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Merck

P5147

Proteasa from Streptomyces griseus

Type XIV, ≥3.5 units/mg solid, powder

Sinónimos:

Actinasa E, Pronasa E

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Acerca de este artículo

Número CAS:
9036-06-0
UNSPSC Code:
12352204
eCl@ss:
32160410
EC Number:
232-909-5
NACRES:
NA.54
MDL number:
MFCD00132092

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Nombre del producto

Proteasa from Streptomyces griseus, Type XIV, ≥3.5 units/mg solid, powder

biological source

Streptomyces griseus

type

Type XIV

form

powder

specific activity

≥3.5 units/mg solid

solubility

10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc: soluble 0.2 mg/mL at 37 °C, clear, colorless to tan

shipped in

wet ice

storage temp.

−20°C

Quality Level

200

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Analysis Note

Contiene acetato de calcio.

Application

Esta enzima es más activa a un intervalo de pH más elevado que la proteasa alcalina conocida, mostrando actividad proteolítica incluso en disolución de NaOH 0,2 N. Esta enzima es útil para la proteólisis de proteínas insolubles y para la investigación de la estructura de las proteínas.
La enzima de Sigma se ha utilizado para la digestión y el análisis de complejos antitrombina-heparina. Se ha utilizado también para el aislamiento de almidón resistente a enzimas.
La proteasa de Streptomyces griseus se ha utilizado:
  • para la digestión de tejido del núcleo pulposo (NP)
  • en la catálisis de la reacción de Mannich en cascada (onepot) asimétrica
  • para desproteinización del almidón
  • digestión de cortes cerebrales para la disociación celular

La proteasa es una enzima utilizada para romper las proteínas hidrolizando los enlaces peptídicos. La proteasa se utiliza para degradar las proteínas, estudiar los inhibidores de proteasas y estudiar la cinética de inactivación térmica. La proteasa se utiliza en los procedimientos de aislamiento de ácidos nucleicos en incubaciones. Se ha utilizado la proteasa de Streptomyces griseus en investigaciones cristalográficas y cinéticas del complejo covalente formado por aldehídos de tetrapéptidos y serín proteasas.
La proteasa se utiliza normalmente en los procedimientos de aislamiento de ácidos nucleicos en incubaciones de 0,5 a 3,0 horas complementadas con dodecilsulfatosódico al 0,2 % y EDTA 10mM.

Biochem/physiol Actions

Este producto es una mezcla de un mínimo de tres actividades caseinolíticas y una actividad aminopeptidasa. Las enzimas caseinolíticas se nombraron como tripsina de Streptomyces griseus Proteasa A, Streptomyces griseus Proteasa B y Streptomyces griseus. Este producto puede utilizarse cuando se requiere una degradación extensa o completa de la proteína. Esta mezcla de proteasas es muy inespecífica y puede digerir hasta >70 % de la caseína a aminoácidos.
La proteasa cataboliza las proteínas mediante hidrólisis de los enlaces peptídicos. Las proteasas son inactivadas por los inhibidores de la serina del centro activo, como el fluoruro de fenilmetilsulfonilo (PMSF) y el diisopropilfluorofosfato. La proteasa de Streptomyces griseus es una mezcla de como mínimo tres actividades proteolíticas, entre ellas una serín proteasa extracelular. Las proteasas de serina exhiben una amplia variedad de especificidades de sustrato, que se creen mediadas por un centro activo compuesto por un resto de Asp, un resto de His y uno de Ser en la molécula. Esta enzima prefiere hidrolizar los enlaces peptídicos del lado carboxilo de los ácidos glutámico o aspártico.
Mezcla de como mínimo tres actividades proteolíticas, entre ellas una serín proteasa extracelular. En general, las proteasas de serina exhiben una amplia variedad de especificidades de sustrato, que se creen mediadas por un centro activo compuesto de un resto de Asp, uno de His y uno de Ser en la molécula. Esta enzima prefiere hidrolizar los enlaces peptídicos del lado carboxilo de los ácidos glutámico o aspártico.

Features and Benefits

  • muy estable en el intervalo de pH de 5,0 a 9,0, con una actividad máxima a pH 8,8
  • compatible con muchos tampones de aislamiento de ADN y ARN
  • amplia especificidad de sustrato

General description

Completamente inactivada al calentarse por encima de 80 °C durante 15 a 20 minutos.

Other Notes

Una unidad hidrolizará la caseína para producir color equivalente a 1,0 μmol (181 μg) de tirosina por minuto a pH 7,5 y 37 °C (color por el reactivo Folin-Ciocalteu).

