Anticuerpo anti-fosfo-Akt (Ser473), clon 6F5

60 kDa

Akt/PKB es una cinasa Ser/Thr y un importante efector conocido de la vía de la cinasa PI3. Está implicada en múltiples vías de señalización que se relacionan con muchos procesos biológicos: el metabolismo de la glucosa, la supervivencia celular / apoptosis, el control del ciclo celular, la angiogénesis, la diferenciación y el crecimiento y la proliferación celulares. En mamíferos existen tres isoformas de Akt (Akt1/PKB, Akt2/PKB, y Akt3/PKB). Presentan un alto grado de homología, pero difieren ligeramente en la localización de sus sitios de fosforilación reguladora. La Akt es la isoforma predominante en la mayoría de los tejidos y se cree que tiene un papel dominante en el crecimiento, la supervivencia, el desarrollo embrionario y la diferenciación de los adipocitos. La Akt2 se correlaciona con la regulación de la homeostasis de la glucosa y es la isoforma predominante expresada en los tejidos que responden a la insulina. La Akt3 es abundante en el tejido cerebral. Cada isoforma de Akt se compone de tres regiones funcionalmente distintas: un dominio de homología de Pleckstrin (PH) N-terminal que proporciona un módulo de unión a lípidos para dirigir la Akt hacia PIP3 en la membrana celular que es necesario para su activación, un dominio catalítico central que contiene la Thr308, y un motivo hidrófobo C-terminal que contiene el Ser473. La activación de Akt depende de un mecanismo regulador doble que requiere su translocación a la membrana plasmática y la fosforilación doble en la Thr308 por PDK1 y la Ser473 por el complejo TORC2.

Péptido que abarca e incluye la Ser473 fosforilada de la Akt1 humana.

Análisis de inmunofluorescencia:
las células A431 tratadas con EGF fueron fijadas, permeabilizadas y teñidas con anti-fosfo-Akt (Ser473), clon 6F5 (2 μg/ml) (rojo). Para la detección se utilizó anti-ratón conjugado con Cy3 y para teñir la actina se utilizó faloidina - AlexaFluor488 (verde).

Inmunohistoquímica:
se diluyó el anti-fosfo-Akt (Ser473), clon 6F5, 1:200, se detectó con IHC-Select con HRP-DAB.

Citometría de flujo:
se utilizó anti-fosfo-Akt (Ser473) en una dilución 1:800 para este ensayo.

El anticuerpo anti-fosfo-Akt (Ser473), clon 6F5, detecta el nivel de fosfo-Akt (Ser473) y ha sido publicado y validado para utilizar en ELISA, WB, FC, IF, IH.

Reconoce la Akt solo cuando está fosforilada en la Ser473. Este anticuerpo no muestra reacción cruzada con Akt1/PKBα cuando no está fosforilada en la Ser473.

Se prevé que reaccione con la mayoría de las especies ya que la secuencia es 100 % homóloga con la de los vertebrados más comunes.

IgG1 monoclonal de ratón purificadaκ en Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con NaN3 al 0,05 %

Presentación: Purificada

Análisis de inmunoelectrotransferencia:
0.5-1 μg/ml de este lote detectaron Akt fosforilada en lisados de fibroblastos NIH-3T3 de ratón tratados con 100 ng/ml de PDGF durante 20 minutos.

Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.