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Marcadores proteicos

El gráfico muestra las diferencias de peso molecular (kDa) del estándar de proteínas mPAGE® Color al separarse en diferentes composiciones químicas de gel. El estándar de proteínas mPAGE® Color consta de 10 bandas de colores. Se muestran los patrones de migración y el peso molecular aparente para cuatro composiciones de gel: los geles prefabricados mPAGE® Bis-Tris, mPAGE® LUX Bis-Tris, mPAGE® TurboMix Bis-Tris y Tris-Glicina. El peso molecular aparente para todas las composiciones de gel Bis-Tris se presenta para los tampones de migración MOPS y MES. Los rangos de separación y el peso molecular aparente del estándar de proteínas en color dependen de la composición química del gel y del tampón de migración elegido: gel prefabricado mPAGE® con tampón de migración MOPS [242 kDa-10 kDa], gel prefabricado mPAGE® con tampón de migración MES [257 kDa-10 kDa], gel vertido manualmente mPAGE® LUX con tampón de migración MOPS [288 kDa-10 kDa], gel vertido manualmente mPAGE® LUX con tampón de migración MES [291 kDa-10 kDa], gel vertido manualmente mPAGE® TurboMix con tampón de migración MOPS [259 kDa-10 kDa], gel mPAGE® TurboMix vertido manualmente con tampón de migración MES [275 kDa-10 kDa], y geles Tris-Glicina vertidos manualmente con tampón Tris-Glicina [259-10 kDa]. Los estándares de proteínas coloreados separados en geles Bis-Tris utilizando tampón de migración MOPS suelen migrar más hacia el interior del gel que con tampón de migración MES para una composición química de gel determinada. Para obtener un cálculo más preciso del peso molecular, utilice siempre un marcador de peso molecular sin teñir.

Diferencias de migración del estándar de proteínas mPAGE® Color en geles al 12 % con diferentes composiciones químicas (kDa)

Los marcadores de peso molecular de proteínas, a veces denominados «estándares de proteínas» o «escaleras de proteínas», se utilizan para estimar el peso molecular de las proteínas de interés y para supervisar el progreso de la separación electroforética o la transferencia en el Western blot. Los marcadores de peso molecular sin teñir suelen consistir en una mezcla de proteínas purificadas, nativas o recombinantes, de pesos moleculares definidos. Para visualizar su ubicación en un gel o una membrana es necesario realizar un paso de tinción. Los marcadores proteicos preteñidos permiten realizar un seguimiento sencillo de la separación electroforética y de la eficiencia de la transferencia. También se dispone de estándares proteicos individuales para aplicaciones de electroforesis de proteínas, focalización isoeléctrica y 2D-PAGE.

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Tabla de selección de marcadores proteicos

Marcadores de proteínas de color mPAGE® para electroforesis en gel

Patrones de proteínas de color mPAGE®

Patrones de proteínas mPAGE®

  • Los estándares de proteínas mPAGE® para Western consisten en siete proteínas recombinantes de 20 kDa, 30 kDa, 40 kDa, 50 kDa, 60 kDa, 80 kDa y 120 kDa con un sitio de unión a IgG que se une a la mayoría de los anticuerpos. Esto permite visualizar tanto el marcador proteico como las proteínas de la muestra en el mismo western blot sin necesidad de reactivos adicionales.
  • Los estándares de proteínas mPAGE® Color incluyen una mezcla de diez proteínas altamente purificadas y preteñidas, con pesos moleculares que van desde los 10 kDa hasta los 203 kDa, acopladas covalentemente a diferentes cromóforos. Los estándares de proteínas mPAGE® Color están diseñados para observar la separación de proteínas durante la SDS-PAGE, verificar la eficiencia de la transferencia en el Western blot a las membranas y estimar el tamaño de las proteínas.
  • Los estándares de proteínas sin teñir mPAGE® incluyen una mezcla de doce proteínas recombinantes sin teñir que oscilan entre 10 kDa y 200 kDa. Las bandas de 85 kDa, 25 kDa y 10 kDa presentan una mayor intensidad para servir como puntos de referencia. Los estándares de proteínas sin teñir mPAGE® son adecuados para la determinación del peso molecular tras la SDS-PAGE o el Western blotting y sirven como estándares para calibrar la movilidad de los marcadores preteñidos.
La escalera de proteínas preteñida BLUeye tiene 12 bandas de 11, 17, 20, 25, 35, 48, 63, 75, 100, 135, 180 y 245 kDa. Se suministra en un tampón de carga para gel e incluye una banda de referencia verde y otra roja para facilitar su identificación.

