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MANIPULATION SÉCURISÉE ET MÉLANGE EFFICACE DES MILIEUX DE CULTURE CELLULAIRE SOUS FORME DE POUDRE SÈCHE

Les formulations de milieux de culture cellulaire sous forme de poudre sèche offrent de nombreux avantages en termes de transport et de stockage. Pour tirer pleinement parti de ces avantages, ces formulations doivent être hautement solubles et homogènes. Ces propriétés peuvent être obtenues grâce à la combinaison de procédés de broyage optimisés et de technologies de formulation adaptées. De plus, les milieux doivent être fournis sous une forme pratique à manipuler, par exemple sous forme de sachets de poudre sèche pré-pesés pouvant être raccordés directement aux cuves d’hydratation. Cela minimise les risques de contamination du produit, protégeant ainsi le personnel et les installations. Lors du mélange, en particulier à grand volume, une bonne dispersion et dissolution des particules peuvent être assurées grâce à des systèmes de mélange à usage unique spécialement conçus.

Intensification du « Seed Train » à l’aide de HCDC et de milieux d’expansion spécialement conçus

Le processus, qui va de la décongélation d’un seul flacon de cellules à la multiplication cellulaire pour un lot de fabrication conforme aux BPF, est chronophage, exigeant en main-d’œuvre et nécessite des opérations de culture cellulaire en milieu ouvert. L’utilisation d’une méthode de cryoconservation à haute densité cellulaire (HCDC), qui alimente le premier bioréacteur de la chaîne d’ensemencement, permet de rationaliser l’ensemble du processus. Le volume congelé étant relativement important, les poches à usage unique sont plus adaptées que les flacons. Cela permet d’utiliser la méthode HCDC dans un processus fermé, réduisant ainsi les risques de contamination.

La perfusion de la chaîne d’ensemencement constitue une solution pour atteindre des densités cellulaires plus élevées, et il est recommandé d’utiliser des milieux d’expansion spécialement conçus pour obtenir un résultat optimal. Elle permet un ensemencement à haute densité de votre bioréacteur de production grâce à une biomasse cellulaire plus importante ou réduit votre empreinte en amont en diminuant le nombre de bioréacteurs dans la chaîne d’ensemencement. De plus, elle permet de gagner du temps en éliminant la phase d’adaptation lors des transferts, de la décongélation des flacons à l’expansion et à la production.

RÉDUCTION DES RISQUES DE CONTAMINATION VIRALE GRÂCE À DES MATIÈRES PREMIÈRES D’ORIGINE NON ANIMALE ET CHIMIQUEMENT DÉFINIES

La contamination provient souvent des matières premières et des composants d’origine animale, tels que le sérum bovin ou la trypsine. Dans la mesure du possible, les matières premières et les composants d’origine animale présentant un risque élevé de contamination virale doivent être remplacés par des alternatives à risque faible (ou plus faible), telles que des milieux de culture cellulaire chimiquement définis et des suppléments recombinants d’origine non animale. Cela simplifie également les processus réglementaires.

SURMONTER LES PROBLÈMES LIÉS AUX ACIDES AMINÉS INSOLUBLES OU INSTABLES

Les acides aminés essentiels que sont la tyrosine et la cystéine posent un défi lorsqu’ils sont utilisés en amont du processus de fabrication, en raison de leur faible solubilité (tyrosine) et de leur faible stabilité (cystéine) à pH neutre. Afin de simplifier les procédés en fed-batch et de permettre des concentrations disponibles élevées de ces deux acides aminés, la tyrosine et la cystéine chimiquement modifiées permettent une stratégie d’alimentation unique à pH neutre. Cette approche présente d’autres avantages, notamment une réduction du volume d’alimentation et une augmentation de la productivité volumétrique.

GARANTIR LA COHÉRENCE D'UN LOT À L'AUTRE DES MATIÈRES PREMIÈRES

Le manque d’uniformité des matières premières peut entraîner des variations importantes dans les processus en amont, provoquant une perte inattendue de densité et de viabilité cellulaires – et, en fin de compte, une baisse de rendement. Une meilleure compréhension des matières premières permet de mieux maîtriser les variations de processus. Pour ce faire, il convient de remonter la chaîne d’approvisionnement jusqu’aux matières premières et de les caractériser.

ACCÉLÉRER LA QUALIFICATION DES MATIÈRES PREMIÈRES

Les directives réglementaires et industrielles actuelles ne définissent pas de normes claires pour les produits chimiques utilisés dans les bioprocédés en amont. En l’absence de normes, les fabricants de médicaments s’appuient fortement sur leurs fournisseurs pour un approvisionnement et une qualification efficaces des matières premières ; cependant, les délais habituels pour collecter les informations sur les matières premières via des questionnaires et des déclarations distinctes peuvent être inacceptablement longs, prenant souvent plusieurs semaines. Par conséquent, les fabricants recherchent des partenaires d’approvisionnement capables de fournir des matières premières rigoureusement qualifiées selon les normes les plus exigeantes du secteur et accompagnées d’un dossier documentaire complet répondant aux besoins d’information des fabricants pharmaceutiques lors de la qualification des matières premières, de la réalisation d’une évaluation des risques ou de l’optimisation d’un processus de fabrication.