DCAS9PROT
dCas9-3XFLAG™-生物素蛋白
from Streptococcus pyogenes with D10A and H840A mutations, recombinant, expressed in E. coli, 1X NLS
别名:
Cas9 D10A H840A, dCas9，催化失活的Cas9, 失活Cas 9
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关于此项目
NACRES:
NA.51
UNSPSC Code:
12352202
Form:
lyophilized powder
Assay:
≥90% (SDS-PAGE)
Recombinant:
expressed in E. coli
recombinant
expressed in E. coli
Quality Level
assay
≥90% (SDS-PAGE)
form
lyophilized powder
packaging
pkg of 1 kit (3 components)
shipped in
ambient
storage temp.
−20°C
General description
来自化脓性链球菌（Streptococcus pyogenes ）的重组dCas9-3X FLAG-生物素蛋白（~165KD）是用于基因组工程和基因组DNA检测、分离和成像实验的即用型试剂。当与靶点特异性向导RNA结合时，死亡的酿脓链球菌（Streptococcus pyogenes ）Cas9蛋白作为DNA靶标蛋白，适用于转染细胞培养物、显微注射、DNA下拉、染色质富集、微生物鉴定和原位DNA成像。在C末端，使用SV40大T抗原核定位信号（NLS）标记蛋白质以用于入核转运，使用3XFLAG表位和生物素标记蛋白质以用于基于FLAG抗体®或链霉抗生物素的实验。
Application
功能基因组学/靶标验证/基因组编辑/分子生物学/合成生物学/DNA检测/分离/DNA成像
Biochem/physiol Actions
CRISPR/Cas体系被细菌和古细菌用作抵抗入侵病毒和质粒的防御屏障。最近，来自化脓性链球菌（ Streptococcus pyogenes ）的II型CRISPR/Cas系统经过设计可用于真核系统，它采用两种分子组分：单个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA（gRNA）。两个蛋白质结构域RuvC和HnH（分别为D10A和H840A）负责核酸酶活性，它们发生突变会导致Cas9内切核酸酶失活（dCas9）。随后，可以用gRNA对蛋白质进行编程，并指导其与所需的DNA序列结合。
Features and Benefits
- 高特异性
- 适用于基因组DNA检测/分离
- 可立即用于注射/转染
Packaging
- 50 μg包装（≥ 300 pmol）
- 250 μg包装（≥ 1500pmol）
Preparation Note
dCas9蛋白冻干粉应使用提供的复原(Reconstitution)溶液重悬，获得所需浓度。轻轻敲打试管以完全溶解冻干的粉末，在冰上孵育10分钟，然后离心试管以使内容物离心至试管底部。
Other Notes
每个试剂盒包含：
- 一瓶dCas9重组蛋白
- 一瓶1×稀释缓冲液，1 mL
- 一瓶无核酸酶的水和甘油，1 mL
Legal Information
3xFLAG is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
存储类别
10 - Combustible liquids
wgk
WGK 3
实验方案
可靠的PURedit™ CRISPR合成gRNA和Cas9蛋白可提供行业领先的靶位点切割和特异性
Guaranteed PURedit™ CRISPR synthetic gRNAs and Cas9 protein offer industry-leading on-site cutting and specificity
Combine guaranteed sgRNAs with our comprehensive range of CRISPR products and tools, including Cas9 and delivery reagents, for efficient genome modification with higher specificity.
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Instructions
Matthew D Newton et al.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), 2478, 349-378 (2022-09-06)
The discovery of CRISPR/Cas9 as an easily programmable endonuclease heralds a new era of genetic manipulation. With this comes the prospect of novel gene therapy approaches, and the potential to cure previously untreatable genetic diseases. However, reports of spurious off-target