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Merck

DUO92014

Duolink ®in situ検出試薬グリーン

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この商品について

NACRES:
NA.32
UNSPSC Code:
12352200
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product line

Duolink®

technique(s)

proximity ligation assay: suitable

fluorescence

λex 495 nm; λem 527 nm (green) (FITC (Cyanine 2), Zeiss Filter set 38)

suitability

suitable for fluorescence

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

Quality Level

General description

Duolink® In Situ検出試薬グリーンには、結合したPLA®プローブの増幅および検出を行うために必要なDuolink In situ試薬のすべてが含まれています。検出プローブには、Cy®2または FITCと同じフィルターを使用して視覚化できるフルオロフォア(lex = 495 nm 、lem = 527 nm)が含まれています。Duolink In situ試薬を用いて実施する実験で、固定細胞および組織サンプル中のタンパク質相互作用、タンパク質相互作用、タンパク質発現レベル、翻訳後修飾を単一分子レベルで検出し視覚化できます。

Application

Duolink®近接ライゲーションアッセイ(PLA®により、固定化された細胞や組織サンプルにおけるタンパク質相互作用、翻訳後修飾、1種類のタンパク質の発現レベルを検出することができます。
Duolink® In Situ検出試薬は、下記の近接ライゲーションアッセイに使用されています:
  • 凍結ラット脳切片からのバソプレシンおよび性腺刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)
  • ヒト胎児由来腎臓293細胞(HEK)
  • 下垂体組織

Biochem/physiol Actions

緑色の蛍光検出試薬の多くは、FITCフィルターとともに使用されます。

Features and Benefits

  • 過剰発現や遺伝子操作は不要
  • 高い特異性(より少ない偽陽性)
  • ローリングサークル型の増幅による単一分子の感度
  • 相対的な定量が可能
  • 特別な機器は不要
  • FRETよりも迅速で簡単
  • co-IPと比較して精度が向上
  • 論文などにそのまま使用できる結果

Preparation Note

完全なDuolink® PLA in situ実験を行うには、2つのターゲットエピトープを認識する2つの一次抗体が必要です(PLA、IHC、ICCまたはIFで検証済み)。必要なその他の試薬には、異なる種由来のPLAプローブ1対(一方がPLUS、もう一方がMINUS)、検出試薬、洗浄緩衝液、マウンティング培地などがあります。一次抗体は、Duolink® PLAプローブとして同じ種に由来するものでなければならないことに注意してください。解析は、標準的な免疫蛍光検査機器を用いて行います。
成分を-20℃で保存してください。酵素は常に低温(-20℃)に保つ必要があり、冷凍庫から取り出すときには凍結ブロックを使用してください。

Other Notes

  • 5xライゲーション-PLAプローブおよびライゲーションに必要なすべての成分(リガーゼを除く)にハイブリダイズするオリゴヌクレオチド
  • 1xリガーゼ(1単位/μL)
  • 1xポリメラーゼ(10単位/μL)
  • 5x増幅グリーンーローリングサークル増幅(RCA)に必要なすべての成分(ポリメラーゼを除く)を含みますまた、RCA産物とハイブリダイズするフルオロフォラで標識したオリゴヌクレオチドプローブも含みます。
詳細についてはデータシートをご覧ください。

検出キットに含まれないもの:

一次抗体、PLAプローブ、洗浄バッファー、封入剤
本製品はDuolink® In Situ蛍光プロトコルに従って使用してください。簡易取扱説明書一式を用意しています。

Duolink®を用いた実験、応用例、トラブルシューティングの方法などの情報は、Duolink® PLAリソースセンターのサイトをご覧ください。

完全なDuolink® PLA in situ実験を行うには、2つのターゲットエピトープを認識する2つの一次抗体が必要です(PLA、IHC、ICCまたはIFで検証済み)。必要なその他の試薬には、異なる種由来のPLAプローブ1対(一方がPLUS、もう一方がMINUS)、検出試薬、洗浄緩衝液、マウンティング培地などがあります。一次抗体は、Duolink® PLAプローブとして同じ種に由来するものでなければならないことに注意してください。解析は、標準的な免疫蛍光検査機器を用いて行います。

Duolink®プロジェクトを推進するため、カスタムサービスプログラムで詳細をご覧になり、メルクにお申し付けください。

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Legal Information

Cy is a registered trademark of Cytiva
Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

pictograms

Health hazard

signalword

Danger

hcodes

Hazard Classifications

Resp. Sens. 1

保管分類

10 - Combustible liquids


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

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資料

細胞および組織中のタンパク質の免疫蛍光検出プロトコル

実験のTips & Tricks、FAQ、基本的なトラブルシューティングなどのサポート情報。

Duolink™アッセイプロトコルの準備・セットアップ・実施にあたり考慮すべき事項

Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol

プロトコル

このページでは、蛍光顕微鏡観察のためのDuolink™ In Situの簡易プロトコルを紹介しています。

This protocol describes how to perform immunofluorescent detection of proteins in cells and tissue.

This page details the Duolink® In Situ Short Protocol for fluorescence detection

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近接ライゲーションアッセイを用いたタンパク質間相互作用、翻訳後修飾、低発現タンパク質の検出、定量および可視化などの応用例

Applications to detect, quantify and visualize protein-protein interactions, post-translational modifications and low expression protein detection using proximity ligation assay

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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