細胞増殖試薬WST-1

内容
WST-1および電子カップリング試薬を含む、すぐに使用できる溶液です。

WST-1による比色アッセイは、細胞増殖、生存率、および細胞毒性の非放射活性定量法です。

細胞増殖には、ゲノムDNAの複製が必要です。そのため、DNA合成のモニタリングは、DNA合成の調節に関する研究に適しているだけでなく、細胞増殖の間接的なパラメーターにもなります。[³H]-チミジンは、複製細胞のDNAの標識に、古くから使用されてきました。[³H]-チミジンの使用における不利益を回避するため、5-ブロモ-2'-デオキシウリジン（BrdU）に基づく非放射活性定量法が開発されました。化学発光技術の使用は、高い感度と幅広い測定範囲を提供します。

細胞増殖試薬WST-1は、96ウェルプレート形式を使用した、細胞集団中の細胞増殖および生存率の、非放射活性、分光光度定量に使用されます。成長因子、サイトカイン、マイトジェンおよび栄養素に対する細胞増殖の測定。

• 抗癌剤や他の医薬品化合物などの、細胞毒性および細胞増殖抑制化合物の分析
• 成長阻害抗体や生理学的メディエーターの評価

安定なテトラゾリウム塩WST-1は、細胞表面において最初に起こる複雑なメカニズムによって、可溶性ホルマザンに開裂されます。この生物還元反応は主に、生細胞におけるNAD（P）Hの解糖系生成に依存しています。そのため、生成されたホルマザン色素の量は、代謝的に活性のある培養細胞の数に直接相関します。
96ウェル組織培養プレートで増殖させた細胞は、WST-1試薬で0.5～4時間インキュベーションされます。インキュベーション後、生成されたホルマザン色素は、スキャンニングマルチウェル分光光度計（ELISAリーダー）を使用して定量されます。測定された吸光度は、生細胞数と直接相関します。
細胞増殖および生存率アッセイは、細胞生物学におけるルーチンアプリケーションとして特に重要です。テトラゾリウム塩（例、MTT、XTT、WST-1）は、このタイプの分析に特に有用です。テトラゾリウム塩は、ミトコンドリアの呼吸鎖に属するコハク酸-テトラゾリウム還元酵素システム（EC 1.3.99.1）によって開裂され、ホルマザンを生成し、これは代謝的に活性のある細胞だけに起こります。

使用濃度：最善の結果を得るためには、10 μL/ウェルの細胞増殖試薬 WST-1を、100 μL/ウェルで培養した細胞に加えます（最終希釈1：10）。
100 μL/ウェルの細胞培養液を使用した場合、1バイアルで2500試験（マイクロプレート25枚分）を実施できます。
注意：200 μL/ウェルで細胞を培養した場合、20 μL/ウェルの細胞増殖試薬WST-1を加えてください。
保管条件（使用液）：2～8°C
注意：溶解中に沈殿や濁りが生じた場合、溶液を2～10分間、37°Cに加温し、かき混ぜて沈殿を溶かしてください。使用濃度が減少するため、遠心分離はお勧めしません。溶解後、WST-1試薬は、特別な制限なしに使用できます。以下のように保存してください：
融解後は2～8°Cで、遮光すれば、4週間まで保存できます。ただし、溶液の粘度が上がることに注意してください。そうなった場合は、上記のように、溶液を2～10分間、37°Cに加温してください。

長期保存
長期保存する場合は、WST-1のアリコートをプラスチックチューブに入れ、-15～-25°Cで使用期限まで保管できます。

ライフサイエンス研究のみに使用できます。診断には使用できません。