X-tremeGENE^™ siRNAトランスフェクション試薬

短干渉RNA (siRNA)はトランスフェクションにより細胞に直接導入できます。X-tremeGENE siRNAトランスフェクション試薬といった脂質ベースのトランスフェクション試薬は、siRNAを動物細胞に送達するための簡便で信頼性が高く効率的な媒体を提供できるため、遺伝子ノックダウンが細胞と機能にもたらす結果の研究が可能になります。
この革新的な試薬は、siRNAおよびsiRNAとプラスミドDNAの混合物(コトランスフェクション)と複合体を形成し、核酸を動物細胞に効率的に送達して遺伝子抑制を誘導します。トランスフェクションは、希釈したトランスフェクション試薬を希釈したsiRNAと混合して培養した後、この複合体を細胞に加えるという、数ステップのみで完了します。X-tremeGENE siRNAトランスフェクション試薬は血清存在下または非存在下のいずれでもよく機能し、細胞毒性が低いため、培地を変更することなく使用できます。本製品は動物成分を含みません。

内容物

孔径0.2 μmの膜でろ過し、ポリプロピレン・チューブに入れて供給する溶液。

X-tremeGENE siRNAトランスフェクション試薬は、短干渉RNA (siRNA)をHeLa、NIH 3T3、HEK-293、CHO-K1、COS-7などの一般的に使用される多くの細胞種と、HT29、ヒト腺がん細胞株などのトランスフェクションが困難ないくつかの細胞株に効率的に送達します。

• 多くの異なる細胞種で90%を超える遺伝子の発現をノックダウン。
• siRNAとコトランスフェクションをベースとする、遺伝子ノックダウン実験用単一試薬により実験の柔軟性を最大化。
• 細胞毒性が低い試薬を使用して意味のある結果が得られ、観察する細胞への効果はトランスフェクション手順によるものではなく、トランスフェクトされたsiRNAによるものであることが保証されます。
• 血清の有無によらず作業できるため、トランスフェクション前後で培地(血清を含まない培地など)を変更する必要がありません。

X-tremeGENE siRNAトランスフェクション試薬は脂質とその他の成分を独自に混合したものであり、動物製品を含みません。

活性アッセイ：X-tremeGENE siRNAトランスフェクション試薬(1～2.5 μl)は、HPRTハウスキーピング遺伝子に特異的なsiRNA (0.1～0.35 μg)と混合したものです。本混合物を使用して10%ウシ胎児血清(FBS)存在下でHEK-293細胞(単層中、30～50%融合)をトランスフェクトします。トランスフェクション後、LightCycler®リアルタイムPCRシステムでHPRT mRNA細胞の減少量を測定します。mRNAを測定すると、一般に70～95%のノックダウン効率が観察されます。

細胞毒性分析：培地を変更せず、HEK-293細胞を血清存在下でsiRNA/X-tremeGENE siRNA試薬複合体に72時間暴露します。その後、WST-1細胞増殖試薬(ロシュ)を使用した細胞分析により細胞毒性を試験します。

生命科学研究用途に限ります。診断措置において使用しないでください。

X-tremeGENE is a trademark of Roche