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Merck

ビオチン化タンパク質の精製

ビオチン化タンパク質およびビオチン化抗体は、基礎研究や創薬において広く利用されています。ビオチン化タンパク質や抗体を結合、分離、精製するために、さまざまな親和性クロマトグラフィー用樹脂や、プレパックカラム、プレパックプレートが利用可能です。


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アガロースビーズおよびアフィニティゲル

アガロースビーズおよびアフィニティゲルは、ビーズ状アガロースに架橋されたストレプトアビジンまたはアビジンを用いて、ビオチン化タンパク質およびビオチン化抗体の精製を可能にします。アビジンとストレプトアビジンの両方はビオチンに高い親和性で結合しますが、アビジンは非特異的結合を多く示すことがあります。Extravidin®-アガロースは、ビオチンに対して非常に高い親和性と特異性を持つ修飾アビジンを使用しています。 小規模から大規模の精製に適したこれらの樹脂は、重力流カラム精製、バッチ処理における低速遠心分離、および低圧クロマトグラフィー手順に適しています。EZview™アフィニティゲルには赤色染料が配合されており、ユーザーは沈殿物と上清を容易に区別できるため、バッチ精製時のタンパク質損失を低減できます。

磁気ビーズ

PureProteome™ ストレプトアビジン磁気ビーズは、血清、血漿、細胞培養上清などの複雑な混合物から免疫グロブリンを迅速かつ再現性高く精製する方法を提供します。 ビオチン化タンパク質およびビオチン化抗体の精製には、磁気ラックまたはプラットフォームを使用して、ビーズを洗浄液および溶出液から分離します。この手順は、単一のマイクロ遠心チューブを使用する低スループット処理から、自動化の有無にかかわらず96ウェルプレートを使用する高スループット処理まで適しています。ストレプトアビジン磁気粒子も、ビオチン化タンパク質およびビオチン化抗体の精製に使用できます。

SigmaScreen™ ストレプトアビジン高容量コーティングプレート

SigmaScreen™ ストレプトアビジン被覆高容量プレートは、独自の被覆技術を採用しており、標準的なストレプトアビジンまたはExtrAvidin被覆プレートよりも大幅に高いビオチン結合容量を実現しています。 結合容量は300 pmol/ウェル以上(96ウェルフォーマット)または150 pmol/ウェル以上(384ウェルフォーマット)であり、これらのプレートを使用することで、捕捉されたタンパク質を溶出させ、MALDI、ICAT、SDS-PAGEなどの様々な手法による捕捉後の分析を行うことが可能です。 SigmaScreen™ ストレプトアビジン被覆高容量プレートは、当社の GMP 施設で ISO 9002 に準拠して製造されており、ウェル間およびプレート間の高い均一性を実現しています。

Cytiva™ Amersham クロマトグラフィーカラムおよび媒体

Cytiva™ Amersham クロマトグラフィーカラムおよびメディア樹脂には、ビオチン化タンパク質や抗体の、信頼性の高い高分解能の小規模から大規模の精製に利用できるさまざまな製品があります。

  • SpinTrap™ カラムは、ビオチン化タンパク質およびビオチン化抗体の簡易な小規模精製のための、あらかじめ充填済みの使い捨てスピンカラムです。
  • HiTrap™ HP カラムは、ストレプトアビジン・セファロース™ ハイパフォーマンス樹脂が予め充填されており、ビオチン化タンパク質および抗体の日常的な分取精製に使用できます。
  • MultiTrap™ 96ウェルフィルタープレートは、遠心分離または真空ろ過(手動または自動ロボットシステムを使用)が可能な、あらかじめ充填された96ウェルフィルタープレートを使用し、ビオチン化タンパク質および抗体の小規模精製を迅速かつ確実に実施するためのフォーマットを提供します。
  • Streptavidin Mag Sepharose™ メディアは、セファロース™ ベースの磁性ビーズで構成されており、免疫沈降法やプルダウン法による標的タンパク質の濃縮を簡略化するように設計されています。また、細胞上清からのビオチン化タンパク質およびビオチン化抗体の迅速かつ小規模な精製およびスクリーニングにも使用できます。
  • また、精製のスケールアップ用に、「Streptavidin Sepharose™ High Performance」樹脂も別途ご用意しています。