무균성 시험

의약품 무균 시험 방법

의약품에 대한 약전 무균 시험은 USP <71>, Ph. Eur. 2.6.1 및 JP <4.06>에 의해 규정되며, 이에 따라 시료를 두 가지 별도의 배지에서 14일간의 배양 기간 동안 배양해야 합니다. 미생물을 포괄적으로 검출하기 위해 두 가지 배지가 사용됩니다. 혐기성 및 호기성 세균을 위한 유동 티오글리콜레이트 배지(FTM, 32.5°C에서 배양)와, 호기성 세균 및 곰팡이를 위한 대두 카제인 소화 배지(SCDM, 트립티케이스 대두 육수(TSB)라고도 함, 22.5°C에서 배양)가 그것입니다. 배양 후 탁도가 관찰될 경우, 잠재적인 미생물 오염을 시사하므로 반드시 조사해야 합니다.

두 가지 공인된 방법이 인정됩니다: 막 여과법과 직접 접종법입니다. 방법의 선택은 제품의 특성, 포장 형태 및 물리화학적 특성에 따라 달라집니다. 제품의 특성이 허용하는 경우, USP <71>, Ph. Eur. 2.6.1 및 JP <4.06>에 명시된 바와 같이, 우수한 민감도와 억제 물질 제거 능력으로 인해 막 여과법이 우선적으로 선택됩니다. 여과가 불가능한 경우에는 직접 접종법이 여전히 적용됩니다.

14일간의 배양 기간이 여전히 약전 표준으로 유지되고 있지만, ATP 생물발광 기술을 기반으로 한 신속 미생물학적 방법(RMM)은 세포 및 유전자 치료제를 포함한 유통 기한이 짧은 제품에 대해 규제 당국으로부터 점차 더 많은 수용을 받고 있다. 새로운 USP <73> 장인 “유통기한이 짧은 제품의 오염 검출을 위한 ATP 생물발광 기반 미생물학적 방법”은 2025년 8월부터 시행되며, RMM 도입 및 이 기술의 검증과 구현을 위한 명확한 규제 프레임워크를 제공합니다.

선택한 방법에 관계없이, 데이터 무결성 요건은 모든 무균성 시험 워크플로우에 동일하게 적용됩니다. 즉, 시료 수령부터 최종 결과 기록에 이르기까지 모든 시험 데이터는 완전히 추적 가능하고, 감사에 대비되어 있으며, ALCOA++, 21 CFR Part 11 및 EU 부속서 11을 준수해야 합니다.

막 여과 무균 시험

막 여과는 USP <71>, Ph. Eur. 2.6.1 및 JP <4.06>에 따라 여과 가능한 의약품에 대해 권장되는 규제 방법입니다. 시료를 0.45 µm 막 필터를 통과시키면 미생물이 걸러지며, 이후 적절한 배지에서 배양됩니다.

이 방법은 직접 접종법에 비해 다음과 같은 주요 이점을 제공합니다.

• 더 높은 민감도 — 전체 시료 또는 혼합 시료를 단일 막을 통해 여과합니다
• 억제제 제거 — 항생제나 방부제와 같은 항균성 화합물을 배양 전에 씻어내어 위음성 결과를 방지할 수 있음
• 폐쇄형 시스템 보호 — 최신 폐쇄형 여과 장치는 시험 중 제품이 외부 환경에 노출되지 않도록 보장하여, 외부 오염 및 무효 시험 결과의 위험을 크게 줄입니다

밀폐형 일회용 막 여과 장치의 사용은 층류 후드 및 아이솔레이터 모두에서 GMP 무균 시험 환경의 모범 사례로 간주됩니다.

