製品名
FastStart SYBR Green Master, sufficient for 500 reactions, sufficient for 5000 reactions, suitable for qPCR, suitable for RT-qPCR
usage
sufficient for 500 reactions
sufficient for 5000 reactions
feature
hotstart
dNTPs included
manufacturer/tradename
Roche
packaging
pkg of 500 x 20 μL reactions (04673484001)
pkg of 5000 x 20 μL reactions (04673492001)
technique(s)
RT-qPCR: suitable
qPCR: suitable
input
purified DNA
detection method
probe-based
Quality Level
関連するカテゴリー
Analysis Note
Application
- アデノ随伴ウイルス（AAV）力価測定のための定量的ポリメラーゼ連鎖反応（qPCR）
- グリセロアルデヒド-3-リン酸デヒドロゲナーゼ（GAPDH）と比較した各Col6a1～3遺伝子の発現レベルの測定のためのqPCR
- Gタンパク質共役エストロゲン受容体1（GPER）mRNAの定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）
- 遺伝子発現研究のためのqRT-PCR
LightCycler®装置以外のあらゆるリアルタイムqPCR装置でFastStart™ SYBR® Green Masterをご使用ください。
Features and Benefits
- PCRの感度と特異性を改善します:
- qPCRの結果の過剰評価を回避します:
- 広範囲にわたるDNAまたはcDNA標的の増幅と検出を行えます:
- LightCycler®機器以外のあらゆるリアルタイムPCR機器を使用することができます:
- qPCRの準備にかかる時間と労力を削減します:
- キャリーオーバー汚染によって生じる偽陽性の発生を防止します:
General description
FastStart™ SYBR® Green Masterは、LightCycler®装置以外のリアルタイムPCRシステムでの定量的ポリメラーゼ連鎖反応（qPCR）および逆転写（RT）-qPCR用の、ROXを含まないすぐに使用できるホットスタート反応混合液です。このマスター混合液を使用すれば、DNAの検出および分析のための反応液の調製が簡単になります。リアルタイムPCR装置、適切なPCR用プライマーおよび加水分解プローブと組み合わせてFastStart™ TaqMan® Probe Masterを使用することにより、特定のDNA配列の非常に高感度な検出および定量化が可能です。
SYBR® Green Iは、二本鎖DNA特異的色素です。各段階のDNA合成で、反応混合液に含まれるSYBR® Green I色素は、増幅されたPCR産物に結合します。蛍光によりアンプリコンを検出することができます。
ホットスタート産物では、特異性、感度、およびPCR収率が著しく改善されることが証明されています。FastStart™ Taq DNAポリメラーゼの一部のアミノ酸残基には熱不安定性のブロック基があり、室温ではこれが改変酵素を不活化します。したがって、プライマーが非特異的に結合できる間は、伸長が生じません。FastStart™ Taq DNAポリメラーゼは、高温（すなわち、+95℃におけるプレインキュベーション段階）でブロック基を除去することにより活性化されます。
FastStart™ SYBR® Green Masterは、GCまたはAT含量が多いDNA配列を含む、あらゆるDNAまたはcDNA標的配列の増幅および検出に使用することができます。しかし、現在使用中の検出プロトコルを、使用する特定のリアルタイムPCR機器に適合させたり、標的ごとに特定のPCRプライマーを設計したりすることが必要になります。
このマスター混合液とメルクのTranscriptor First Strand cDNA合成キットを組み合わせることで、2段階qRT-PCRで優れた結果を得てください。
Other Notes
原理上、FastStart SYBR Green Masterは、GC-リッチまたはAT-リッチな標的を含めて、あらゆるDNAまたはcDNA標的の増幅および検出に使用することが可能です。しかし、標的ごとに、以下の操作が必要になります:
- 現在使用中の検出プロトコルを、使用する特定のリアルタイムPCR機器に適合させ、
- 標的のための特定のPCRプライマーを設計します。
一般的な推奨事項につきましては、ご使用中のリアルタイムPCR機器の操作者マニュアルをご参照ください。
2種類の形態が利用可能です
マスター混合液は2種類の形態、すなわちROX基準色素を含むものと含まないものを利用できます。
キャリーオーバー汚染を防止します
このマスター混合液にはdUTPが含まれており、これがPCR産物に組み込まれることで、キャリーオーバー汚染によって生じる擬陽性の防止に役立ちます。次のPCRを行う際に、ウラシル-DNAグリコシラーゼを加えて、ウラシルを含むキャリーオーバー汚染物質 (前回のPCRに由来する増幅産物) を分解させることができます。
qRT-PCR
このマスター混合液と弊社の2段階qRT-PCR用Transcriptor First Strand cDNA合成キットを組み合わせます。このキットを用いることで、すべてのリアルタイムPCR機器で良好な結果と作業効率が得られます。
Legal Information
保管分類
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
資料
PCR master mix simplifies PCR/RT-PCR with components like DNA polymerase, dNTPs, MgCl2, and buffer, available commercially or DIY.
Watch these videos to learn how real time or quantitative PCR (qPCR) works and the benefits of both the SYBR Green-based and probe-based methods of qPCR assay.
The purpose of Hot Start PCR is to inhibit the PCR reaction in order to reduce nonspecific amplification, prevent the formation of primer dimers, and increase product yields.
PCRマスターミックスは、DNAポリメラーゼ、dNTP、MgCl2、バッファーのような成分によりPCR/RT-PCRの反応を簡略化するもので、市販のものも自身で作製するものもあります。
関連コンテンツ
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ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）は核酸分子増幅技術の1つであり、RT-PCR、ホットスタートPCR、エンドポイントPCRを含む多くのアプリケーションで広く使用されています。
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