DUO92013
Kit de réactifs de détection in situ dans le rouge lointain Duolink®
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A propos de cet article
NACRES:
NA.32
UNSPSC Code:
12352200
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Duolink®
technique(s)
proximity ligation assay: suitable
fluorescence
λex 644 nm; λem 669 nm (Cyanine 5, Zeiss Filter set 50)
suitability
suitable for fluorescence
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
Quality Level
Application
L′essai de ligature de proximité (« proximity ligation assay », PLA®) Duolink® assure la détection endogène d′interactions protéiques, de modifications post-traductionnelles et de niveaux d′expression de protéines au niveau d′une molécule individuelle dans des échantillons de cellules et de tissu fixés.
Pour utiliser ce produit, suivez le Protocole Duolink® par fluorescence in situ . Des instructions succinctes sont également disponibles.
Rendez-vous sur notre Centre d′information sur les essais PLA Duolink® pour en savoir plus sur la façon de réaliser une expérience avec Duolink®, les applications, la résolution des problèmes, etc.
Pour réaliser une expérience PLA in situ Duolink® complète, vous avez besoin de deux anticorps primaires(validés par PLA, IHC, ICC ou IF) reconnaissant deux épitopes cibles. Il vous faut également une paire de sondes PLA de différentes espèces (une PLUS et une MOINS), des réactifs de détection, des tampons de lavage et un milieu de montage. Notez que les anticorps primaires doivent provenir de la même espèce que les sondes PLA Duolink®. L′analyse se fait sur un équipement d′analyse par immunofluorescence standard.
Spécificité
Les réactifs de détection par fluorescence dans le rouge lointain sont souvent utilisés avec un filtre pour cyanine 5.
Note d′application
Deux anticorps primaires développés dans des espèces différentes sont nécessaires. Testez vos anticorps primaires (de type IgG, monoclonaux ou polyclonaux) avec un test standard d′immunofluorescence (IF), d′immunohistochimie (IHC) ou d′immunocytochimie (ICC) pour déterminer les conditions optimales de fixation, de blocage et de titrage. Les réactifs de PLA in situ Duolink® peuvent être utilisés sur des cellules fixées, des cellules centrifugées sur un appareil Cytospin, des cellules cultivées sur une lame, fixées au formol et incluses en paraffine (FFPE), ou du tissu (frais ou congelé). Aucun nombre minimal de cellules n′est requis.
Laissez-nous faire le travail pour vous et découvrez notreProgramme de services sur mesure pour accélérer vos projets Duolink®
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Pour utiliser ce produit, suivez le Protocole Duolink® par fluorescence in situ . Des instructions succinctes sont également disponibles.
Rendez-vous sur notre Centre d′information sur les essais PLA Duolink® pour en savoir plus sur la façon de réaliser une expérience avec Duolink®, les applications, la résolution des problèmes, etc.
Pour réaliser une expérience PLA in situ Duolink® complète, vous avez besoin de deux anticorps primaires(validés par PLA, IHC, ICC ou IF) reconnaissant deux épitopes cibles. Il vous faut également une paire de sondes PLA de différentes espèces (une PLUS et une MOINS), des réactifs de détection, des tampons de lavage et un milieu de montage. Notez que les anticorps primaires doivent provenir de la même espèce que les sondes PLA Duolink®. L′analyse se fait sur un équipement d′analyse par immunofluorescence standard.
Spécificité
Les réactifs de détection par fluorescence dans le rouge lointain sont souvent utilisés avec un filtre pour cyanine 5.
Note d′application
Deux anticorps primaires développés dans des espèces différentes sont nécessaires. Testez vos anticorps primaires (de type IgG, monoclonaux ou polyclonaux) avec un test standard d′immunofluorescence (IF), d′immunohistochimie (IHC) ou d′immunocytochimie (ICC) pour déterminer les conditions optimales de fixation, de blocage et de titrage. Les réactifs de PLA in situ Duolink® peuvent être utilisés sur des cellules fixées, des cellules centrifugées sur un appareil Cytospin, des cellules cultivées sur une lame, fixées au formol et incluses en paraffine (FFPE), ou du tissu (frais ou congelé). Aucun nombre minimal de cellules n′est requis.
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Spécificité
Les réactifs de détection par fluorescence dans le rouge lointain sont souvent utilisés avec un filtre pour cyanine 5.
Note d'application
Cette application nécessite deux anticorps primaires produits par des espèces différentes. Testez vos anticorps primaires (de type IgG, monoclonaux ou polyclonaux) avec un test standard d'immunofluorescence (IF), d'immunohistochimie (IHC) ou d'immunocytochimie (ICC) pour déterminer les conditions optimales de fixation, de blocage et de titrage. Les réactifs de in situ Duolink® peuvent être utilisés sur des cellules fixées, des cellules centrifugées sur un appareil Cytospin, des cellules cultivées sur une lame, fixées au formol et incluses en paraffine (FFPE), ou du tissu (frais ou congelé). Aucun nombre minimal de cellules n'est requis.
