form
solution
specific activity
>50 units/μg protein
feature
dNTPs included: no, hotstart: no
packaging
pkg of 1,000 U
manufacturer/tradename
Roche
storage condition
avoid repeated freeze/thaw cycles
parameter
42 °C optimum reaction temp.
technique(s)
RT-PCR: suitable, RT-qPCR: suitable
input
purified RNA
detection method
probe-based
General description
逆転写酵素AMVはトリ骨髄芽球症ウイルスRNAゲノムの遺伝子産物です。精製酵素の酵素活性がある型はα,ββとαβです。分子量は、α-サブユニットが68 kDa、β-サブユニットが92 kDaです。成熟したαβ型は逆転写酵素AMVの型の中で最も活性がある型であり、RNA依存性DNAポリメラーゼ、DNA依存性DNAポリメラーゼ、RNase H、巻き戻し活性が含まれます。逆転写酵素AMVは、cDNA合成、増幅反応やジデオキシDNAシークエンシングに使用するためのファーストストランドcDNA合成に使用されます。
またRNAシークエンシング、DNAフラグメントの3′末端標識、ゲノムフットプリンティング用のssプローブの生成にも使用されます。
逆転写酵素AMVの活性には、プライマーとMg2+又はMn2+が必要です。
またRNAシークエンシング、DNAフラグメントの3′末端標識、ゲノムフットプリンティング用のssプローブの生成にも使用されます。
逆転写酵素AMVの活性には、プライマーとMg2+又はMn2+が必要です。
Application
逆転写酵素AMVは以下の用途に適しています:
- 第1鎖cDNAと第2鎖cDNAの合成と、後続の増幅反応(RT-PCR)に使用する第1鎖cDNAの合成
- ジデオキシDNAシーケンシング
- プライマー伸長
- RNAシーケンシング
- DNA断片の3′-末端の標識
- ゲノムフットプリント実験用の一本鎖プローブの作製
Biochem/physiol Actions
AMV(トリ骨髄芽球症ウイルス)逆転写酵素はRNA依存性DNAポリメラーゼ及びDNA依存性DNAポリメラーゼです。AMV逆転写酵素の活性には、プライマーとMg2+又はMn2+が必要です。
熱失活:5分間、95℃
熱失活:5分間、95℃
Features and Benefits
- 全RNA、mRNA、ウイルスRNA、および二次構造に富むRNAを効率的に転写します。
- 12kbまでの全長cDNA断片が得られます。
- M-MuLV逆転写酵素と比べ、熱安定性(最大60℃)と特異性が高いです。
Packaging
2コンポーネントを含む1キット
Preparation Note
−15~−25℃で保存してください(−70℃で保存すると、凍結融解の繰り返しにより酵素が劣化する可能性が高い)。
保存用バッファー:200 mMリン酸カリウム、2 mMジチオトレイトール、0.2% Triton X-100(v/v)、50%グリセロール(v/v)、pH 7.2。
Analysis Note
混入物質の不在:最新の品質管理手順に従い、様々な核酸とインキュベートすることにより検出可能な非特異的RNase及び非特異的DNasesがないことが確認されています(ゲル電気泳動分析)。
性能試験:逆転写酵素AMVはcDNA合成キット及びRT-PCRにおいて性能試験が行われています。
性能試験:逆転写酵素AMVはcDNA合成キット及びRT-PCRにおいて性能試験が行われています。
Other Notes
1ユニットは、ポリ(A)+ · d(pT)15をテンプレートプライマーとして+37℃、10分間で、1 nmolの[3H]-dTMPを酸不溶性物質に取り込ませる酵素活性です。
体積活性:20~25 U/μL。さらに詳しい情報につきましては試験成績書をご参照ください。
体積活性:20~25 U/μL。さらに詳しい情報につきましては試験成績書をご参照ください。
ライフサイエンス研究専用。診断目的での使用はできません。
キットの構成要素のみ
製品番号
詳細
- Reverse Transcriptase AMV 20-25 U/μl
- First-strand cDNA Synthesis Buffer 5x concentrated
保管分類
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
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