5-ブロモ-2′-デオキシ-ウリジン標識および検出キットII

細胞DNAに取り込まれた5-ブロモ-2'-デオキシ-ウリジン（BrdU）の検出のための免疫組織化学アッセイです。

細胞の増殖は、細胞DNAへの放射性同位体[³H]-チミジンの取り込みを、オートラジオグラフィーによってモニタリングすることで調査できます。
あるいは、5-ブロモ-2'-デオキシ-ウリジン（BrdU）が、チミジンの代わりに使用できます。DNAにBrdUを取り込んだ細胞は、BrdUに対するモノクローナル抗体と、酵素または蛍光試薬で標識した二次抗体を使用することで容易に検出できます。

本キットは、細胞DNAに取り込まれたBrdUの免疫組織化学検出に使用されます。

5-ブロモ-2′-デオキシ-ウリジン標識・検出キットIIは、次の用途で使用されています。

• 組織学的検査のため歯根の標識を行う。
• マウス前頭切片の免疫染色。
• 肝細胞癌切片の免疫蛍光イメージング。

BrdUでプレ標識したサンプルをエタノールと混合し、その後、最適化されたヌクレアーゼ混合物を含む抗BrdUモノクローナル抗体とインキュベートします。これらのヌクレアーゼは、抗体がBrdUに結合できるように一重鎖DNA断片を生成します。次に、アルカリ性ホスファターゼ（AP）で標識化した、マウスイムノグロブリンに対する抗体を加え、抗BrdU抗体と結合させます。サンプルを、その後、AP基質およびNBT/BCIPとインキュベートすると、NBT/BCIPは代謝されて発色性の反応物が生成されます。サンプルを位相差顕微鏡を使用して測定します。

抗-BrdUモノクローナル抗体は、5-ブロモ-2'-デオキシ-ウリジンに特異的に結合し、5-ヨード-2'-デオキシ-ウリジンと交叉反応を示します（10%）。抗-BrdUは、5-フルオロ-2'-デオキシ-ウリジンならびにチミジンおよびウリジンなどの他の内因性細胞成分と交叉反応を示しません。

7種のコンポーネントを含む1キット。

使用濃度：標識試薬の使用濃度は、In Situ細胞増殖キットのWCに対応します。
サンプル物質：
細胞培養：接着細胞、懸濁細胞、組織または外植片培養。凍結またはパラフィン包埋組織切片（in vivo標識後）。

ライフサイエンス研究のみに使用できます。診断用には使用できません。