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ダルベッコ改良型イーグル培地(DMEM)

この画像には、赤い液体「テトラメチルロダミンエチレンジアミン」が入った、同じ形の正方形のボトルが5本並んでおり、それぞれに白と黒のジグザグ模様のキャップが付けられています。

ダルベッコ改良イーグル培地(DMEM)は、細胞および組織培養用の定義培地の中でも、多くの付着性細胞の表現型に最も広く適した培地の一つです。これには、哺乳類細胞、昆虫細胞、植物細胞などが含まれます。 オリジナルのイーグル培地は1950年代に開発され、ニワトリ細胞の培養用に調製されたものでした。しかし、ダルベッコによる改良版は、オリジナルのイーグル培地と比較して、特定のアミノ酸やビタミンの含有量を最大4倍まで高めた、強化された補充処方にあります。 

細胞培養において、DMEMは初代細胞、幹細胞、形質転換細胞など、さまざまな種類の細胞の増殖を支える培地として使用されます。改良型DMEMは、創薬、組織工学、細胞シグナル伝達経路の研究など、さまざまな研究用途にも利用できます。 

DMEMは、タンパク質、脂質、成長因子などの必要な栄養素が欠けているため、それ単体では完全培地とは言えません。そのため、培養中の細胞に完全かつバランスの取れた成長環境を提供するには、胎児牛血清(FBS)、アミノ酸、その他の栄養素などの成分を添加する必要があります。

当社の製品ラインナップには、さまざまなグルコース濃度の製品に加え、L-グルタミンを含むものや含まないものがあります。エストロゲンに敏感な用途向けに、pH指示薬であるフェノールレッドを含まない製品もご用意しており、便利な即用型の液体培地から、保管が容易で保存期間が長い経済的な粉末培地まで、幅広い製品を取り揃えています。


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DMEM – 高グルコース対低グルコース 

DMEMには、培養する細胞の特定のニーズや実験の目的に応じて、さまざまな組成のものが用意されています。当初の培地は、1 g/Lという低グルコース濃度で調製されており、高グルコースに敏感で、グルコース濃度の高い培地では十分に増殖できない細胞の培養に適しています。一方、高グルコースDMEMには4.5 g/Lのグルコースが含まれており、最適な増殖のために高濃度のグルコースを必要とする細胞の培養に一般的に使用されます。

無血清培地(SFM)

血清は多くの細胞培養培地の成分であり、細胞の増殖や成長に必要なホルモン、成長因子、その他の栄養素を培地に補うためにしばしば使用されます。しかし、血清には実験結果に影響を及ぼす可能性のある不純物や汚染物質が含まれている場合があり、その使用は倫理的な懸念を引き起こす可能性があります。 

無血清培地は、動物血清やその他の動物由来成分を含まないように調製されています。これらの培地は、培養細胞の増殖と成長を支える適切な栄養素およびホルモン配合で構成されています。 

細胞培養において無血清培地を使用する利点としては、生産性の向上、結果の一貫性の向上、および精製や下流工程の容易化などが挙げられる。また、無血清培地は、特定の細胞種や研究目的に合わせて、成長因子を特定の組み合わせで配合することも可能である。これらの培地は、組換えタンパク質の生産、細胞の増殖・分化の研究、細胞シグナル伝達経路の解明、ウイルスワクチンの製造、さらには創薬および医薬品開発など、幅広い細胞培養用途に適している。

そのような無血清培地の一つに、DMEMとハムズF-12の混合培地があり、MDCK、グリア細胞、線維芽細胞、ヒト内皮細胞、ラット線維芽細胞などの哺乳類細胞の増殖に使用される。 DMEMには高濃度のアミノ酸、グルコース、ビタミンが含まれており、ハムズF-12は亜鉛、プトレシン、ヒポキサンチン、チミジンを供給します。緩衝能の低下を補うために、FBSやHEPESなどの緩衝剤を添加することも可能です。

フェノールレッドを含むDMEMおよび含まないDMEM

フェノールレッドは、pH値の変化に応じて色が変わるpH指示薬であり、通常、0.01~0.03%の濃度でDMEMに添加されます。これは、培地のpHをモニタリングし、細胞の増殖や代謝に適した範囲内にpHが維持されていることを確認するのに役立ちます。

一部の細胞はフェノールレッドに敏感であったり、培地中のフェノールレッドの存在によって影響を受ける可能性があるため、フェノールレッドを含まないDMEMも利用可能です。タンパク質分析や遺伝子発現解析などの一部の二次的な応用では、培地中のフェノールレッドの存在が干渉を引き起こす可能性があります。また、蛍光顕微鏡法などの一部のイメージング技術においても、正確な結果を得るためにはフェノールレッドを含まないDMEMの使用が必要となる場合があります。 フェノールレッドは可視光域の光を吸収するため、これらの手法の精度に干渉する可能性があります。フェノールレッド含有DMEMと非含有DMEMのどちらを選択するかは、培養する細胞の具体的なニーズや要件、および実験の目的に依存します。