biological source
Escherichia coli (HB101)
assay
100% (SDS-PAGE)
form
solution
specific activity
≥20 U/μL
mol wt
100 kDa (single polypeptide chain)
packaging
pkg of 1,000 U (11031163001), pkg of 5,000 U (11031171001)
manufacturer/tradename
Roche
concentration
<0.1 % (w/w)
technique(s)
DNA sequencing: suitable, Northern blotting: suitable, Southern blotting: suitable, hybridization: suitable
color
colorless
pH
7.9 (39 °F), 8.0 (68 °F)
solubility
water: miscible
suitability
suitable for molecular biology
NCBI accession no.
UniProt accession no.
application(s)
genomic analysis
life science and biopharma
foreign activity
Nicking activity 150 units, none detected, RNases 150 units, endonucleases 150 units, none detected
storage temp.
−20°C
Gene Information
Escherichia coli ... rpoB(948488)
General description
この酵素により、均一に識別化された単鎖RNAを生成することができます。転写物は、ビオチンまたはDIG-11-UTPにより非放射性的に標識化するか、あるいは[α-32P]または[α-35S]で標識化されたヌクレオチドにより、高度特定活性まで標識化することができます。T3 RNAポリメラーゼは、プロモーターに高度特定化されたDNA依存RNAポリメラーゼ です。T3プロモーターの下流のDNAのみが転写されます。
Application
T3 RNA ポリメラーゼは、T3プロモーターから下流のクローンされたDNAテンプレートからRNAを転写することができます。標識化NTPによる合成により、高度標識化RNAを生成することができます。合成されたRNAは、以下の多くのアプリケーションで使用することができます：
- RNAまたはDNAブロッティング技術
- In situハイブリダイゼーション
- RNase保護の研究：酵素によって合成された転写物は、RNAの切り貼りおよび処理の研究用の前駆物質RNAとして使用されます。
- 転写反応中に、過剰なm7GpppGまたはm7GpppAをGTPまたはATPに付加することによるin vitroなキャップ化RNAの合成。生成されたアンチセンスRNAを細胞に導入することで、対応する遺伝子の発現を抑制することができます。
Biochem/physiol Actions
プロモーター特異性
T3 RNAポリメラーゼは、極度にプロモーター特異性があり、バクテリオファージT3 DNAまたはT3プロモーターの下流でクローンされたDNAのみを転写します。
熱による不活性化2μl 0.2 M EDTA (pH8.0)の添加および／または65°Cの加熱により、反応は停止します。
T3 RNAポリメラーゼは、極度にプロモーター特異性があり、バクテリオファージT3 DNAまたはT3プロモーターの下流でクローンされたDNAのみを転写します。
熱による不活性化2μl 0.2 M EDTA (pH8.0)の添加および／または65°Cの加熱により、反応は停止します。
Features and Benefits
体積活性：=20U/μl
ハイブリダイゼーションプローブの合成。T3 RNAポリメラーゼにより、均一に標識化されたRNAの高効率な生産が可能になります。この標識化されたRNAは、サザンブロット、ノーザンブロット、ドットブロット、ならびにin situハイブリダイゼーションで使用されます。
適切な標識：転写物は、ビオチン-16-UTP、DIG-11-UTP、またはフルオレセイン-12-UTPで非放射性的に標識化することができます。転写物は、[a-32P]または[a-35S]で標識化されたヌクレオチドにより、高度特定活性まで非放射性的に標識化することもできます。
注記：Roche社は、DIG-、ビオチン、およびフルオレセイン標識化用の特別仕様の10倍濃縮RNA標識化混合液を提供します。これらの混合液は、T3 RNAポリメラーゼによく作用します。
ハイブリダイゼーションプローブの合成。T3 RNAポリメラーゼにより、均一に標識化されたRNAの高効率な生産が可能になります。この標識化されたRNAは、サザンブロット、ノーザンブロット、ドットブロット、ならびにin situハイブリダイゼーションで使用されます。
適切な標識：転写物は、ビオチン-16-UTP、DIG-11-UTP、またはフルオレセイン-12-UTPで非放射性的に標識化することができます。転写物は、[a-32P]または[a-35S]で標識化されたヌクレオチドにより、高度特定活性まで非放射性的に標識化することもできます。
注記：Roche社は、DIG-、ビオチン、およびフルオレセイン標識化用の特別仕様の10倍濃縮RNA標識化混合液を提供します。これらの混合液は、T3 RNAポリメラーゼによく作用します。
Packaging
一つのキットは二つの部品を有します。
Preparation Note
活性化因子: BSA/スペルミン
容器を密閉し、乾燥した換気の良い場所で保管してください。
Analysis Note
最新の品質管理手順に基づいて試験されたエンドヌクレアーゼ、ニッキング活性、およびリボヌクレアーゼの不在。SP6/T7転写キットで試験済みの作用。
Other Notes
一ユニットは、1 nMol CMPを酸不溶性のRNA製品内で、+37°Cで60分以内に取り込む酵素活性度です。
体積活性：≥20 U/μl
体積活性：≥20 U/μl
生命科学研究用途に限ります。診断措置において使用しないでください。
キットの構成要素のみ
製品番号
詳細
- T3 RNA Polymerase, in buffer, pH 7.9 ≥20 U/μl
- Transcription Buffer 10x concentrated
signalword
Warning
保管分類
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 2
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
hcodes
Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Skin Sens. 1