Nombre del producto
Anti-digoxigenina-AP, Fragmentos Fab, from sheep
biological source
sheep
conjugate
alkaline phosphatase conjugate
antibody form
purified immunoglobulin
antibody product type
primary antibodies
clone
polyclonal
form
solution
packaging
pkg of 200 μL (150 U)
manufacturer/tradename
Roche
isotype
IgG
storage temp.
2-8°C
Quality Level
Analysis Note
- Reactividad cruzada con digitoxina y digitoxigenina: <1 %
- Sin reactividad cruzada con otros estrógenos o esteroides androgénicos humanos,por ejemploestradiol o testosterona
- Reactividad cruzada con digoxina: no conocida
- El conjugado no se une a sí mismo en absoluto
- Normalmente una molécula del conjugado se une a una molécula de digoxigenina, aunque hay dos posibles sitios de unión para digoxigenina
- No se prevé unión inespecífica al ARN
Application
Utilice los fragmentos Fab anti-digoxigenina-AP para la detección de compuestos marcados con digoxigenina empleando:
- matrices de ADNc
- Hibridación de colonias/en placa
- Inmunotransferencia por puntos (dot blot)
- ELISA
- Análisis de retardo en gel
- Inmunohistocitoquímica
- Hibridación in situ
- Secuenciación de ADN no radiactiva mediante inmunotransferencia
- Inmunotransferencia Northern
- Ensayos de protección de ARNasa
- Inmunotransferencia Southern
- Inmunotransferencia Western
- Hibridación in situ fluorescente
- Hibridación in situ de sección y de montaje completo
- Análisis de retardo de movilidad electroforética
Biochem/physiol Actions
El anticuerpo policlonal de oveja es específico para la digoxigenina y la digoxina, y no muestra reactividad cruzada con otros esteroides, como los estrógenos y los andrógenos humanos.
Inactivación por calor: sí
Inactivación por calor: sí
General description
La digoxigenina es un hapteno útil en el marcaje y la detención de los ácidos nucleicos. Este producto contiene fragmentos Fab de anticuerpos anti-digoxigenina policlonales conjugados con fosfatasa alcalina. Los fragmentos Fab anti-digoxigenina-AP son útiles para la detección de compuestos marcados con digoxigenina.
Other Notes
Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.
Preparation Note
Después de la inmunización con digoxigenina, se purificó la IgG de oveja mediante cromatografía de intercambio iónico, y la IgG específica se aisló mediante inmunoadsorción. Los fragmentos Fab obtenidos mediante digestión con papaína se unificaron por filtración en gel, se conjugaron con el marcaje específico y se estabilizaron en disolución tampón.
Concentración de trabajo: La concentración de trabajo del conjugado dependerá de la aplicación y del sustrato. Las siguientes concentraciones deben tomarse como pauta:
Disolución de trabajo: Inmunotransferencia Northern, inmunotransferencia Southern
Ácido maleico 100 mM, NaCl 150 mM, pH 7,5.
Inmunotransferencia Western
Tris-HCl 50 mM, NaCl 150 mM, pH 7,5
otras aplicaciones
Tris-HCl 100 mM, NaCl 150 mM, pH 7,5
Para reducir la unión inespecífica pueden utilizarse reactivo bloqueante al 1% (p/v), suero fetal bovino inactivado por calor al 1-5% (v/v) o suero normal de oveja .
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): El conjugado diluido es estable entre 2 y 8 °C durante 12 horas.
Preparar siempre fresco.
Concentración de trabajo: La concentración de trabajo del conjugado dependerá de la aplicación y del sustrato. Las siguientes concentraciones deben tomarse como pauta:
- Inmunotransferencia por puntos (dot blot): 150 mU/ml
- ELISA: de 150 a 300 mU/ml
- Inmunohistocitoquímica: de 250 a 500 mU/ml
- Hibridación in situ: de 1,5 a 7,5 U/ml
- Inmunotransferencia Southern: 150 mU/ml
- Inmunotransferencia Western: de 250 a 500 mU/ml
Disolución de trabajo: Inmunotransferencia Northern, inmunotransferencia Southern
Ácido maleico 100 mM, NaCl 150 mM, pH 7,5.
Inmunotransferencia Western
Tris-HCl 50 mM, NaCl 150 mM, pH 7,5
otras aplicaciones
Tris-HCl 100 mM, NaCl 150 mM, pH 7,5
Para reducir la unión inespecífica pueden utilizarse reactivo bloqueante al 1% (p/v), suero fetal bovino inactivado por calor al 1-5% (v/v) o suero normal de oveja .
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): El conjugado diluido es estable entre 2 y 8 °C durante 12 horas.
Preparar siempre fresco.
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The digoxigenin (DIG) system for non-radioactive labelling and detection of nucleic acids-an overview.
<BIG>Holtke HJ, et al.</BIG>
Cellular and molecular biology (Noisy-le-Grand, France), 41, 883-905 (1995)
In situ hybridization methods for mouse whole mounts and tissue sections with and without additional β-galactosidase staining.
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Exorhodopsin and melanopsin systems in the pineal complex and brain at early developmental stages of Atlantic halibut (Hippoglossus hippoglossus).
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