ペルオキシダーゼ from horseradish

西洋ワサビペルオキシダ-ゼは西洋ワサビ(Amoracia rusticana)の根から単離された酵素で、ペルオキシダ-ゼのフェロプロトポルフィリン類に属します。HRPは4個のジスルフィド架橋結合を有する1本のポリペプチドです。18%の糖を含む糖タンパク質です。糖の組成はガラクト-ス、アラビノ-ス、キシロ-ス、フコ-ス、マンノ-ス、マンノサミン、ガラクトサミンからなり、個々のアイソザイムによって異なります。 この酵素の分子量(約44 kDa)には、ポリペプチド鎖(33,890 Da)、ヘミン+Ca²⁺(約700 Da)、糖(約9,400 Da)が含まれます。HRPには少なくとも7種類のアイソザイムが存在します。 西洋ワサビペルオキシダ-ゼアイソザイムの等電点は3.0~9.0です。

以下の用途に、西洋ワサビのペルオキシダーゼが使用されています：

• 糞便のデンプン分析に
• Trinder（トリンダー）法による血漿グルコースレベルの定量に
• フェルロイル化アラビノキシラン画分をインキュベートし、酸化カップリングも評価するために
• 糖タンパク質の検出に

西洋ワサビペルオキシダーゼは、基質とインキュベートすると、標識化した分子の発色性、蛍光性、または化学発光性の誘導体を生成し、定量を可能にします。

HRPは過酸化水素（H₂O₂）と容易に結合し、その結果生じた[HRP-H₂O₂]複合体は様々な水素供与体を酸化することができます。至適pHは6.0～6.5であり、酵素は5.0～9.0のpH範囲で最も安定しています。HRPは、ジスルフィド結合により、また、アミノおよびチオール指向の架橋剤を介して、グルタルアルデヒド、過ヨウ素酸酸化などいくつかの異なる方法により、抗体と抱合することができます。これは酵素標識β-ガラクトシダーゼやアルカリホスファターゼよりも小さく、より安定しています。したがって、これは最も望ましい標識です。また、そのグリコシル化により、非特異的結合も減少します。また、これは溶液中のグルコースおよび過酸化物の定量にも使用されます。アジ化ナトリウム、シアン化物、L-シスチン、重クロム酸塩、エチレンチオ尿素、ヒドロキシルアミン、硫化物、バナジン酸塩、p-アミノ安息香酸およびCd²⁺、Co²⁺、Cu²⁺、Fe³⁺、Mn²⁺、Ni²⁺、Pb²⁺イオンが酵素活性を阻害することが知られています。

RZ(Reinheitszahl)値は、0.5~1.0 mg/mL脱イオン水溶液で測定したA₄₀₃/A₂₇₅の吸光度比です。これはヘミン含量を測定するもので、酵素活性を測定するものではありません。RZ値の高い標品でも酵素活性が低いことがあります。

1ピロガロールユニットは、pH 6.0、20°Cで 20秒あたり1.0 mgのプルプロガリンをピロガロールから生成する酵素量です。

ペルオキシダーゼに関する詳細情は、www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorerをご覧ください。