免疫検出試薬・基質

ブロッキング試薬

結合していない膜上の部位をブロッキングすることで、高いバックグラウンドの原因となる抗体の非特異的結合を防ぐことができます。 従来の牛乳、ゼラチン、その他のタンパク質ベースのブロッキング剤は、多くのブロッティング用途で有効ですが、シグナルをマスキングしたり、特定のタンパク質ターゲットの検出を妨げたりすることで、感度や検出効率を低下させる可能性があります。Immobilon^® Block ノイズキャンセリング試薬には、化学発光、蛍光、またはリン酸化タンパク質の検出を行う際にバックグラウンドレベルを低減するよう最適化された、タンパク質を含まない即用型のバッファーが含まれています。

ストレプトアビジンと二次抗体のコンジュゲート

現代の免疫検出法は、ストレプトアビジン、あるいはホースラディッシュペルオキシダーゼ（HRP）やアルカリホスファターゼ（AP）などの酵素と共有結合した二次抗体を用いた酵素結合型検出法に基づいています。結合した酵素が特定の基質の分解を触媒し、その結果としてシグナルが発生します。 ウエスタンブロッティング用に、さまざまなストレプトアビジン、プロテインA、プロテインG、および二次抗体コンジュゲートをご用意しています。また、ウエスタンブロッティングにおける化学発光、発色、および化学蛍光検出用のHRPおよびAP基質も幅広く取り揃えています。

ウエスタンブロッティング用化学発光基質

化学発光検出用のImmobilon® HRP基質は、感度を向上させ、より定量的なブロットを実現するとともに、検出に使用する抗体の濃度を低減できるため、コスト削減にもつながります。さまざまな感度を持つImmobilon®基質のラインナップから、便利な即用型または2成分型のフォーマットをお選びいただき、お客様のウェスタンブロッティング用途に最適な検出条件を確立してください。

• Immobilon^® Classico、Crescendo、Forte 化学発光基質は、ペルオキシダーゼを用いた検出用のプレミックス済み即用型試薬ファミリーであり、幅広い標的タンパク質濃度において最適な信号対バックグラウンド比を実現するため、さまざまな感度で提供されています。検出限界：
  • Immobilon^® Classico：標的タンパク質約 6 pg
  • Immobilon^® Crescendo：標的タンパク質 約 1～3 pg
  • Immobilon^® Forte：標的タンパク質
    約 400 fg  
• Immobilon^® Western HRP、Immobilon^® ECL Ultra、およびImmobilon® UltraPlus Western基質は、標準的な2成分フォーマットにおいて、卓越した感度と長いシグナル持続時間を実現します。これらの製剤により、イムノブロット検出において、より希釈された一次抗体溶液を使用することが可能になります。検出限界：
  • Immobilon^® Western HRP 基質：標的タンパク質約 400 fg
  • イモビロン® ECL Ultra 基質：低フェムトグラム範囲
  • Immobilon^® ECL UltraPlus ウエスタンブロット HRP 基質：低フェムトグラム範囲

Immobilon^® 化学発光 HRP 基質の相対感度

Cytiva™ Amersham™ ECL 検出試薬は、ルミノールをベースとした強化型 HRP 検出法を採用しており、ウェスタンブロッティングのさまざまな用途のニーズに対応できるよう、複数の配合が用意されています。 

• Cytiva Amersham™ ECL ウエスタンブロッティング検出試薬は、確認用のウエスタンブロッティング用途に推奨されます。
• Cytiva Amersham™ ECL Prime ウエスタンブロッティング検出試薬を使用すると、同じブロット上で高濃度および低濃度のタンパク質の両方を検出することができます。
• Cytiva Amersham™ ECL Select ウエスタンブロッティング検出試薬は、希釈した一次抗体および二次抗体を使用する場合でも、高い感度を発揮します。
• Cytiva Amersham™ ECL Start ウエスタンブロッティング検出試薬は、中程度および高発現タンパク質の化学発光検出用に開発されました。

ウエスタンブロッティング用発色基質

発色検出法では、ペルオキシダーゼ（HRPなど）またはアルカリホスファターゼ（AP）と結合した酵素を用いて反応を触媒し、検出用の不溶性の着色沈殿物を生成させます。当社のウエスタンブロッティング用発色基質は、溶液、粉末、錠剤の形態で提供されており、保管や使用において柔軟な選択肢をご提供します。

• SIGMAFAST™ DAB タブレット（発色性 HRP 基質）は、ホースラディッシュペルオキシダーゼと反応すると褐色を呈する比色沈殿基質で構成されており、水に溶解することで、ブロッティング検出用のすぐに使用できる緩衝溶液を調製できます。
• BCIP/NBT（青/紫）およびBCIP/TNBT（青/茶）シングル試薬（発色性AP基質）は、アルカリホスファターゼ用の高感度な発色性基質です。
• TMB Enhanced One Component HRP Membrane Substrate（発色性HRP基質）は、濃青色の生成物を生じる単一成分の発色基質です。

シグナル増強剤

• Immobilon^® シグナルエンハンサーは、ウェスタンブロッティングにおいてシグナル強度が低い場合に使用することを目的としています。抗体と抗原の反応を増強することで、シグナル強度を2～10倍に高めることができます。Immobilon^® シグナルエンハンサーは、PVDFおよびニトロセルロース膜に対応しており、発色法、化学発光法、蛍光検出法で使用可能です。
• SignalBoost™ 免疫反応増強キットは、ニトロセルロース膜またはPVDF膜上の化学発光または比色法によるターゲットシグナルを増強するように設計されています。

ストリッピングおよび再プロービング用試薬およびキット

ストリッピングおよび再プロービング用試薬は、固定化されたタンパク質に著しい影響を与えることなく、ウェスタンブロットから抗体を迅速かつ効果的に除去するように特別に配合されています。

• ReBlot™ Plus試薬は、プローブ処理済みのブロットから結合した抗体を効率的に除去します。ReBlot™ Plus試薬には、マイルドタイプとストロングタイプの2種類があります。