무균 시험을 위한 신속 미생물학적 방법(RMM)

혁신을 수용하기 위해 규제 체계가 발전함에 따라, 신속 미생물학적 방법(RMM)은 기존의 약전 무균 시험을 대체할 과학적으로 검증된 대안으로 점차 인정받고 있습니다. RMM은 14일간의 배양 기간이 제품 출시 일정이나 환자 치료 일정에 맞지 않는 세포 및 유전자 치료제, 방사성 의약품, 단기 유효 기간 생물학적 제제와 같은 유통 기한이 짧은 제품에 특히 적합합니다.

가장 확립된 RMM 기술 중 하나인 ATP 생물발광법은 생물발광 시약과의 반응 후 생존 미생물이 방출하는 빛을 감지하여, 신속하고 민감하며 정량적인 오염 검출을 가능하게 합니다. 기존의 배양 기반 방법과 달리, ATP 생물발광법은 주관적인 육안 탁도 평가를 정량적인 기기 기반 측정으로 대체하여, 더 빠르고 재현성 높은 결과 해석을 가능하게 합니다.

2025년 8월부터 시행되는 USP <73> — “유통기한이 짧은 제품의 오염 검출을 위한 ATP 생물발광 기반 미생물학적 방법” — 의 도입은 중요한 규제적 이정표로, 실험실에 RMM 기반 무균 시험을 시행하고 검증할 수 있는 명확한 약전적 틀을 제공합니다. 이를 보완하는 USP <1071>은 신속 미생물학적 방법의 도입 및 검증에 대한 보다 포괄적인 지침을 제공합니다.

RMM은 최종 제품의 무균 시험뿐만 아니라 제조 워크플로우 전반에 걸친 공정 중 미생물 부하 모니터링에도 적합하여, 실험실에 다양한 품질 관리 응용 분야에 걸쳐 다목적적이고 규정을 준수하는 솔루션을 제공합니다.

Milliflex® Rapid System 2.0은 USP <73> 요건을 완벽하게 준수하며, 귀사의 실험실에서 검증되고 규정을 준수하는 RMM 기반 무균 시험 워크플로우를 구현할 수 있도록 지원하여 5일 이내에 결과를 제공합니다.

무균 시험에서의 데이터 무결성 및 거버넌스

무균 시험 결과의 신뢰성은 그 기반이 되는 데이터의 신뢰성에 달려 있으며, 전 세계 규제 당국은 데이터 무결성을 GMP 미생물학 규정 준수의 핵심으로 삼고 있습니다. 시험 방법론뿐만 아니라, 무균 시험 데이터가 전체 시험 수명 주기 동안 어떻게 생성, 기록 및 유지되는지에 대해서도 동등한 중요성이 부여됩니다. FDA, EMA, PMDA를 포함한 규제 기관들은 모든 실험실 데이터가 ALCOA++ 원칙을 충족할 것을 요구합니다. 즉, 데이터는 귀속 가능(Attributable), 가독성(Legible), 동시성(Contemporaneous), 원본성(Original), 정확성(Accurate)을 갖추어야 하며, 완전성, 일관성 및 가용성에 대한 추가적인 기대 사항도 충족해야 합니다.

미국에서는 21 CFR Part 11이 전자 기록 및 전자 서명에 대한 요건을 정의하여, 디지털 문서를 종이 기록과 법적으로 동등한 것으로 간주합니다. 유럽에서는 EU 부속서 11이 GMP 환경 내 컴퓨터화된 시스템에 대해 동등한 기준을 제시하고 있습니다. 이러한 규정들은 무균 시험을 포함한 품질관리(QC) 실험실 데이터의 데이터 무결성에 대한 명확한 프레임워크를 제시합니다. 실시간 데이터 수집, 자동 감사 추적 기록 생성, 그리고 작업자 식별 및 기기 데이터부터 시료 정보 및 최종 결과에 이르는 완전한 종단간 디지털 추적성은 GMP 검사 시 규제 당국으로부터 점점 더 많이 요구되고 있으며, 업계 모범 사례로 간주됩니다. M-Trace® 소프트웨어 및 모바일 앱은 귀사의 실험실이 이러한 규제 요건을 충족할 수 있도록 지원합니다.