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Merck

FSTMPMMRO

Roche

FastStart TaqMan®プローブマスター

sufficient for 100 reactions, sufficient for 500 reactions, sufficient for 2000 reactions, suitable for qPCR, suitable for RT-qPCR

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この商品について

NACRES:
NA.55
UNSPSC Code:
41106300

主要文書

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製品名

FastStart TaqMan®プローブマスター, sufficient for 100 reactions, sufficient for 500 reactions, sufficient for 2000 reactions, suitable for qPCR, suitable for RT-qPCR

usage

sufficient for 100 reactions
 sufficient for 2000 reactions
 sufficient for 500 reactions

feature

dNTPs included: no
hotstart

manufacturer/tradename

Roche

packaging

pkg of 100 x 50 μL reactions (04673409001)
pkg of 2000 x 50 μL reactions (04673433001)
pkg of 500 x 50 μL reactions (04673417001)

technique(s)

RT-qPCR: suitable
qPCR: suitable

input

purified DNA

detection method

probe-based

Quality Level

100

関連するカテゴリー

Analysis Note

機能検査：各ロットを次の3つのテンプレートを使用して各ロットのqPCRにおける性能を検査します。GCリッチテンプレート、ATリッチテンプレート、長いテンプレート（約440 bp）。

Application

FastStart TaqMan® Probe Masterは以下の用途に使用されています。
  • 定量的でリアルタイムのDNA検出アッセイ
  • qPCRおよび2段階逆転写(RT)-qPCR
  • 加水分解プローブ検出フォーマットに

Features and Benefits

  • qPCRの感度と特異性を高めます。
マスターミックスに含まれるホットスタート酵素FastStart Taq DNAポリメラーゼと最高純度のヌクレオチドを使用して、低いサイクル閾値（Ct）を生成します。
  • プローブベースのアッセイと併用します。
Universal ProbeLibraryプローブまたはその他の加水分解プローブを使用したアッセイで、高感度かつ特異的な結果を達成します。
  • 広範なDNAまたはcDNAターゲットを増幅および検出します。
GCリッチまたはATリッチな断片を含む、最大500 bpの長さの断片を増幅します。
  • LightCycler®機器以外のあらゆるリアルタイムqPCR機器でご使用ください。
ROX参照色素を含むものとROXを含まないものの2つのフォーミュレーションから選択します。
  • アガロースゲルで増幅生成物を視覚化します。

  • ロボットピペッティングステーションを使用してqPCR反応をセットアップします。
長時間の反応セットアップ時間中、室温で安定したマスターミックスから得られる利点。
  • 持ち越し汚染の防止：
ミックスにはdUTPが含まれているため、ウラシル-DNAグリコシラーゼと併用して持ち越し汚染（増幅されたDNAの混入）から生じる偽陽性を防ぐことができます。

General description

FastStart TaqMan® Probe Master は、LightCycle® 装置以外のリアルタイム PCR システムでの定量的ポリメラーゼ連鎖反応（qPCR）および逆転写（RT）-qPCR 用の、ROX なしでそのまま使用できるホットスタート反応混合物です。これはすべての試薬（プライマー、プローブ、およびテンプレートを除く）を含む2倍濃縮マスターミックスです。このマスターミックスを使用すると、DNAの検出と分析のための反応の準備が簡素化されます。これにより、限定したDNA配列の非常に高感度な検出と定量が可能になります。
また、ホットスタートプロトコルを使用すれば、PCRの特異性と収率が大幅に向上することも示されています。FastStart Taq DNAポリメラーゼの一部のアミノ酸残基には熱不安定性のブロック基があり、室温ではこれが酵素を修飾して不活化します。したがって、プライマーが非特異的に結合できる間は、伸長が生じません。FastStart Taq DNAポリメラーゼは、高温でブロック基を除去することにより（すなわち、+95°Cにおけるプレインキュベーション段階）活性化されます。
FastStart TaqMan® Probe Masterは、GCリッチまたはATリッチなものを含むあらゆるDNAまたはcDNA標的の増幅および検出に使用できます。しかし、使用する特定のリアルタイムPCR機器の反応条件に検出プロトコルを適応させ、各標的向けの特異的な加水分解プローブとPCRプライマーをデザインする必要があるでしょう。
このマスターミックスとTranscriptor First Strand cDNA Synthesis Kitを組み合わせることで、2段階qRT-PCRで優れた結果を得ることができます。
ホットスタートプロトコールは、PCRの特異性、感度、および収量を大幅に改善することが示されています。FastStart Taq DNAポリメラーゼの一部のアミノ酸残基には熱不安定性のブロッキング基があり、室温ではこれが修飾酵素を不活性にします。したがって、プライマーが非特異的に結合できる期間中に延長は生じません。FastStart Taq DNAポリメラーゼは、高温でブロッキング基を除去（+95°Cでのプレインキュベーションステップ）すると活性化されます。

Other Notes

qPCRターゲット
原則として、FastStart TaqMan® Probe Masterは、GCリッチまたはATリッチなものを含む、あらゆるDNAまたはcDNAターゲットの増幅と検出に使用できます。ただし、各ターゲットには以下が必要です。

  • 検出プロトコールをリアルタイムPCR機器の反応条件に適合させること、および
  • ターゲット固有のPCRプライマーと加水分解プローブを設計すること。

一般的な推奨事項については、リアルタイムPCR装置の取扱説明書を参照してください。
2種類のフォームが利用可能です。
マスターミックスは、ROX参照色素を含むものとROXを含まないものの2種類のフォームが利用可能です。
持ち越し汚染の防止。
このマスターにはdUTPが含まれています。dUTPはPCR製品に組み込まれ、持ち越し汚染に起因する擬陽性を防ぐのに役立ちます。その後のPCRでウラシルDNAグリコシラーゼを追加し、ウラシルを含む持ち越し汚染物質（以前のPCRでの増幅生成物）を分解できます。
qRT-PCR
このマスターミックスを弊社の2ステップqRT-PCR用Transcriptor First Strand cDNA合成キットと組み合わせます。このキットは優れた結果を提供し、すべてのリアルタイムPCR機器で効率的に動作します。
FastStart TaqMan® Probe Masterは、FastStart Taq DNAポリメラーゼ、反応緩衝液およびヌクレオチド（dATP、dCTP、dGTP、dUTP）を含む2倍濃縮のマスターミックスです。
生命科学研究専用です。診断手順には使用しません。

Legal Information

LightCycler is a registered trademark of Roche
TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

保管分類

12 - Non Combustible Liquids

wgk

WGK 1

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does not flash

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ULK1 and ULK2 Regulate Stress Granule Disassembly Through Phosphorylation and Activation of VCP/p97
<BIG>Wang B, et al.</BIG>
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Vernal R, et al.
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Disturbances in autophagy and stress granule dynamics have been implicated as potential mechanisms underlying inclusion body myopathy (IBM) and related disorders. Yet the roles of core autophagy proteins in IBM and stress granule dynamics remain poorly characterized. Here, we demonstrate

資料

PCR Master Mix

PCR master mix simplifies PCR/RT-PCR with components like DNA polymerase, dNTPs, MgCl2, and buffer, available commercially or DIY.

Hot Start PCR

The purpose of Hot Start PCR is to inhibit the PCR reaction in order to reduce nonspecific amplification, prevent the formation of primer dimers, and increase product yields.

PCRマスターミックス

PCRマスターミックスは、DNAポリメラーゼ、dNTP、MgCl2、バッファーのような成分によりPCR/RT-PCRの反応を簡略化するもので、市販のものも自身で作製するものもあります。

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