Benzonase^® ヌクレアーゼ

Benzonase^®ヌクレアーゼは、Serratia marcescens由来の高性能の遺伝子組換えエンドヌクレアーゼです。2つの必須ジスルフィド結合を持つこの二量体タンパク質は、幅広い使用条件下であらゆる形のDNAおよびRNA（一本鎖、二本鎖、直鎖状、環状）を攻撃して分解することができます。Benzonase^®ヌクレアーゼは、核酸を除去し、タンパク質試料の純度と品質を高めることができます。

タンパク質サンプルから核酸を除去する際に使用します。

Benzonase^®ヌクレアーゼは、次のような用途で使用されています：DNA と RNAを消化してすべての核タンパク質の完全放出を促進する氷冷溶解バッファーCの成分として使用するため、免疫沈降ステップにおいて、核質およびクロマチンからタンパク質複合体を放出するため、RIPA法のサプリメントとして免疫沈降法のためにSHSY5Y細胞を分画するため、脱細胞化法において大動脈根から残存する核酸を除去するため

Benzonase^®ヌクレアーゼは、核酸を5′-一リン酸終端を持つ長さ3～5塩基のオリゴヌクレオチドへと完全に消化できるため、組換えタンパク質からの核酸の除去や核酸の完全消化が必要なアプリケーションに最適なツールとなっています。タンパク質抽出物の粘度を低下させ、細胞凝集を予防することに加えて、Benzonase®ヌクレアーゼでタンパク質サンプルを事前処理することで、結合している核酸を除去することにより2Dゲル電気泳動における分離を著しく改善できます。この汎用性の高い酵素は、未変性と熱変性の両方のDNAとRNAを消化することができ、酵素活性至適pHは8.0～9.2であることが確認されています。Benzonase^® ヌクレアーゼは、マイクロバイオームサンプルから宿主DNAを効果的に除去します。多くの場合、マイクロバイオームサンプル（唾液や皮膚など）には、宿主DNAが高い割合で含まれており、これがダウンストリームの結果を妨げます。メルクのエキスパートは、宿主DNAの低減により、データを増やし改善しながらシーケンシング費用を削減できることを明らかにしています。実験データは、技術論文『Benzonase^® Nuclease for Microbiome Workflows』に掲載しています。

未変性または熱変性のDNA, RNAを分解します。

50%グリセロ-ル溶液(20 mM Tris-HCl(pH 8.0), 2 mM MgCl₂, 20 mM NaClを含有)。

1ユニットは、反応液を2.625 mLとした場合に、pH 8.0、37°C、30分間で、超音波破砕されたサケ精子DNAを切断して、1.0のΔA₂₆₀に相当する酸可溶性オリゴヌクレオチドを生じる酵素量です。

ベンゾナーゼ^®ヌクレアーゼは、Merck KGaA（ダルムシュタット、ドイツ）および/またはその関連会社が供給しています。

Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany