DUO92010
Duolink® In Situ Probemaker MINUS
別名:
in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent
product line
Duolink®
technique(s)
immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable
suitability
suitable for brightfield
suitable for fluorescence
shipped in
wet ice
storage temp.
−20°C
Quality Level
関連するカテゴリー
Application
ご使用になる一次抗体（IgGクラス、モノまたはポリクローナル）を標準免疫蛍光（IF）アッセイ、免疫組織染色（IHC）アッセイまたは免疫細胞染色（ICC）アッセイで検査し、最適な固定、ブロッキングおよび力価の条件を確認してください。Duolink® in situ試薬は、固定細胞、サイトスピン細胞、スライド上で増殖した細胞、ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）切片、または組織 （新鮮または凍結）への使用に適しています。細胞の最小数は不要です。
私たちはお客様と協力して作業します。私たちのカスタム・サービス・プログラムに対する理解が深まると、お客様のDuolink®プロジェクトが加速されます。
Duolink®全製品のリストをご覧ください。
私たちはお客様と協力して作業します。私たちのカスタム・サービス・プログラムに対する理解が深まると、お客様のDuolink®プロジェクトが加速されます。
Duolink®全製品のリストをご覧ください。
完全なDuolink® PLA in situ実験を行うには、2つのターゲットエピトープを認識する2つの一次抗体（PLA、IHC、ICCまたはIFで検証済み）が必要です。その他の必要な試薬は、異なる種由来の一対のPLAプローブ（1つはPLUS、1つはMINUS）、検出試薬、洗浄バッファー、およびマウント剤などです。分析は免疫蛍光アッセイ標準装置を用いて行います。HRPは明視野検出にも利用できます。
特異性
Duolink® In Situ Probemakerは、特定のアッセイ要件に合わせてお客様独自のPLAプローブを作成できるようにし、お客様の可能性をさらに拡大します。
Duolink® In Situ Probemaker PLUSとMINUSを使用すると、素早く便利な手順でPLUSとMINUSのオリゴアームをお客様の抗体に直接接合させるだけで済みます。これは、独自の能力を提供するだけでなく、Duolink® In Situアッセイを行う上で、お客様の一次抗体はどの種に由来していてもよいことを意味します。
アプリケーションノート
接合される抗体の濃度は1 mg/mLでなければなりません。20 mLを超える容量は接合に使用しないでください。抗体はアミンフリーのバッファー、望ましくはPBS中になければなりません。バッファーは無担体とすべきですが、0.1%までのBSA、5%までのトレハロース、および0.02%までのアジ化ナトリウムを含んでいても構いません。
特異性
Duolink® In Situ Probemakerは、特定のアッセイ要件に合わせてお客様独自のPLAプローブを作成できるようにし、お客様の可能性をさらに拡大します。
- ホモダイマーの研究
- 同じ種由来の2つの一次抗体を用いたタンパク質間相互作用の研究
- あらゆる種に由来する一次抗体を用いたタンパク質間相互作用の研究
Duolink® In Situ Probemaker PLUSとMINUSを使用すると、素早く便利な手順でPLUSとMINUSのオリゴアームをお客様の抗体に直接接合させるだけで済みます。これは、独自の能力を提供するだけでなく、Duolink® In Situアッセイを行う上で、お客様の一次抗体はどの種に由来していてもよいことを意味します。
アプリケーションノート
接合される抗体の濃度は1 mg/mLでなければなりません。20 mLを超える容量は接合に使用しないでください。抗体はアミンフリーのバッファー、望ましくはPBS中になければなりません。バッファーは無担体とすべきですが、0.1%までのBSA、5%までのトレハロース、および0.02%までのアジ化ナトリウムを含んでいても構いません。
- 2つに分割したモノクローナル抗体の1つを用いてホモダイマーを研究します。1つはPLUSオリゴで、もう1つはMINUSオリゴで標識します。
- 同一種に由来する抗体を使用します。タンパク質間相互作用、タンパク質修飾または単一タンパク質は、同じ種に由来する2つの一次抗体を用いて研究します。抗体のうちの1つはPLUSオリゴで、もう1つはMINUSオリゴで標識します
- いずれかの種に由来する抗体を使用します。マウス、ウサギまたはヤギ以外の種由来の一次抗体を一方または両方に使用してタンパク質間相互作用、タンパク質修飾または単一タンパク質を研究します。お客様の二次抗体の1つはPLUSオリゴで、もう1つはMINUSオリゴで標識します。あるいは、標識付けされた1つの二次抗体と標準の二次Duolink® In Situ PLAプローブを組み合わせます。
Features and Benefits
