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ホーム1分子カウント(SMC®)技術免疫学研究における高感度イムノアッセイ

免疫学研究における高感度イムノアッセイ

免疫研究には、がん免疫、炎症、自己免疫、ウイルス研究など多くの種類の研究が含まれます。インターフェロン、インターロイキン、免疫グロブリンなどのバイオマーカーを検出するためのイムノアッセイは、この研究に不可欠です。免疫学研究の力を高めるためにSMC® 高感度イムノアッセイキットなどの高感度イムノアッセイをどのように使用できるかを説明します。

セクションの概要

免疫学研究のためのイムノアッセイにおける感度の重要性

イムノアッセイは、インターフェロン、インターロイキン、免疫グロブリン、その他のサイトカイン/ケモカインなどのバイオマーカーの解析に役立つため、免疫系の研究に重要な役割を果たします。感度が高いほど、対象となるバイオマーカーを徹底的に特性評価できるため、免疫学研究においてイムノアッセイの感度は重要です。この能力により、免疫パスウェイを深く掘り下げ、免疫メカニズムをより深く理解できます。

SMC®高感度イムノアッセイ

SMC®高感度イムノアッセイキットを利用することで、より深いレベルで免疫バイオマーカーを解析できます。これらのアッセイは、SMCxPRO®高感度イムノアッセイプラットフォームのピコグラム以下の感度と使いやすさを組み合わせることで、低濃度のバイオマーカーを検出できます。 以下のデータにより、免疫学研究におけるSMC® キットの使用例を紹介します(図1)。

さまざまなSMC<sup>®</sup>高感度イムノアッセイで測定したサンプル濃度(pg/mL)をY軸、アナライトをX軸(IL-17A、IL-22、IL-10、IFNγ、IL-2、IL-6、IFNλ1)に表した箱ひげ図。IL-17A濃度は約0.5 pg/mL、IL-22は約1.5 pg/mL,、IL-10は約1.0 pg/mL、IFNγは約2.0 pg/mL、IL-2は約0.25 pg/mL、IL-6は約1.5 pg/mL、IFNλ1は約1.25 pg/mL。

図 1.見かけ上健康なヒトの血清とEDTA血漿のサンプルを、SMCxPRO®プラットフォームで IL-17A、IL-22、IL-10、IFNγ、IL-2、IL-6、IFNλ1のためのSMC® イムノアッセイを用いて解析した。サンプル濃度はpg/mLで示す。

Th1/Th2サイトカイン

Tヘルパー細胞のTh1およびTh2のサブセットは、アレルギーや自己免疫疾患において機能します。Th1細胞は、IFNɣなどのサイトカインを分泌してウイルスや細菌による感染から細胞を守ります。1 Th2細胞は、IL-4、IL-5、IL-10、IL-13を分泌してB細胞と抗体産生を活性化します。メルクでは、わずか0.03 pg/mLまでの定量下限(LLOQ)でTh1/Th2サイトカインを検出するSMC® キットを提供しています。

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Th17サイトカイン

Th17細胞は、新たなCD4+ Tヘルパーサブセットとして出現し、IL-17A、IL-17F、IL-22、および組織炎症に関与し、細胞外病原体からの保護のために機能するその他のサイトカインを分泌します。2 Th17サブセットは、関節リウマチ、乾癬、全身性エリテマトーデスなどの免疫性疾患において重要な役割を果たしていることが確認されています。3 その他の疾患関連性には、多発性硬化症、アトピー性皮膚炎、喘息などがあります。超高感度SMC® イムノアッセイでピコグラム以下レベルの主なTh17ターゲットを測定。

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その他のサイトカイン、ケモカイン、成長因子

サイトカイン、ケモカインおよび成長因子は、免疫系機能において重要な役割を果たしており、オートクライン、パラクライン、エンドクラインのシグナル伝達メカニズムを有しています。これらの生体分子は、その多面的な免疫調節能により、炎症を促進または抑制するという形での免疫応答制御を通してさまざまな刺激に反応することができます。ヒトの健康と疾患のあらゆる相における免疫システムの役割に注目する研究がますます増えています。

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がん免疫療法チェックポイントタンパク質

がん免疫療法は、がん治療を大きく変えて、患者の寛解を達成してきました。このブレイクスルーは、免疫チェックポイント阻害剤と細胞治療の使用により実現しました。これらの成果にもかかわらず、特定の種類のがんではまだ課題が残っています。これらの課題を克服するため、分泌型バイオマーカーの同定と検証が注目されています。これらのバイオマーカーは、血清や血漿中に存在しており、特定の治療介入に良好に反応する可能性の高い患者を特定する上で重要な役割を果たします。PD-L1やPD-L2などの主要チェックポイントターゲットは、特定の種類のがんにおいて貴重な予後指標として登場しています。さらに、細胞治療に対するインターフェロンガンマの分泌増加は、慎重なモニタリングと管理が必要な有害反応であるサイトカイン放出症候群(CRS)の初期指標となっています。高感度イムノアッセイは、サンプル中の低濃度のバイオマーカーの正確な検出と定量が可能であるため、これらの研究にとって極めて重要です。この感度レベルは、バイオマーカー発現のわずかな変化を特定することを目指す研究に不可欠であり、信頼できる正確な患者層別化を確保して、最終的にはがん免疫療法の有効性を強化することになります。図2 は、超高感度SMC® イムノアッセイを用いて検出したPD-L1とPD-1の内因性サンプル濃度の例です。

SMC<sup>®</sup> Human PD-1/PD-L1高感度キット(カタログ番号:03-0208-00、03-0207-00)を用いて測定したPD-L1およびPD-1の内因性血清サンプル濃度と血漿サンプル濃度を示す2つの箱ひげ図。濃度(pg/mL)はY軸、サンプルの種類はX軸。PD-L1血清濃度は約20 pg/mL、血漿濃度は約25 pg/mL。PD-1については、血清濃度と血漿濃度は共に約325 pg/mL。

図 2.SMC® Human PD-1/PD-L1高感度キットを用いた内因性サンプル濃度。健康なドナーの対応する血清(n=10)およびEDTA血漿(n=10)を使用した。

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関連ウェビナー

免疫学研究におけるSMC®テクノロジーのケーススタディについては、以下のウェビナーをご覧ください。

研究目的での使用に限定されます。診断目的には使用できません。

関連製品

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参考文献

1.
Kaiko GE, Horvat JC, Beagley KW, Hansbro PM. 2008. Immunological decision‐making: how does the immune system decide to mount a helper T‐cell response?. Immunology. 123(3):326-338. https://doi.org/10.1111/j.1365-2567.2007.02719.x
2.
Awasthi A, Kuchroo VK. 2009. Th17 cells: from precursors to players in inflammation and infection. International Immunology. 21(5):489-498. https://doi.org/10.1093/intimm/dxp021
3.
Tesmer LA, Lundy SK, Sarkar S, Fox DA. 2008. Th17 cells in human disease. Immunological Reviews. 223(1):87-113. https://doi.org/10.1111/j.1600-065x.2008.00628.x
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