Anticuerpo anti-dimetil-histona H3 (Lys79), clon NL59, monoclonal de conejo

17 kDa

La listona H3 es una de las cinco proteínas histonas principales implicadas en la estructura de la cromatina de las células eucariotas. Caracterizada por un dominio globular principal y una larga cola N terminal, la H3 participa en la estructura de ′collar de perlas′ de los nucleosomas. La cola N-terminal de la histona H3 sobresale del centro globular del nucleosoma y puede experimentar varios tipos diferentes de modificaciones epigenéticas que influyen en los procesos celulares. Entre estas modificaciones se cuentan la unión covalente de grupos metilo o acetilo a los aminoácidos lisina y arginina y la fosforilación de la serina o la treonina. La dimetilación de la Lys79 en la histona H3 se asocia con la transcripción activa del gen y es un marcador de la eucromatina. La histona H3 es metilada en la Lys79 por la histona metiltransferasa Dot1L.

Epítopo: Lys79

Péptido sintético conjugado con KLH que contiene la secuencia DF_me2KTD correspondiente a la dimetil-lisina en la posición 79 de la histona H3. La secuencia inmunizante es idéntica en humanos, ratones, rata y levadura. Se añadió una cisteína C-terminal para facilitar la conjugación.

Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear

El anticuerpo anti-dimetil-histona H3 (Lys79), clon NL59, es un anticuerpo monoclonal de conejo para la detección de la dimetil-histona H3 (Lys79), también conocida como H3K79me2 e histona H3 (di metil K79) y ha sido validada en ChIP, WB, DB, Mplex.

Inmunoprecipitación de la cromatina:
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada a partir de células HeLa (1 X 10E6 equivalentes de célula por IP) se sometió a inmunoprecipitación utilizando o bien 4 µl de sobrenadante de control negativo o bien 4 µl de anti-dimetil-histona H3 (Lys79) y el kit Magna ChIP A (Nº de ref. 17-610). La inmunoprecipitación satisfactoria de fragmentos de ADN asociados a la dimetil-histona H3 (Lys79) se verificó mediante qPCR utilizando cebadores control
Para conocer los detalles experimentales, consulte los protocolos del kit EZ-Magna CHIP A (Nº de ref. 17-408) o el EZ-ChIP (Nº de ref. 17-371).

Inmunoprecipitación de la cromatina: un laboratorio independiente ha demostrado que un lote representativo de este anticuerpo funciona en la ChIP.

Análisis mediante ChIP-Seq:
un laboratorio independiente utilizó un lote representativo de este anticuerpo para ChIP-Seq. Véase Egelhofer, T.A., et al. (2011). Véase Easwaran, H., et al. (2012) Véase Suzuki, H., et al. (2011).

Inmunotransferencia por puntos: se confirmó la especificidad de un lote representativo por la capacidad de una dilución 1:2500 del anticuerpo para reconocer péptidos correspondientes a regiones de la histona H3 con varias modificaciones

Análisis mediante transferencia por puntos: se probaron la matriz de especificidad de anticuerpos anti-histona H3 Absurance (Nº de ref. 16-667) y la matriz de especificidad de anticuerpos anti-histona H2A, H2B, H4 (Nº de ref. 16-665), que contienen histonas con diversas modificaciones, con el anticuerpo anti-dimetil histona H3 (Lys9), clon NL59, nº de ref. 04-835-S (dilución 1:500). Las proteínas se visualizaron utilizando una anticuerpo burro anti-IgG conejo conjugada con HRP y un sistema de detección de quimioluminiscencia.

Subcategoría investigación
Histonas

Reconoce la dimetil-histona H3 (Lys79).

Se prevé una amplia reactividad cruzada de especies debido a la homología de la secuencia

Sobrenadante de cultivo en azida sódica al 0,05 %

Estable durante 1 año a -20°C desde la fecha de recepción.
Recomendaciones de manipulación: Tras su recepción, y antes de quitar la tapa, centrifugue el vial y mezcle suavemente la disolución. Distribúyalo en alícuotas en tubos de microcentrífuga y guárdelo a -20°C. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación que pueden dañar la IgG y afectar al rendimiento del producto.

Evaluada habitualmente por inmunotransferencia en proteínas extraídas con ácido de células HeLa

Sustituye a: 05-835

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