Preparation Note

Recolectada del caldo de cultivo de S. griseus.

pictograms

Health hazardExclamation mark
GHS08,GHS07

signalword

Danger

Hazard Classifications

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

target_organs

Respiratory system

Clase de almacenamiento

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 2

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)

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Certificados de análisis (COA)

Lot/Batch Number
0000516158
0000516156
0000516156
0000516158
0000508988

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  1. Is Product P5147, Protease from Streptomyces griseus, also described as "Pronase"?

    "Pronase E" is the name given to a group of proteolytic enzymes produced by Streptomyces griseus K-1. At least 10 proteases are in the mixture, five serine-type proteases, two zinc endopeptidases, two zinc leucine aminopeptidases, and one zinc carboxypeptidase.

  2. Does Product P5147, Protease from Streptomyces griseus, contain calcium acetate?

    This product contains calcium acetate buffer salt. The amount of calcium acetate present will vary for each lot number and has been observed to range from 2 - 30% (w/w).

  3. How should Product P5147, Protease from Streptomyces griseus, be reconstituted and how should a stock solution be prepared?

    This product can be dissolved in 0.01 M sodium acetate with 0.005 M calcium acetate at pH 7.5 at 37°C; at 0.2 mg/mL, this yields a clear solution which ranges from colorless to light tan. Calcium ion is recommended for protection from autolysis. The activity of a dilute enzyme solution containing 0.01 to 0.1 M calcium ion was stable over 24 hours at neutral pH at 2-8°C.  Pronase E is stable at 4°C for at least six months.  Stock solutions of 5 to 20 mg/mL in water are usually stored at -20°C.

  4. Under what conditions can Product P5147, Protease from Streptomyces griseus, be used to digest protein?

    For DNA isolation, Pronase E is usually prepared as a stock solution, and prior to storage at -20°C, the solution is first heated to 56°C for about 15 minutes, then incubated at 37°C for 1 hour. This encourages self-digestion, to eliminate DNAse and RNAse contamination. The enzyme is added to a DNA sample (in the presence of 0.5-1%(w/v) SDS to disrupt DNA protein interactions) typically at 250-500 μg protein/mL, then incubated at 37°C for 1-4 hours. For protein hydrolysis, dissolve about 0.2 μmol of protein in 0.2 mL of 50 mM ammonium bicarbonate buffer at pH 8 (or phosphate buffer pH 7). Add Pronase to 1% (w/w) and incubate at 37°C for 24 hours. It may be necessary to add aminopeptidase M at 4% (w/w) and incubate at 37°C for another 18 hours.

  5. Which document(s) contains shelf-life or expiration date information for a given product?

    If available for a given product, the recommended re-test date or the expiration date can be found on the Certificate of Analysis.

  6. How do I get lot-specific information or a Certificate of Analysis?

    The lot specific COA document can be found by entering the lot number above under the "Documents" section.

  7. How do I find price and availability?

    There are several ways to find pricing and availability for our products. Once you log onto our website, you will find the price and availability displayed on the product detail page. You can contact any of our Customer Sales and Service offices to receive a quote.  USA customers:  1-800-325-3010 or view local office numbers.

  8. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product. 

  9. My question is not addressed here, how can I contact Technical Service for assistance?

    Ask a Scientist here.

Simone Valentin Hansen et al.
PloS one, 13(10), e0205461-e0205461 (2018-10-12)
Drosophila DNA replication-related element binding factor (DREF) is a transcription regulatory factor that binds the promoters of many genes involved in replication and cell proliferation and is required for normal cell cycle progression. Human DREF/zinc finger BED domain-containing protein 1
A Chan et al.
The Journal of biological chemistry, 272(35), 22111-22117 (1997-08-29)
Although heparin has been used clinically for prophylaxis and treatment of thrombosis, it has suffered from problems such as short duration within compartments in vivo that require long term anticoagulation. A covalent antithrombin-heparin complex has been produced with high anticoagulant
An improved fractionation system for pronase on CM-sephadex.
J Jurásek et al.
Canadian journal of biochemistry, 49(11), 1195-1201 (1971-11-01)
Notochordal conditioned media from tissue increases proteoglycan accumulation and promotes a healthy nucleus pulposus phenotype in human mesenchymal stem cells
Purmessur D, et al.
Arthritis Research & Therapy, 13(3), R81-R81 (2011)
Enzyme-resistant starch. I. Quantitative and qualitative influence of incubation time and temperature of autoclaved starch on resistant starch formation
Eerlingen RC, et al.
Cereal Chem., 70(3), 339-344 (1993)
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