酵素免疫測定法(ELISA)キット

ELISA(酵素免疫測定法)は、マルチウェルプレートを用いた免疫測定法であり、測定成分のうちの1つ(通常は抗体または検体)が固体表面、この場合はプレート上に吸着されています。ELISAは、比較的低コストで迅速かつ定量的、かつ高感度な分析対象物質の検出を可能にし、実施が最も簡単な測定法の一つです。 さらに、ELISAは高スループットスクリーニング法への適応が容易であるため、研究者は1回の測定で大量の検体を検査することができます。
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Products
サンドイッチ法、ダイレクト法、および競合型ELISA
当社のELISAは、血清、血漿、細胞培養上清、または細胞溶解液など、さまざまなマトリックス中の可溶性タンパク質バイオマーカーを研究するための、便利で使いやすい手法です。当社のELISA製品ラインナップには、ヒト、マウス、ラット、およびその他のさまざまな動物モデル(農業用および伴侶動物)を含む幅広い種を対象とした、1,000種類以上の「研究用限定」アッセイが含まれています。 各アッセイには、96ウェルプレートを処理するために必要なプロトコルと試薬が付属しています。ELISAは主に96ウェルフォーマットで提供され、ベンダーが標的の検出および定量に必要な試薬を提供します。ELISAには、サンドイッチ法、ダイレクト法、競合法など、さまざまな手法があります。
サンドイッチ法では、同一の標的に対する異なるエピトープを認識する2種類のモノクローナル抗体(mAb)を使用します。プレートに結合した一次mAbが溶液中のタンパク質を引き寄せ、二次mAbが「サンドイッチ」構造を完成させ、標的の存在を示すシグナルを生成します。 キットには、既知量の組換えタンパク質が同梱されており、ユーザーはこれを用いて標準曲線を作成し、それに照らして各検体からのシグナルを評価することができます。当社の製品ラインナップの大部分は、このサンドイッチELISA形式を採用しています。
ダイレクトELISAおよび競合アッセイは比較的まれです。ダイレクトアッセイでは、プレートに結合したサンプルを検出するために単一のmAbを使用します。その後、このmAbにレポーター二次抗体が結合することでシグナルが得られます。
競合アッセイでは、既知量のバイオマーカーがプレートに予め結合されています。標識された抗体をサンプルと共にインキュベートすると、サンプル中の標的濃度に依存して、その抗体が「吸収」されます。その後、遊離した抗体がプレート上の抗原に結合し、サンプルを洗浄した後、シグナルを発生させます。この場合、シグナルは標的バイオマーカーの濃度と反比例します。
Conferma® ELISAおよびBelysa® 免疫測定曲線フィッティングソフトウェア
Conferma® ELISA ブランドは、アッセイユーザーにとって重要な懸念事項である、重要試薬レベルでのロット間変動を最小限に抑えるように設計されたサンドイッチアッセイで構成されています。詳細な品質管理(QC)プロトコルに沿った様々な分析手法を用いて重要試薬の個々のロットを評価することで、経時的な変動を管理・抑制することが可能となります。
科学者が自身の測定法の再現性を評価できるよう、当社はさらにBelysa® 免疫測定曲線フィッティングソフトウェアを開発しました。このツールを使用することで、ユーザーは自身のサンドイッチ免疫測定法を検証し、%CV(変動係数)や%回収率などのパラメータが期待どおりであることを確認できます。 その後、複数のプレートの標準曲線を比較し、その手法が一貫していることを確認することができます。
関連リソース
- Article: ELISA Protocols
このページでは、以下の4つの一般的なELISA法を説明します。サンドイッチELISAの手順、リン酸化アッセイの手順、EIAアッセイの手順、細胞ベースアッセイの手順
- Article: ELISA Troubleshooting Guide
アッセイ開発で生じる最も一般的な問題の原因とその解決策を記載したこのガイドで、ELISAのトラブルシューティングと最適化を行うことができます。
- Brochure: ELISA Kits
There are several ELISA configurations, with the most common formats being sandwich, competitive and signaling assays.
- Article: Conferma® ELISAs
Learn about the Conferma® ELISA development and manufacturing methods that provide strong sample detection and long-term assay and lot consistency, giving you confidence in your research.
- Article: Belysa® Software
Explore how to effortlessly monitor immunoassay method reproducibility using Belysa® analysis software.
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