生細胞/死細胞二重染色キット

生/死細胞二重染色キットは、生細胞と死細胞の同時蛍光染色に使用します。このキットには、カルセイン-AM溶液およびヨウ化プロピジウム（PI）溶液が含まれており、それぞれ生細胞、死細胞を染色します。カルセイン-AMはカルセインのアセトキシメチルエステルで、親油性が高く、細胞膜透過性です。カルセイン-AM自体は蛍光分子ではありませんが、生細胞中でエステラーゼによりカルセイン-AMから生成されたカルセインは強い緑色の蛍光を発光します（λ_ex490 nm、λ_em515 nm）。したがって、カルセイン-AMは生細胞のみを染色します。一方、核染色色素PIは、生細胞膜を通過できません。PIは死細胞膜の不完全な部分から核に到達し、細胞のDNA二重らせんの間に入り、赤色の蛍光を発光します（λ_ex535 nm、λ_em617 nm）。カルセインとPI-DNAはともに490 nmの光で励起することから、蛍光顕微鏡で生細胞と死細胞のモニタリングを同時に行うことができます。λ_ex 545 nmを使用することで、死細胞のみを観察できます。