무균 시험

무균 시험 절차는 식품 및 음료 제조업체를 포함한 다양한 산업 분야의 제품에 적용되지만, 주요 산업 분야는 의약품 및 의료 분야로, 해당 제품의 무균 시험은 미생물학자들에게 여전히 중요하고 일상적인 업무로 남아 있습니다.

• 제약 무균 시험 방법
• 의료 기기 무균 시험 방법
• 무균 시험 워크플로우

의약품 무균 시험 방법

의약품의 무균 시험에 대한 약전 방법은 두 개의 별도 배지에서 시료를 배양할 것을 요구합니다. 무균 시험에서는 잔류 혐기성균과 호기성균 및 곰팡이의 성장을 촉진하기 위해 두 가지 다른 배지를 사용합니다. 유동성 티오글리콜산 배지(FTM)는 일반적으로 혐기성균 및 일부 호기성균 배양에 사용되며, 대두 카제인 소화 배지(SCDM)는 일반적으로 곰팡이와 호기성균 배양에 사용됩니다. 검사를 진행하기 전에 시료를 각각 32.5°C와 22.5°C에서 14일간 배양합니다. 배지에서 탁도가 관찰될 경우 미생물 증식을 의미할 수 있으므로 반드시 조사해야 합니다. 의약품의 무균 시험에는 두 가지 권장 방법이 있습니다: 막 여과법과 직접 접종법입니다.

막 여과 무균 시험

막 여과 무균 검사는 USP <71>, EU 약전 <2.6.1>, JP 약전 <4.06>에 명시된 대로 여과 가능한 의약품에 대한 규제 기관이 선호하는 방법입니다. 시료를 여과 캐니스터 내 0.45 µm 멤브레인 필터를 통과시킨 후 배양액을 첨가하여 배양합니다. 이 무균 검사 방법은 전체 시료 또는 복합 시료를 단일 필터를 통과시키므로 다른 방법에 비해 감도가 향상될 수 있습니다. 또한 여과 과정은 항생제나 방부제 등 시료 내 혼탁을 유발하거나 성장을 억제할 수 있는 성분을 씻어낼 기회를 제공합니다.

직접 접종 무균 시험

직접 접종법에서는 샘플 유닛에서 소량의 샘플을 무균적으로 채취하여 배양 전 적절한 양의 배지에 직접 접종합니다. 이 방법은 간단하지만 몇 가지 중요한 한계가 있습니다. 배지에 접종할 수 있는 제품의 양이 적어 시험 감도가 제한됩니다. 접종 후 시료가 흐리거나 탁해 보이면 배양 기간 종료 시 미생물 증식으로 인한 탁도를 감지하기 어려울 수 있습니다. 또한 제품에 항균 특성이 있는 경우 미생물 증식이 억제되지 않도록 시료를 중화시켜야 합니다.

의료 기기용 무균 시험 방법

의료기기의 무균 시험에는 직접 전이 무균 시험법이 권장됩니다. 시험 대상 기기는 배양 기간 내내 시험 배지와 직접 접촉하며, 이 기간 동안 기기 내부 또는 표면의 모든 미생물이 증식합니다. 또한 수혈 및 주입 어셈블리와 같이 유체 통로가 무균으로 표시된 중공 튜브 제품의 경우 제품 플러시 무균 검사가 선호됩니다. 제품 내강을 세척액으로 플러싱한 후, 용출액을 막 여과하여 배양에 적합한 배지에 넣습니다.

멸균 시험 워크플로우

1. 시험 준비 — 펌프에 막 여과 장치 튜브를 장착합니다.

2. 필터 사전 습윤 — 여과 효율을 최적화하고 제품의 필터 부착을 최소화하기 위해 막 여과 장치를 사전 습윤합니다.

3. 시료 여과 — 동일한 양의 제품을 양쪽 캐니스터에 여과합니다. 미생물은 0.45 µm 기공 크기의 필터에 포집됩니다.

4. 린싱—적합한 린싱 용액으로 모든 억제 물질을 씻어냅니다.

5. 배지 충전 — 멤브레인 여과 장치를 TSB 및 FTM 무균 배지로 채웁니다.

6. 배양 시간 — 14일.

7. 최종 시험 결과—육안적 탁도/무탁도 확인.