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Les réactifs de détection par fluorescence dans le rouge lointain sont souvent utilisés avec un filtre pour cyanine 5.
Note d'application
Cette application nécessite deux anticorps primaires produits par des espèces différentes. Testez vos anticorps primaires (de type IgG, monoclonaux ou polyclonaux) avec un test standard d'immunofluorescence (IF), d'immunohistochimie (IHC) ou d'immunocytochimie (ICC) pour déterminer les conditions optimales de fixation, de blocage et de titrage. Les réactifs de in situ Duolink® peuvent être utilisés sur des cellules fixées, des cellules centrifugées sur un appareil Cytospin, des cellules cultivées sur une lame, fixées au formol et incluses en paraffine (FFPE), ou du tissu (frais ou congelé). Aucun nombre minimal de cellules n'est requis.
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Features and Benefits
- Aucune surexpression ou manipulation génétique nécessaire
- Grande spécificité (moins de faux positifs)
- Sensibilité à une seule molécule du fait de l′amplification en cercle roulant (RCA)
- Quantification relative possible
- Aucun équipement spécial requis
- Plus rapide et plus simple que la technique FRET
- Exactitude accrue par rapport à co-IP
- Résultats prêts à être publiés
General description
Le Kit de réactifs de détection in situ dans le rouge lointain Duolink® contient tous les réactifs in situ Duolink nécessaires à l′amplification et à la détection des sonde PLA® liées. Les sondes de détection comprennent un fluorophore (longueur d′onde d′excitation = 644 nm et longueur d′onde d′émission = 669 nm), qui peut être visualisé avec le même filtre que Cy®5. Les expériences réalisées avec les réactifs in situ Duolink permettent de détecter et de visualiser les interactions entre les protéines, les niveaux d′expression des protéines et les modifications post-traductionnelles au niveau d′une molécule individuelle dans des échantillons de cellules et de tissus fixés.
Other Notes
- 5x ligature - contient des oligonucléotides qui s′hybrident aux sondes PLA ainsi que tous les éléments nécessaires à la ligature, hormis la ligase
- 1x ligase (1 unité/μl)
- 1x polymérase (10 unités/μl)
- 5x amplification dans le rouge lointain - contient tous les éléments nécessaires à l′amplification en cercle roulant (RCA), hormis la polymérase Contient également des sondes oligonucléotidiques marquées avec un fluorophore qui s′hybride au produit de RCA.
Éléments non inclus dans le kit de détection :
Anticorps primaires, sondes PLA, tampons de lavage, milieu de montage
Preparation Note
Stockage et stabilité : Conserver les éléments à -20 °C. Il est recommandé de conserver en permanence les enzymes au froid (à -20 °C) ; utiliser un bloc de congélation lorsqu′elles sont sorties du congélateur.
Legal Information
Cy is a registered trademark of Cytiva
Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
signalword
Danger
hcodes
pcodes
Hazard Classifications
Resp. Sens. 1
Classe de stockage
10 - Combustible liquids
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Profiling of protein?protein interactions via single-molecule techniques predicts the dependence of cancers on growth-factor receptors.
Lee H W, et al.
Nature Biomedical Engineering, 2(4), 239-239 (2018)
Oliver Werz et al.
Nature communications, 9(1), 59-59 (2018-01-06)
Proinflammatory eicosanoids (prostaglandins and leukotrienes) and specialized pro-resolving mediators (SPM) are temporally regulated during infections. Here we show that human macrophage phenotypes biosynthesize unique lipid mediator signatures when exposed to pathogenic bacteria. E. coli and S. aureus each stimulate predominantly
M Aubele et al.
British journal of cancer, 103(5), 663-667 (2010-08-12)
Protein tyrosine kinase 6 (PTK6; breast tumour kinase) is overexpressed in up to 86% of the invasive breast cancers, and its association with the oncoprotein human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) was shown in vitro by co-precipitation. Furthermore, expression
Pengcheng Zhu et al.
Cancer cell, 19(3), 401-415 (2011-03-15)
Cancer is a leading cause of death worldwide. Tumor cells exploit various signaling pathways to promote their growth and metastasis. To our knowledge, the role of angiopoietin-like 4 protein (ANGPTL4) in cancer remains undefined. Here, we found that elevated ANGPTL4
Ivan Matic et al.
Molecular cell, 39(4), 641-652 (2010-08-28)
Reversible protein modification by small ubiquitin-like modifiers (SUMOs) is critical for eukaryotic life. Mass spectrometry-based proteomics has proven effective at identifying hundreds of potential SUMO target proteins. However, direct identification of SUMO acceptor lysines in complex samples by mass spectrometry
Contenu apparenté
Instructions
Application Note
Using Duolink in Multiwell Plates
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