Escaleras de proteínas preteñidas BLUeye

Escaleras de proteínas preteñidas BLUeye

La escalera de proteínas preteñida BLUeye cuenta con 12 bandas de 11, 17, 20, 25, 35, 48, 63, 75, 100, 135, 180 y 245 kDa. Se suministra en un tampón de carga para gel e incluye una banda de referencia verde y otra roja para facilitar su identificación.

Marcadores de proteínas ColorBurst para electroforesis en gel

Marcadores de proteínas ColorBurst™

Marcadores
de proteínas ColorBurst™

Los marcadores ColorBurst™ están compuestos por ocho polipéptidos que han sido reducidos químicamente y conjugados con colorantes de colores vivos. Los marcadores ColorBurst™ pueden utilizarse para estimar el peso molecular de las muestras, supervisar el progreso de una electroforesis o confirmar la finalización de un electroblotting.

Marcadores de proteínas SigmaMarker™

Los marcadores de proteínas SigmaMarker™ están diseñados para su uso con SDS-PAGE y cubren el rango de pesos moleculares habitual en la mayoría de las proteínas o sus subunidades. Estos marcadores de amplio rango, tanto de alto como de bajo peso molecular, están liofilizados con tampón de muestra, por lo que están listos para su uso tras su reconstitución con agua desionizada. Los marcadores están formulados para producir una distribución de bandas bien definidas de intensidad aproximadamente igual tras la electroforesis y la tinción con azul de Coomassie.

Marcadores de peso molecular ultrabajo para la electroforesis de proteínas en gel

Marcadores proteicos de rango ultrabajo

Marcadores
proteicos perfectos

Los marcadores de proteínas Perfect Protein Markers se han diseñado para su uso rutinario en SDS-PAGE con el fin de permitir una determinación muy precisa del tamaño de muestras desconocidas. A diferencia de muchos marcadores convencionales (por ejemplo, la ovoalbúmina o la albúmina sérica), los marcadores proteicos Perfect no contienen oligosacáridos que provoquen una migración anómala, bandas heterogéneas «difuminadas» o una estimación inexacta del tamaño. Estos marcadores están optimizados para su uso con la tinción con azul de Coomassie, pero también se pueden utilizar en cantidades ajustadas con otros métodos de tinción de geles, como la tinción con plata y la tinción con colorantes fluorescentes.

Marcadores de proteínas de rango ultrabajo

Los marcadores de peso molecular de rango ultrabajo (P.M. 1.060-26.600 Da) se han utilizado como marcadores de proteínas en SDS-PAGE y Western blotting. Se recomienda su fijación.

Marcadores de proteínas no desnaturalizantes

Los marcadores no desnaturalizantes se han utilizado como estándares para la PAGE nativa, así como para calibrar columnas en la cromatografía de exclusión en gel.

Marcadores biotinilados

La mezcla estándar de peso molecular biotinilada contiene proteínas conjugadas con biotina para su uso tanto como estándares de SDS-PAGE como para el Western blot. La visualización se lleva a cabo mediante estreptavidina-peroxidasa con un sustrato colorimétrico o luminiscente adecuado. Estos marcadores pueden detectarse simultáneamente con procedimientos de inmunotinción.

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