Solution de dissociation cellulaire Accutase

Solution de dissociation cellulaire d'enzymes protéolytiques et collagénolytiques. S'utilise en routine pour dissocier les cellules des surfaces de culture tissulaire standard en plastique et des surfaces à revêtement adhésif, notamment SmartPlastic. ACCUTASE ne contient aucun produit issu de bactéries ou de mammifères.

Le réactif ne contenant pas d'enzymes universellement protéolytiques, il se peut qu'il ne libère pas uniformément tous les types de cellules/tissus. Une optimisation du type de cellule, du nombre de passages, du temps d'incubation et de la concentration des réactifs doit généralement être effectuée pour une meilleure efficacité des réactifs.

Il a été démontré qu'ACCUTASE est efficace sur une grande variété de types de cellules, notamment : fibroblastes, kératinocytes, cellules endothéliales vasculaires, hépatocytes, cellules musculaires lisses vasculaires, progéniteurs hépatocytaires, cellules neuronales primaires d'embryon de poulet, cellules souches de moelle osseuse, cellules CHO et BHK adhérentes, macrophages, cellules 293, cellules L929, cellules germinales testiculaires de souris immortalisées, cellules 3T3, Vero, COS, HeLa, NT2, MG63, mélanome métastatique M24 et A375, gliomes U251 et D54, cellules de fibrosarcome HT1080 et cellules d'insecte Sf9.

Chaque lot d'ACCUTASE est testé pour en contrôler la stérilité (par la méthode de filtration sur membrane de l'USP), l'activité enzymatique (avec des tétrapeptides chromagènes synthétiques) et la dissociation des cellules du plastique de culture tissulaire.

Dissociation cellulaire

1. Décongeler ACCUTASE^® à température ambiante.

2. Laver la plaque, le flacon ou les billes au PBS stérile.

3. Ajouter ACCUTASE dans la boîte ou le flacon de culture en appliquant un procédé aseptique à raison de 10 ml pour une surface de 75 cm2.

4. Remettre la culture dans l'incubateur à 37 °C et laisser les cellules se dissocier (5-10 minutes).

5. Compter les cellules et les passages comme d'habitude. Aucun lavage ou inhibiteur enzymatique supplémentaire n'est nécessaire.



La durée d'incubation et la concentration de réactif optimales doivent être déterminées pour chaque type de cellule/tissu testé par l'utilisateur final.

100 ml, prêt à l'emploi, solution stérile congelée. 1x enzymes ACCUTASE en PBS Dulbecco (0,2 g/l de KCl, 0,2 g/l de KH2PO4, 8 g/l de NaCl et 1,15 g/l de Na2HPO4) contenant 0,5 mM d'EDTA·4Na et 3 mg/l de rouge de phénol.

Stable si conservé à -20 °C. Voir la date de péremption du lot. À réception, la conservation à -20 °C est recommandée. Après décongélation, ACCUTASE peut être conservé jusqu'à 2 mois à 4 °C. NE PAS CONSERVER À TEMPÉRATURE AMBIANTE

Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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