー汚染を防止することに
- 部位特異的変異誘発処理の効率を高めることに
- オリゴヌクレオチドプローブを標識することに
Biochem/physiol Actions
- ウラシルDNAグリコシラーゼは、一本鎖および二本鎖DNAのU-DNA部位でウラシル-グリコシド結合を加水分解し、ウラシルを切除し、DNAにアルカリ感受性の脱塩基部位をもたらします。
- 本酵素は、二本鎖DNA上よりも一本鎖DNA上で活性があります。
- また、活性は小さなU-DNAオリゴヌクレオチドおよびdUMPでも認められました（Duncan、未発表所見）。
- ウラシルDNAグリコシラーゼは、RNAおよび天然のウラシルフリーDNAに対して不活性です。
熱失活： 95°Cで10分間
ウラシルDNAグリコシラーゼは、95°Cで30分間のインキュベーション後、部分的に活性（<10%）が維持されています。
Physical form
本酵素は、保存用緩衝液中の1 U/μl溶液として提供されます。
Preparation Note
凍結OK（DNA合成後）
Analysis Note
増幅反応の前に、テンプレートを含む約105dUを加えることにより、キャリーオーバー防止活性がアッセイされます。UNG処理後、増幅産物は検出できませんでした。本酵素は汚染要因のエキソヌクレアーゼまたはエンドヌクレアーゼを含まず、RNaseが存在しないことを検査されます。
Other Notes
1単位は、+37°C、60分間で1 μgの精製一本鎖ウラシルを含むDNA（バクテリオファージM13、E.coli CJ 236 dut-ung-で増殖）を完全に分解するのに必要なウラシルDNAグリコシラーゼの量として定義されます 。
1 Lindahl単位は、1分間に+37°Cで1 μmolウラシルを放出するのに必要な酵素の量として定義されます。弊社の単位の定義に基づけば、1 Lindahl単位は520,000 Uに相当します。
容量活性：1 U/μl
1 Lindahl単位は、1分間に+37°Cで1 μmolウラシルを放出するのに必要な酵素の量として定義されます。弊社の単位の定義に基づけば、1 Lindahl単位は520,000 Uに相当します。
容量活性：1 U/μl
ライフサイエンス研究専用です。診断にはご使用になれません。
保管分類
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
flash_point_f
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flash_point_c
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