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Merck

C7657

コラゲナーゼ Clostridium histolyticum由来

Type XI, 2-5 FALGPA units/mg solid, ≥800 CDU/mg solid

別名:

クロストリジオペプチダーゼA

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この商品について

CAS番号:
9001-12-1
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-582-9
MDL number:
MFCD00130830
EC Number:
3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
Specific activity:
≥800 CDU/mg solid
2-5 FALGPA units/mg solid
Biological source:
Clostridium histolyticum

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製品名

コラゲナーゼ Clostridium histolyticum由来, Type XI, 2-5 FALGPA units/mg solid, ≥800 CDU/mg solid

biological source

Clostridium histolyticum

form

powder

specific activity

≥800 CDU/mg solid
2-5 FALGPA units/mg solid

mol wt

68-130 kDa

solubility

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C

application(s)

diagnostic assay manufacturing

storage temp.

−20°C

Quality Level

200

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Analysis Note

クロストリパイン活性、非特異的中性プロテア-ゼ活性、およびトリプシン活性も有しています。

Application

この製品は、膵管腺癌（PDAC）細胞株の単離および膵線維芽細胞の組織培養に使用されています。
クロストリジオペプチダーゼAは、コラーゲンの断片化後のMALDI-TOF（マトリックス支援レーザー脱離／イオン化飛行時間型）質量分析（MS）に基づいて少量のコラーゲンを評価するための定量法の記述に関する研究に使用されています。

Biochem/physiol Actions

コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。 本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。
組織からの効果的な細胞の遊離には、コラゲナーゼ酵素と中性プロテアーゼの作用を必要とします。コラゲナーゼは、酵素1モルあたり4グラムのカルシウム（Ca2+）原子によって活性化されます。培養濾液は、分子量68～130 kDaの間の、少なくとも7つの異なるプロテアーゼを含んでいると思われます。至適pHは6.3～8.8です。本酵素は、通常、組織サンプル中の結合成分を消化し、個々の細胞を遊離させるために使用されます。コラゲナーゼ処理により、幾つかの細胞が死ぬことがあります。通常、0.1～5 mg/mLの範囲にある濃度は、断片化に使用されます。反応時間は15分～数時間で、細胞死を起こし過ぎることなく満足のいく細胞解離効率が得られます。カルシウムとBSAを含有するKrebs Ringer緩衝液が好ましく、活性にはZn2+が必要です。

Other Notes

1 コラーゲン消化単位（CDU）は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり　1.0 umol　の BAEE を加水分解します。

Preparation Note

保存溶液は、37℃、pH 7.4で、0.36 mMの塩化カルシウム（TESCA）を含有する50 mMのTES緩衝液（TESCA）に0.05～0.1 mg/mLのコラゲナーゼを溶解することにより調製できます。

pictograms

Health hazardExclamation mark
GHS08,GHS07

signalword

Danger

Hazard Classifications

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

target_organs

Respiratory system

保管分類

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 1

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

C7657-5G: + C7657-1G-PW: + C7657-PM: + C7657-100MG: + C7657-500MG: + C7657-5G-PW: + C7657-25MG: + C7657-500MG-PW: + C7657-BULK: + C7657-VAR: + C7657-100MG-PW: + C7657-25MG-PW: + C7657-1G:

jan

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試験成績書（COA）

Lot/Batch Number
0000483761
0000483759
0000483759
0000483761
0000458662

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プロトコル

FALGPA(N-(3-[2-フリル]アクリロイル)-Leu-Gly-Pro-Ala)を用いたコラゲナーゼ（EC 3.4.24.3）の酵素アッセイ

N-(3-[2-フリル]アクリロイル)-Leu-Gly-Pro-Alaを、連続分光光度法による速度測定（345 nm）で使用して、コラゲナーゼ活性を測定します。コラゲナーゼは、コラーゲンペプチド結合を加水分解します。

Enzymatic Assay of Collagenase (EC 3.4.24.3) using FALGPA (N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala)

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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