- 過剰発現や遺伝子操作は不要
- 高い特異性(偽陽性の減少)
- ローリング・サークル増幅による単一分子感受性
- 相対定量化が可能
- 特別な装置は不要
- FRETより迅速かつ簡単
- co-IPより精度が向上
- すぐに公表できる結果
Other Notes
Duolink®近接ライゲーション・アッセイ(PLA®)により、固定細胞試料と組織試料でのタンパク質相互作用、翻訳後修飾、および単分子レベルでのタンパク質発現レベルの内在的検出が可能になります。
Duolink®In Situ Probemaker Protocolに従って、Duolink®In Situ Probemaker PLUSとMINUSを使用します。この製品は、使用する検出試薬によってDuolink®In Situ Fluorescence ProtocolとDuolink®In Situ Brightfield Protocolのどちらにも適用できます。詳細については、「お客様自身の(PLA®)プローブを作成する」をご覧ください。
弊社のDuolink® PLAリソース・センターにアクセスし、Duolink®の実験、用途、トラブルシューティングなどの実行方法に関する情報を入手してください。
Duolink®In Situ Probemaker Protocolに従って、Duolink®In Situ Probemaker PLUSとMINUSを使用します。この製品は、使用する検出試薬によってDuolink®In Situ Fluorescence ProtocolとDuolink®In Situ Brightfield Protocolのどちらにも適用できます。詳細については、「お客様自身の(PLA®)プローブを作成する」をご覧ください。
弊社のDuolink® PLAリソース・センターにアクセスし、Duolink®の実験、用途、トラブルシューティングなどの実行方法に関する情報を入手してください。
この製品は、
- Duolink® In SituオリゴヌクレオチドMINUS – 20 μgの抗体の一接合のための凍結乾燥活性化済みMINUSオリゴヌクレオチドのバイアル1本
- 接合緩衝液 – 接合反応用緩衝液
- 停止試薬 – 接合反応を停止させる
- 保管溶液 – 調製したPLAプローブ(接合された抗体)を保存するための緩衝液
- 20xアッセイ試薬 – 実験者が最適化した抗体希釈剤に加える試薬
- ブロッキング溶液 – Duolinkで染色する前に試料をブロックする®In Situ
- PLAプローブ希釈剤 – PLAプローブ(接合された抗体)を最終アッセイ濃度に希釈するための緩衝液で構成されています
Legal Information
Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
signalword
Warning
hcodes
Hazard Classifications
Aquatic Chronic 2 - Skin Sens. 1
保管分類
10 - Combustible liquids
wgk
WGK 3
Foivos-Filippos Tsokanos et al.
The EMBO journal, 35(10), 1058-1076 (2016-03-19)
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Science translational medicine, 10(451) (2018-07-27)
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資料
実験のTips & Tricks、FAQ、基本的なトラブルシューティングなどのサポート情報。
Duolink™アッセイプロトコルの準備・セットアップ・実施にあたり考慮すべき事項
Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol
Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.
プロトコル
Duolink® kits use in situ PLA® technology for accurate quantification of individual proteins, interactions, and modifications in cells and tissue.
関連コンテンツ
近接ライゲーションアッセイを用いたタンパク質間相互作用、翻訳後修飾、低発現タンパク質の検出、定量および可視化などの応用例
Applications to detect, quantify and visualize protein-protein interactions, post-translational modifications and low expression protein detection using proximity ligation assay
Instructions
Application Note
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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