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Merck

T7168

トリプシン ブタ膵臓由来

tablet, 1 mg tablet

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この商品について

CAS番号:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
MDL number:
Specific activity:
90-110% (compared to standard)
Biological source:
Porcine pancreas
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製品名

トリプシン ブタ膵臓由来, tablet, 1 mg tablet

biological source

Porcine pancreas

form

tablet

specific activity

90-110% (compared to standard)

mol wt

23.8 kDa

storage temp.

−20°C

Quality Level

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Application

ペプチドをトリプシンで消化する場合、トリプシン:ペプチドについて約 1:100~1:20 の比を使用してください。この製品の代表的な用途は、培養表面から接着細胞を除去することです。細胞をその基材から除去するのに必要なトリプシンの濃度は、主に細胞型および培養の時期に依存します。トリプシンはまた、細胞培養期間中に細胞を再懸濁するために、タンパク質の消化に関するプロテオミクス研究において、およびさまざまなインゲル消化において使用されています†。さらなる応用例として、膜ベースの技術により結晶化を評価すること、ならびにタンパク質のフォールディング速度および収率は動的トラップの存在により制限を受ける可能性があることを試験において明確にすることが挙げられます。
免疫組織化学的手法において、通常の固定・処理後の、染色の向上および抗原のアンマスキングに使用します。

Biochem/physiol Actions

トリプシンは、リシンおよびアルギニン残基の C 末端側でペプチドを開裂させます。この反応の加水分解速度は、酸性残基が切断部位のいずれかの側にある場合に低速化し、また加水分解は、プロリン残基が切断部位のカルボキシル側にある場合には停止します。トリプシン活性の至適 pH は 7~9 です。トリプシンは、アミノ酸の合成誘導体のエステル結合およびアミド結合を開裂させるように作用することも可能です。トリプシンが作用するペプチド結合を覆い隠すカルシウムおよびマグネシウムイオンを中和するキレート剤として、EDTA がトリプシン溶液に添加されます。これらのイオンを除去すると酵素活性が上昇します。

DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF、およびアプロチニン等を含むセリンプロテアーゼ阻害剤がトリプシンを阻害します。

Disclaimer

1 mM HCl溶液は小分けして-20°Cで保存して1年間安定です。Ca2+の存在もまたトリプシンの自己消化を減少させ、溶液中での安定性が維持されます。トリプシンはまた2.0 M尿素、2.0 Mグアニジン塩酸塩あるいは0.1%(w/v)SDS溶液中でその活性を最大限に維持します。

General description

トリプシンは223アミノ酸残基からなる1本鎖ポリペプチドから成り、トリプシノーゲンのペプチド鎖のリジン‐イソロイシン部位の切断によりN末端のヘキサペプチドが除かれることにより生成します。アミノ酸配列は6つのジスルフィド結合により架橋されています。これがトリプシン、β‐トリプシンの生来の姿となります。β‐トリプシンは自己分解し、リジン‐セリン残基部位で切断し、α‐トリプシンを生成することがあります。トリプシンはセリンプロテアーゼファミリーメンバーの一つです。

Other Notes

1BAEE ユニットは、BAEE を基質として用いた場合、25°C、pH 7.6 で 1 分当たり 0.001 のΔA253 を生成します。1BTEE ユニット = 320ATEE ユニット。反応容積 = 3.2 mL(光路長 1 cm)。

Preparation Note

本製品はハンクス平衡塩溶液に25 mg/mLで溶解する凍結乾燥粉末です。
EDTAを必要とする用途の場合、Ca2+とMg2+のいずれも含有しない緩衝塩溶液でトリプシンを可溶化してください。

pictograms

Health hazard

signalword

Danger

hcodes

Hazard Classifications

Resp. Sens. 1

保管分類

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 1

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

名称等を表示すべき危険物及び有害物

ishl_indicated

名称等を通知すべき危険物及び有害物

ishl_notified

T7168-20TAB: + T7168-5TAB: + T7168-5TAB-KC: + T7168-VAR: + T7168-50TAB: + T7168-BULK:

jan


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Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), 137, 223-233 (2000-08-19)
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プロトコル

パラフィン包埋組織切片中の特定の抗原を染色および可視化する免疫組織染色(IHC)の全プロトコルをご紹介します。

Continuous spectrophotometric rate determination method using BAEE substrate measures trypsin activity, essential for enzyme characterization.

Use this protocol to for the entire immunohistochemistry (IHC) procedure through staining and visualization of specific antigens in paraffin-embedded tissue sections.

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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