細胞増殖キットI（MTT）

細胞増殖キットI（MTT）は、細胞増殖、生存率、および細胞毒性の非放射活性定量のための比色分析法です。 サンプルには、96ウェルマイクロプレートに接着あるいは懸濁させた培養細胞のどちらでも使用できます。

比色分析法は、培地に添加されたテトラゾリウム塩の開裂によって、生細胞の数を測定します。本テクニックは、微小培養において洗浄や細胞の回収を必要としない完全アッセイであり、ELISAリーダーによってデータ解析でき、同じマイクロプレート内で実施できます。
MTTは報告された最初のテトラゾリウム塩です。小胞体の酵素によって開裂し、ホルマザンを生成します。この生物還元反応は生細胞のみに起こり、解糖系を通じたNAD（P）Hの生成に関与しています。そのため、生成されたホルマザン色素の量は、代謝的に活性のある培養細胞の数に直接相関します。

細胞増殖、生存率、および細胞毒性の非放射活性定量のための、MTTベースの比色分析法です。

細胞増殖キットI（MTT）は、96ウェルプレート形式を使用した、細胞集団中の細胞増殖および生存率の、非放射活性、分光光度定量に使用されます。本キットは以下のことに使用できます：

• 成長因子、サイトカイン、マイトジェンおよび栄養素に対する細胞増殖の測定
• 抗癌剤や他の医薬品化合物などの、細胞毒性および細胞増殖抑制化合物の分析
• 成長阻害抗体や生理学的メディエーターの評価
• 骨細胞増殖のための、骨組織エンジニアリングを採用した、様々な足場の生物適合性試験

本アッセイは、電子カップリング試薬の存在下での、テトラゾリウム塩MTTの開裂に基づきます。生成された水不溶性のホルマザン塩を、追加のステップで可溶化する必要があります。96ウェル組織培養プレートで増殖した細胞を、MTT溶液で約4時間インキュベーションします。インキュベーション後、水不溶性ホルマザン色素が生成されます。可溶化後、ホルマザン色素は、スキャンニングマルチウェル分光光度計（ELISAリーダー）を使用して定量されます。測定された吸光度は、生細胞数と直接相関します。
細胞増殖および生存率アッセイは、細胞生物学におけるルーチンアプリケーションとして特に重要です。テトラゾリウム塩（例、MTT、XTT、WST-1）は、このタイプの分析に特に有用です。テトラゾリウム塩は、ミトコンドリアの呼吸鎖に属するコハク酸-テトラゾリウム還元酵素システム（EC 1.3.99.1）によって開裂され、ホルマザンを生成し、これは代謝的に活性のある細胞だけに起こります（下記参照）。

1つのキットには2のコンポーネントが含まれています。

保管条件（使用液）： 2～8°C
融解後、MTT標識試薬は、2～8°Cで遮光して4週間まで保存できます。その場合、ポアサイズ0.2 μmの膜で試薬を濾過することをお勧めします。