Clonage moléculaire et expression des protéines
Le clonage moléculaire a pour objectif d'insérer le gène d'intérêt (GOI) dans un vecteur plasmidique, un fragment circulaire d'ADN contenant divers éléments destinés à faciliter le clonage, la sélection des clones et l'expression protéique. Les chercheurs utilisent souvent des enzymes de restriction de l'ADN et une ligase pour insérer le GOI en phase de lecture dans le vecteur d'expression en vue de l'expression protéique ultérieure. Ce vecteur est ensuite inséré dans une cellule qui exprimera la protéine codée par le GOI, ou bien l'expression protéique est réalisée à l'aide de systèmes de synthèse protéique acellulaires.
Une fois la protéine exprimée, sa fonction peut être étudiée en fonction de son impact sur la signalisation cellulaire, la morphologie ou d'autres aspects au sein de la cellule. La protéine peut également être exprimée en grandes quantités, purifiée et utilisée dans de nombreuses applications en aval. Pour plus d'informations, découvrez notre gamme complète de réactifs et de ressources fiables, disponibles tout au long du processus de clonage et d'expression pour les systèmes d'expression de protéines chez les insectes, les bactéries et les mammifères.
Products
Enzymes de modification de l'ARN et de l'ADN
Lors du clonage moléculaire, les chercheurs utilisent fréquemment des enzymes de restriction pour couper l'ADN et d'autres enzymes, telles que les enzymes de modification de l'ARN et de l'ADN, pour ajouter, retirer ou modifier des groupes chimiques sur les acides nucléiques. Afin de répondre aux divers besoins de la recherche, nous proposons une gamme complète de ces enzymes essentielles, notamment la phosphatase alcaline, la protéase, l'ARN polymérase T7, la pyrophosphatase, la ribonucléase A et l'ADN ligase T4. Nos réactifs, associés à des tampons spécialement formulés, garantissent une efficacité et une fiabilité élevées dans la manipulation de l'ADN et de l'ARN.
Système pET Novagen®, vecteurs Simplicon® et systèmes d'expression protéique UCOE®
Nos vecteurs d'expression E. coli, insectes et mammifères simplifient la sélection des transformants positifs. Parmi les produits phares, on peut citer :
- Le système Novagen® pET est reconnu comme l'étalon en matière de clonage et d'expression de protéines recombinantes dans des systèmes bactériens.
- Le système d'expression protéique in vivo Simplicon® offre un système d'expression à base d'ARN synthétique, auto-réplicatif, modulable et sans intégration génomique. L'expression Simplicon® génère une expression protéique immédiate et durable de plusieurs gènes dans des cellules humaines transfectées, sans risque d'intégration génomique.
- La technologie de vecteur d'expression UCOE® (Ubiquitous Chromatin Opening Element) permet d'obtenir plusieurs grammes de protéines en moins de 30 jours dans des cellules mammifères transfectées de manière stable. La technologie d'expression UCOE® empêche le silençage des transgènes et offre une expression génique plus constante, plus stable et plus élevée (jusqu'à 20 fois supérieure) que les vecteurs conventionnels, quel que soit le site d'intégration chromosomique.
Réactifs de transformation bactérienne et de levure
La transformation bactérienne consiste à insérer de l'ADN étranger dans des bactéries à l'aide de méthodes telles que le choc thermique et l'électroporation. Notre gamme de cellules compétentes est conçue pour une expression optimale des plasmides et des protéines, même dans des conditions expérimentales difficiles. Parmi les points forts, on peut citer :
- Les cellules compétentes NovaBlue® sont optimisées pour l'efficacité et la préservation des plasmides, permettant une préparation de bibliothèques de qualité supérieure et une meilleure stabilité des plasmides.
- Les systèmes Rosetta™, Origami™ et Overnight Express™ favorisent le repliement correct des protéines et augmentent la solubilité ou l'expression des protéines cytotoxiques.
Pour la transformation de levures, nous proposons des protocoles simples et des produits évolutifs qui s'intègrent parfaitement aux flux de travail d'expression protéique.
Pour la recherche sur les cellules mammifères, consultez notre page Transfection pour découvrir d'autres options.
Vecteurs plasmidiques de BCCM/GeneCorner
Découvrez notre offre élargie de vecteurs plasmidiques de BCCM/GeneCorner – une banque de plasmides unique, certifiée ISO, hébergée par le département de biologie moléculaire biomédicale de la faculté des sciences de l'université de Gand (UGent). Cette collection diversifiée comprend une variété de plasmides de clonage et d'expression de protéines recombinantes dans un large éventail d'organismes cibles, soutenant ainsi la recherche modernisée en biologie moléculaire et protéique.
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Ressources connexes
- Brochure: Molecular Essentials Guide
Learn how our comprehensive molecular tools and reagents provide precise, ready-to-use solutions for your workflows.
- Article: Cell-Free Protein Synthesis or Expression
Cell-free protein synthesis rapidly produces recombinant proteins without cells, utilizing translation machinery from different cell types for efficiency.
- Article: Competent Cell Selection & E. coli Markers Guide
Select competent cells by application, transformation efficiency, and genotype. We also present a list of E. coli markers for reference.
- Article: Simplicon™ in vivo Protein Expression System
Simplicon: A non-genome integrating, tunable and sustained protein expression system in human cells, based on a single, polycistronic, and self-replicating synthetic RNA.
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